高效液相色谱法测定刺五加超临界提取物中异嗪皮啶的含量

用高效液相色谱法在线检测刺五加超临界提取物中异嗪皮啶的含量, 采用ODS 色谱柱, 检测波长为345 nm, 流动相为乙腈/超纯水(v/v)=2/8, 异嗪皮啶加样回收率100.8%, RSD 为2.0%, 该方法简便, 结果准确可靠。     

培育年限对刺五加主要药用活性成分的影响

为评价不同培育年限对刺五加根、茎部多种活性成分积累的共同影响,对提高刺五加培育和高值利用具有重要作用,可为规范化种植和合理开发利用刺五加提供理论依据。采集同一产地三年生、五年生、九年生刺五加为实验样本,运用超高效液相色谱系统（Ultra-Performance LC,Waters,Japan）分析不同培育年限对刺五加根、茎中槲皮苷、金丝桃苷、芦丁、紫丁香苷、刺五加苷E、异嗪皮啶6种活性成分含量的同时影响。结果表明,五年生刺五加根、茎中6种主要活性成分的综合得分最高。其中,黄酮类成分槲皮苷在三年生根中含量最高,在五年生茎中含量最高;芦丁在五年生根及茎中含量均最高,在根中三年生含量最低,九年生茎中含量最低;金丝桃苷在五年生根及三年生茎中含量最高。苯丙素类成分异嗪皮啶在三年生根及茎中含量最高,在五年生根和茎中含量最低;紫丁香苷在九年生根中含量最高,在五年茎中含量最高;刺五加E在五年生根中含量最高,在三年生茎中含量最高。不同药用成分在不同生长阶段的刺五加根和茎中积累不同,定向培育可根据目的活性成分选择适合的采收年限。     

HPLC法分析刺五加茎中原儿茶酸及苯丙素类成分动态累积规律研究

本研究采用高效液相色谱建立了一种简便、灵敏可同时测定刺五加茎中原儿茶酸、L-苯丙氨酸、刺五加苷B、绿原酸、咖啡酸、刺五加苷E和异嗪皮啶含量的方法。采用Welchrom C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,流速为1 mL·min~(-1),检测波长为210 nm,柱温为30℃。在55 min内,刺五加茎中7种成分完全分离,样品含量与其对应峰面积Y呈现良好的线性关系(r=0.999 3~0.999 9);平均加样回收率为99.2%~100.7%,RSD为0.72%~1.14%。应用该方法,我们对采收于不同日期的刺五加茎中的七种成分进行了测定,测定结果表明,7种功效成分含量的综合评价指标在11月份较高。本研究建立的多成分HPLC测定方法简便、灵敏、稳定,适合用于刺五加多成分的定量分析和刺五加药材质量控制。     

刺五加、短梗五加的开花动态及繁育系统的比较研究

野外定位观测刺五加（Eleutherococcus senticosus),短梗五回（E.sessiliflorus)的开花进程,花朵的功能形态特征和开花动态,用杂交指数（OCI）,花粉－胚珠比（P／O）,去雄,套袋,人工授粉等方法分别测定刺五加,短梗五加的繁育系统,结果显示,刺五加种群,短梗五加种群的花期均持续1个月左右,刺五加比短梗五加早开花20d 左右,二均有雄蕊先熟现象,刺五加是单全异株植物,种群内既具有雄性,又具有雌株,还具有两性株,繁育系统主要为异交,需要传粉活动才能完成授粉过程,与刺五加不同,短梗五加仅具两性花,但繁育系统也以异交为主,短梗五加两性花中的雌,雄器官既在空间上分离,又在时间上分离,只能进行同株异花间或异株,异花间传粉才能受精结实。     

刺五加叶中金丝桃苷含量的测定

用高效液相色谱法测定了刺五加(Acanthopanax senticosus (Rupr.& Maxin) Harms)叶中金丝桃苷(hyperin)的含量。色谱柱为C18柱,流动相为甲醇和0.025 mol.L-1磷酸,比例为V甲醇:V0.025 mol.L-1磷酸=55:45 (混合后用三乙胺调pH3.0～3.2),检测波长360 nm。样品用甲醇超声提取。结果表明, 金丝桃苷峰形良好,与其他组分的色谱峰达到基线分离。加样回收率为104%,相对标准偏差RSD为5.38%。本研究为刺五加叶中金丝桃苷含量的测定建立了一种可靠的方法。     

