黑果绣球胚的离体培养

通过不同发育时期黑果绣球(Viburnum lantana)胚的离体培养,找到了胚培养发芽率最高的取材时期,在北京地区是8月下旬到9月上旬。使用的基本培养基是MS培养基。使茎段分化的培养基是MS BA0.5 2ip5.0 zt0.5(单位mg/l下同。),培养40天后能得到大量的苗。切取带4片叶以上的苗,转接在大量元素减半的1/2MS IBA0.2的生根培养基土,10天以后开始生根。15天后经锻炼的小植株可移栽到瓦制花盆或营养钵中,盆土基质为1:3(体积比)的沙与草炭上的混合土,置于全光苗床(自然光照下,自控间歇喷雾保持叶面湿度。),室温18—25℃,生长10天就可以移入冷室,按一般植物管理。成活率80%以上。     

鸡蛋参的组织培养和移栽(简报)

通过筛选最适鸡蛋参初代培养基和生根培养基,研究影响试管苗移栽的条件,建立了鸡蛋参无菌培养体系。结果表明,鸡蛋参的初代培养基为：1/2MS + 6-BA 0.5 mg/ L + IBA 0.2 mg/ L;生根培养基为：1 /2MS + IBA 0.5 mg/L + NAA 1 mg/L + 活性碳10 mg/L;移栽混合基质为：粗纤维草碳土90%+蛭石10%,成活率为85%。     

绒毛白蜡体胚诱导和植株再生

该文探讨了基本培养基、外植体、培养条件以及植物生长调节剂配比对绒毛白蜡(Fraxinus velutina)体胚诱导的影响。结果表明,胚根是诱导体胚发生的最佳外植体;体胚诱导的最适培养基为改良MS+2 mg·L~(–1) 6-BA+0.1 mg·L~(–1) NAA、30g·L~(–1)蔗糖、5.0 g·L~(–1)琼脂;暗培养20天后进行光照培养(14小时光照/10小时黑暗),光密度为100~(–1)20μmol·m~(–2)·s~(–1),昼温度(25±2)°C,夜温度(18±2)°C;成功诱导出体细胞胚并获得再生植株,体胚诱导率可达59.8%,体胚萌发率达81.2%。壮苗最适培养基为改良WPM+0.5 mg·L~(–1) 6-BA+0.2 mg·L~(–1) ZT+0.01 mg·L~(–1) NAA。生根最适培养基为改良1/2MS+1.0 mg·L~(–1)IBA+0.05 mg·L~(–1) NAA+20 g·L~(–1)蔗糖,生根率高达97.3%,试管苗移栽成活率达97.8%。     

乌桕不同外植体高效再生探索

以乌桕的成熟胚、胚乳、叶片和茎段为外植体,建立高效、稳定的组培快繁再生体系,并成功获得其再生苗.结果表明:(1)全胚乳带胚的愈伤组织诱导率达90%,其愈伤组织继续在MS+1.0 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA培养基上培养,不定芽最多达15个/外植体.(2)去胚乳的胚不加调节剂则胚直接萌动成苗,萌动率和成苗率可达100%;去胚乳的胚在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.3 mg·L-1 6-BA最佳培养基中培养,其胚轴处可直接诱导不定芽,最多达6个/外植体.(3)无菌苗叶片在MS+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA培养基中诱导的有效不定芽数最高达18个/外植体,诱导率达90%.(4)茎段在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.1~0.3 mg·L-1 6-BA培养基上不定芽的诱导率较高(100%),直接诱导的不定芽数最多达17个/外植体.(5)芽苗在1/2MS+0.5 mg·L-1 IBA上生根率达到100%,但根系较细弱,而在MS+1.0 mg·L-1镧稀土中的生根率达100%,且根系粗壮;生根的小苗练苗移栽后温室内成活率为89.2%,移栽到室外沙质土壤中的成活率为68.9%.     