高效液相色谱法测定罗汉果根中两个降三萜配糖体

建立了高效液相色谱测定罗汉果根中两个结构新颖的降三萜糖苷,罗汉果酸苷乙Ⅱ(Siraitic acidⅡB)和罗汉果酸苷甲Ⅱ(Siraitic acidⅡA)含量的方法。色谱条件:色谱柱:ZORBAX SB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-水(梯度洗脱:0→4min:35%乙腈;4→16min:35%→45%乙腈);流速:0.5mL/min;检测波长:230nm;进样量:10μL。结果表明,罗汉果酸苷乙Ⅱ在0.05～0.3mg/mL,罗汉果酸苷甲Ⅱ在0.05～0.25mg/mL之间线性关系良好。该方法稳定,精密度、重现性好,且样品处理简单,提取与检测时间短。     

HPLC法测定牙膏中柚皮苷的含量

建立了高效液相色谱测定牙膏中柚皮苷含量的方法。采用的色谱条件:Hypersil BDS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温为40℃;以水(A相)和乙腈(B相),梯度洗脱程序为:0～15 min,10%～100%B;流速为1.0 mL/min;检测波长为283 nm;进样量为20μL。结果表明,柚皮苷的质量浓度在14.55～116.40μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加标回收率为97.56%。该方法稳定、准确,重现性好,可作为牙膏中柚皮苷的含量测定和质量控制方法。     

刺五加叶中金丝桃苷含量的测定

用高效液相色谱法测定了刺五加(Acanthopanax senticosus(Rupr.&Maxin)Harms)叶中金丝桃苷(hyperin)的含量。色谱柱为C18柱,流动相为甲醇和0.025mol L-1磷酸,比例为V甲醇:V0.025mol.L-1磷酸.=55:45(混合后用三乙胺调pH3.0￣3.2),检测波长360nm。样品用甲醇超声提取。结果表明,金丝桃苷峰形良好,与其他组分的色谱峰达到基线分离。加样回收率为104%,相对标准偏差RSD为5.38%。本研究为刺五加叶中金丝桃苷含量的测定建立了一种可靠的方法。     

三株提高刺五加苷E 含量内生真菌的鉴定及其作用方式分析

目的:确定自刺五加分离的内生真菌P109-4、P116-1b和P312-1的分类地位,并初步分析其提高刺五加苷E含量的作用方式。方法:应用形态学及18S rDNA序列分析方法进行鉴定,将菌液回接刺五加浸出液进行发酵培养和将灭活后的菌液注射刺五加后,HPLC法分析刺五加苷含量E的变化。结果:P109-4、P116-1b和P312-1分别与尖孢镰孢菌、葡萄座腔菌和角担菌的形态学特征相符,与各对应种属真菌的18S rDNA序列同源性分别高达99.28%、99.76%和97.23%。活体的3株内生真菌能延长刺五加浸出液中刺五加苷E的存在时间,灭活后P312-1可显著提高刺五加苷E的含量,P109-4和P116-1B无显著作用。结论:P109-4为Fusarium oxysporum,P116-1b为Botryosphaeria dothidea,P312-1为Ceratobasidium spp.。P312-1的作用方式为通过菌体某种不被高温破坏的物质提高刺五加苷E的含量,P116-1b和P109-4仅能对已存在的刺五加苷E发挥作用。     

UHPLC法同时测定金银花中6种有效成分的含量

本实验建立了UHPLC同时测定不同产地金银花中绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C含量的分析方法。采用Agilent 1290超高效液相色谱系统,Agilent ZORBAX RH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水,以0.2 m L/min的流速进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长350nm。结果表明在该色谱条件下,金银花的6种有效成分在8 min内可达到基线分离。方法的加样回收率为96.88%~99.16%,相对标准偏差为0.23%~1.06%。UHPLC法分析速度快,重复性好,结果准确,可用于金银花中绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C的含量测定。     

无梗五加根中苯丙素类化合物的研究

从无梗五加(Acanthoparax sessiliflorus( Rupr.et Maxim.)Seem.)根70％乙醇提取物的乙酸乙酯层中提取分离得到8个苯丙素类化合物.经理化和波谱分析鉴定为(+)-表芝麻脂素(1)、(-)-芝麻脂素(2)、赛菊芋黄素(3)、洒维宁(4)、咖啡酸甲酯(5)、对羟基桂皮酸(6)、(-)-丁香脂素(7)、(+)-松脂索(8).化合物8是首次从五加科植物中分离得到,化合物1和5是首次从五加属植物中分离得到,化合物3、6和7是首次从该植物中分离得到.     

无梗五加果化学成分的研究

从无梗五加(Acanthopanax sessiliflorus(Rupr.et Maxim.)Seem.)果70%乙醇提取物中分离鉴定了12个化合物.经波谱鉴定为东莨菪内酯(1),原儿茶酸甲酯(2),槲皮素(3),无梗五加苷B(4),金丝桃苷(5),(-)-pinoresinol-4,4'-di-O-β-D-glucopyranoside(6),chiisanoside(7),22a.hydroxyehiisanoside(8),niduloic acid(9),胡萝卜苷(10),东莨菪苷(11)和无梗五加苷D(12).其中化合物9为新天然产物,化合物1,2,6和11是首次从五加科植物中分离得到,化合物3是首次从五加属植物中分离得到.     

刺五加果肉化学成分的研究

应用多种色谱技术进行分离纯化,从刺五加果肉水提取物中分离得到10个化合物,经理化性质和波谱分析鉴定其结构分别为左旋芝麻脂素(1)、紫丁香树脂酚(2)、6,7-二甲氧基香豆素(3)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(4)、儿茶酚(5)、芦丁(6)、12-羟基硬脂酸(7)、豆甾醇(8)、β-谷甾醇(9)和蔗糖(10)。化合物3、4、5、7和8为首次从该植物中分得,其中化合物7为新的天然产物。     

Butanol Extract of Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms Alleviates Atherosclerosis in Apolipoprotein E-Deficient Mice Fed a High-Fat Diet

This study investigated the effect of butanol extract of AS (ASBUE) on atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient (ApoE^−/−) mice. The mice were administered ASBUE (390 or 130 mg/kg/day) or rosuvastatin (RSV) via oral gavage for eight weeks. In ApoE^−/− mice, ASBUE suppressed the abnormal body weight gain and improved serum and liver biochemical indicators. ASBUE remarkably reduced the aortic plaque area, improved liver pathological conditions, and lipid metabolism abnormalities, and altered the intestinal microbiota structure in ApoE^−/− mice. In the vascular tissue of ASBUE-treated mice, P-IKKβ, P-NFκB, and P-IκBα levels tended to decrease, while IκB-α increased in high fat-diet-fed atherosclerotic mice. These findings demonstrated the anti-atherosclerotic potential of ASBUE, which is mediated by the interaction between the gut microbiota and lipid metabolism and regulated via the Nuclear Factor-kappa B (NF-κB) pathway. This work paves the groundwork for subsequent studies to develop innovative drugs to treat atherosclerosis.     

HPLC-ELSD法在刺五加药材糖类成分分析中的应用

建立一种高效、快速的高效液相色谱—蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)分析刺五加药材中糖类成分—葡萄糖及蔗糖组分。采用CHROMATOREX NH2柱为固定相;以乙腈：水为84.5：15.5(V/V)为流动相,流速1.0 mL·min^-1;漂移管温度为100℃;氮气流速为2.5 L·min^-1。在上述色谱条件下,葡萄糖和蔗糖的线性范围分别为0.023 2～0.116 0 mg·mL^-1及0.099 6～0.496 5 mg·mL^-1;且该二种糖的检测限分别（信/噪=3）为3.87 ng和3.31 ng。本方法无须进行糖衍生化而直接用于刺五加药材中糖类成分的分离分析。     