哈蜜瓜幼胚体培养

植物名称:哈蜜瓜(Cucumis melo var Saccharinus Naudin) 材料类别:授粉后10天的幼胚——球形～心形胚期,带三分之一的种体培养。培养条件:诱导幼胚生长及产生愈伤组织的基本培养基为MS附加(单位为mg/1)①KT0.5,BA0.5,IAA1;②KT1,IAA?诱导愈伤组织再分化培养基为改良MS附加不同浓度的激素,其配方为:①改良MS(变有机物为B_5的成分及用量)附加 KT2,硫酸腺嘌呤3,赤霉素 5,②1/2 MS大量元素、微量元素、铁盐,附加BA10。诱导生根培养基为N_6大量、MS微量、铁盐(以上元素都减半),B_5的碘和钼、有机物,MS的肌醇,硝酸铵297,附     

峨参原生质体的体细胞胚同步化发生及植株再生

用峨参茎节来源的胚性愈伤组织,在含1.5%纤维素酶Onozuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+0.5%蜗牛酶+5mmol/L CaCl_2+0.6mol/L甘露醇+0.3%葡聚糖硫酸钾,pH5.8的酶液中游离原生质体,培养在改良MS培养基中,内含激素1mg/L2,4-D+0.5mg/L玉米素,并附加0.3%琼脂糖。第10天分裂频率达40—50%。此后振荡培养1个月,细胞团移至含0.5mg/L 2,4-D及渗透压降低的MS培养基中大量繁殖,然后再移至无激素或含0.1mg/L玉米素的MS培养基中进行分化,得到大量的球形胚,并且同步化达90%,70%的球形胚在10—15天后同步发育为心形胚,以后继续发育为鱼雷胚及子叶胚,最后形成完整植株。并讨论了获得大量同步化发生的体细胞胚的原因。     

虎颜花的无菌播种和试管育苗

1植物名称虎颜花(TigridiopalmamagnificaC.Chen)。2材料类别种子。3培养条件种子萌发培养基:(1)MS;(2)1/2MS(大量元素用量减半);(3)1/4MS(大量元素用量为1/4);(4)1/8MS(大量元素用量为1/8);(5)1/4MS+NAA0.5mg·L-1(单位下同);(6)1/4MS+100mL·L-1椰子乳。丛生芽增殖培养基:(7)MS+6-BA10.0+NAA1.0;(8)MS+6-BA5.0+NAA0.5。壮苗培养基:(9)MS+6-BA2.0+NAA0.2;(10)MS+6-BA1.0+NAA0.1。生根培养基:(11)MS+NAA0.5;(12)MS+NAA0.5+0.1%活性炭;(13)MS+NAA0.5+0.2%活性炭。以上培养基均附加MS培养基的维生素和肌醇成分、20…     

石防风原生质体再生植株

石防风种子幼苗切段,在含有1mg/1 2,4-D 的 MS 固体培养基(大量元素减半)上,产生含有胚性细胞团的愈伤组织。经液体培养,获得含有高比例胚性细胞团的悬浮培养物。在含有1.5%纤维素酶、0.3%果胶酶、0.5%蜗牛酶、5mmol/lCaCl_2、1mmol/lKH_2PO_4、0.6mol/l 甘露酐、pH5.8的混合酶液中,在25℃条件下,经过5小时消化,获得了原生质体。在含有 1mg/12,4-D+0.5mg/l 玉米素的修改的 MS 培养基中,原生质体第4天出现了第一次分裂;约40天后,形成0.5—1mm 的细胞团。把它们转移到含有0.5mg/l 玉米素的液体 MS 培养基(大量元素减半)中,逐步发育成胚状体。在不含激素的 MS 固体培养基(大量元素减半)上,胚状体发育成完整植株。     