刺五加内生真菌分离鉴定及抗菌活性研究

为开发利用刺五加内生真菌资源,寻找新型抗菌物质,从刺五加根茎叶中分离纯化得到内生真菌71株,经菌落形态和显微形态去重后进行ITS序列分子鉴定为18个种,来自于4目、8科、11属,其中链格孢属与镰孢霉属为优势属。根、茎、叶中内生真菌多样性指数分别为1. 112 31、1. 523 658、0. 264 1。18种刺五加内生真菌中,16种内生真菌至少对一种指示菌有抗菌活性。CWJ-5(镰孢霉属Fusarium oxysporum)对金黄色葡萄球菌抑菌效果显著,抑菌直径27. 17±0. 07 mm; CWJ-6(链格孢属Alternaria alternata)对大肠埃希菌抑菌效果显著,抑菌直径18. 07±0. 01 mm。结果表明刺五加内生真菌资源丰富,有很大的开发利用空间,部分菌种抑菌活性显著,值得进一步研究。     

Two new diphenyl ethers from Acanthopanax senticosus (Rupr. & Maxim.) Harms with PTP1B inhibitory activity

Bioassay-guided fractionation of an EtOAc-soluble extract of Acanthopanax senticosus (Rupr. & Maxim.) Harms yielded two new diphenyl ethers, 3-[3′-methoxy-4′-(4″-formyl-2″,6″-dimethoxy-phenoxy)-phenyl]-propenal (1) and 3-[3′,5′-dihydroxy-4′-(4″-hydroxymethyl-3″,5″-dimethoxy-phenoxy)-phenyl]-propenal (2), along with eight other known compounds (3–10). The structures of these new ethers were elucidated with spectroscopic and physico-chemical analyses. All of the isolates were evaluated for their in vitro inhibitory activity against PTP1B, VHR and PP1. The new compounds (1 and 2) inhibited PTP1B with IC₅₀ values ranging from 9.2 ± 1.4 to 12.6 ± 1.2 μM.     

落叶松和水杉针叶的聚戊烯醇

从落叶松（Ｌａｒｉｘｇｍｅｌｉｎｉ（Ｒｕｐｒ．）Ｒｕｐｒ．）和水杉（ＭｅｔａｓｅｑｕｏｉａｇｌｙｐｔｏｓｔｒｏｂｏｉｄｅｓＨｕｅｔＣｈｅｎｇ）针叶中首次分离出聚戊烯乙酸酯,其结构由１ＨＮＭＲ和１３ＣＮＭＲ鉴定为桦木聚戊烯醇型（ｂｅｔｕｌａｐｒｅｎｏｌ）,其异戊烯基结构单元数（ｎ）与ＨＰＬＣ的ｌｏｇｔｒ线性关系研究确定ｎ在１０～２４间     

金银忍冬花粉离体萌发初探

以金银忍冬[Loniceramaackü(Rupr.)Maxim.]为试材,研究了不同种类糖、硼酸、钙离子、pH值、光照等单因子对花粉萌发的影响.结果表明,培养基中分别含有25%的蔗糖、0.01%的硼离子、0.02%～0.05%的钙离子以及pH6.7时较适合金银忍冬的花粉萌发,萌发率分别为85.63%、59.23%、78.12%和75.27%;培养基中不同种类的糖对花粉萌发的影响不同,以乳糖最适宜,其次是葡萄糖、蔗糖和果糖;在光照(0.5625 μmol m-2s-1)与黑暗下培养,金银忍冬花粉的萌发率没有明显的变化,但黑暗条件更利于花粉管的生长.金银忍冬花粉在含有25%蔗糖、0.01%硼离子、0.02%钙离子、pH为6.7的培养基上光照培养3 d,其花粉萌发率均达到80%以上,最高的萌发率可达88.1%.     

金银忍冬雌雄配子体发育的解剖学研究

对金银忍冬(Lonicera maackii(Rupr.)Maxim)大、小孢子的发生和雌、雄配子体的发育过程进行了研究,结果表明:(1)4月上中旬,幼嫩的花粉囊壁由表皮、纤维层、中层和绒毡层共4层细胞组成,绒毡层类型为变形绒毡层。4月15日左右小孢子母细胞进行减数分裂形成四面体型四分体,四分体时期后,部分小孢子为空瘪状态。4月23-26日即将开花时形成三细胞型的成熟花粉。(2)子房三心皮,中轴胎座,胚珠倒生,单珠被,薄珠心。4月下旬开花前发育形成成熟胚囊,胚囊的发育为蓼型,合点端具有承珠盘。研究结果表明金银忍冬雌雄配子体的发育均属正常。