四倍体稗草的组织培养与快速繁殖

以筛选得到的四倍体稗草成熟胚作为外植体,进行了组织培养与快速繁殖技术的研究。结果表明:最佳外植体消毒方式为70%乙醇浸泡30 s+0.1%(w/v)的升汞消毒15 min。最佳诱导培养基为MS盐、DL维生素+2.5 mg/L 2,4-D+300 mg/L谷氨酰胺+500 mg/L脯氨酸+3%麦芽糖。将愈伤组织转入分化培养基(MS+50 mg/L肌醇+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+0.25 mg/L IAA+3%麦芽糖)上,培养20 d后超过70%的愈伤组织分化成苗。将3-5 cm长的分化苗转入1/2 MS生根培养基进行生根培养。炼苗后,移入营养土与珍珠岩(2∶1)的基质中,移栽成活率高达90%以上。该体系的建立为稗草抗除草剂基因的功能验证提供了前提条件。     

金花竹芋的离体培养与植株再生

1 植物名称金花竹芋(Calathea crocata Morr.et Joriss),别名金花冬叶、金苞肖竹芋. 2 材料类别新生侧苗的根状茎. 3 培养条件以MS为基本培养基.(1)芽诱导及继代增殖培养基:MS+6-BA 4.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.5;(2)壮苗培养基:MS+6-BA 2.0+NAA 0.2;(3)生根培养基:1/2MS+NAA 0.5.上述培养基均添加30 g·L-1蔗糖、6 g·L-1琼脂,pH 5.8.     

新疆天山雪莲体胚诱导与分化研究

以新疆天山雪莲的叶片为外植体,分别用不同配方培养基诱导愈伤组织,后进行体胚诱导和分化培养形成再生雪莲植株.结果表明,诱导愈伤组织的最适培养基为MS 2,4-D 0.5 mg/L BA 1.5 mg/L,诱导率可达到100%;愈伤组织转移至MS 2,4-D 0.5 mg/L BA 1.5 mg/L培养基进行继代培养,增殖后的愈伤组织转移到MS 2,4-D 0.2 mg/L的液体培养基后成功诱导出雪莲体胚,出胚率达40%;将体胚接至MS ABA 0.5 mg/L培养基后,结果分化生长出大量的再生雪莲幼苗.     

Somatic embryogenesis and plant regeneration from leaf callus of Ocimum basilicum L

A effective protocol for complete plant regeneration via somatic embryogenesis has been developed for Ocimum basilicum L. Callus was initiated from leaf explant of young plant on supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) 1.0 mg l(-1), 3% sucrose and 0.9% agar. The calli showed differentiation of globular structure embryos when transferred to MS medium containing 2,4-D 0.5 mg l(-1) and BAP 1.0 mg l(-1). The maximum globular structure embryos were further enlarged and produced somatic embryos in MS basal medium supplemented with BAP 1.0 mg l(-1)+NAA 1.0 mg l(-1) + KN 0.5 mg l(-1). Continued formation of globular embryo and germination of embryos occurred in this medium. Complete plantlets were transferred onto specially made plastic cup containing soilrite followed by their transfer to the garden soil. Survival rate of the plantlets under ex vitro condition was 80%.     

白Pian体细胞胚悬浮培养的动力学研究

白(ＰｉｃｅａｍｅｙｅｒｉＲｅｈｄ.ｅｔＷｉｌｓ.)是我国特有的云杉属树种,在林业生产和环境绿化中均具有重要地位。其体细胞胚胎发生的研究,一方面可用于优良种质的大规模快速繁殖,为植树造林和园林绿化提供优质苗木;另一方面可作为遗传转化的再生系统,进行树种遗传...     

鱼腥草体细胞胚胎发生和植株再生

目的:利用鱼腥草的叶片和叶柄为材料,进行体细胞胚胎诱导及植株再生研究。方法:运用正交设计试验,考察在改良的MS固体培养基上添加不同种类、不同浓度的植物生长物质组合及其配比对鱼腥草愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果:鱼腥草无菌苗叶片在含有2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L的改良MS培养基上能诱导出胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在含有6-BA 1.0 mg/L的改良的MS培养基上诱导体细胞胚的发生;叶柄在含有6-BA 1.0 mg/L改良MS培养基上直接产生体细胞胚。体细胞胚在改良的MS NAA0.1 mg/L 6-BA 1.0 mg/L的培养基上能够快速繁殖,形成大量不定芽,在不加任何激素的MS培养基上就可以萌发出不定根,发育为成完整植株,在MS IBA 1.0 mg/L的固体培养基上能够形成大量的根。结论:建立了鱼腥草体细胞胚胎发生及植株再生的体系。     

Survival of cultured cells and somatic embryos of Asparagus officinalis cryopreserved by vitrification

Cultured cells and somatic embryos derived from the mesophyll tissue of asparagus (Asparagus officinalis L.) were cryopreserved by vitrification. The vitrification solution (PVS) contains (w/v) 22% glycerol, 15% ethylene glycol, 15% propylene glycol and 7% DMSO in Murashige-Skoog medium enriched with 0.5M sorbitol. After initial cryoprotection with sorbitol supplemented MS medium containing 12% ethylene glycol, cells or embryos were exposed stepwise to 85% PVS at 0°C. They were loaded into 0.5 ml transparent straws, and were then plunged directly into liquid nitrogen. After rapid warming, PVS was removed and diluted stepwise. The highest survivals of vitrified cells and embryos were about 65 and 50%, respectively. Surviving embryos developed into plantlets.Abbreviations DMSO dimetyl sulfoxide - PVS vitrification solution - LN liquid nitrogen - DSC differential scanning calorimeter - MS Murashige-Skoog salt medium - NAA naphthalene acetic acid - BA 6-benzyladenine     

水母雪莲体细胞胚胎发生及其植株再生

水母雪莲（Saussurea medusa Maxim.)茎和叶片的切段接种于MS＋2mg/L NAA 0.5mmg/L 6-BA的培养基上,20d后产生黄褐色的愈伤组织,经过几个月的继代培养,愈伤组织仍保持旺盛的增殖能力,但部分由黄褐色逐渐变为红色,将红色愈伤组织转到MS＋0．1mg/L NAA＋0．2mg/L 6-BA 5mg/L GA3的培养基上,30d后可分化出大量的体细胞胚,体细胞胚成熟后转到1／2MS＋0．2mg/L IAA 0.5%活性炭的培养基上,30d后可长出2－4cm的根,带根的小苗经锻炼后移栽到土壤中,成活率达76％,细胞组织学观察表明,发育成熟的体细胞胚具有胚根,胚轴和胚芽的完整结构,具有独立的维管系统。     

人工合成冬性六倍体小麦的研究

以冬性四倍体硬粒小麦(Triticum durum,2n=28,AABB)为母本与粗山羊草(Aegilops tauschii,2n=14,DD)杂交,得到的单倍体幼胚(n=21,ABD)经组织培养拯救,获得的幼苗经染色体加倍而成为合成小麦(AABBDD)。从中鉴定、筛选出冬性的合成小麦。幼胚仅在1/2 MS培养基上培养,成苗率为75.81%;根据幼胚的发育状态,将发育较完善的幼胚直接接种在1/2 MS培养基上,将发育不良的幼胚先接种于1/2 MS+2 mg/L 2,4-D培养基上进一步养育幼胚,之后视幼胚发育状况再将其转入1/2 MS培养基中培养成苗,此方法的成苗率为92.44%,较前者的成苗率提高了16.63%。染色体加倍在冬季塑膜拱棚内用0.05%秋水仙素进行半根法处理,较容易获得健壮苗,并且分蘖多。     

药用植物红根草种质资源的离体保存

以红根草试管苗为材料,研究了不同培养基(MS、1/2MS、1/4MS)、蔗糖浓度和植物生长抑制剂(CCC、PP333、ABA、MH)在红根草试管苗保存中的作用。结果表明:培养基1/2MS对红根草保存最好,保存270d后存活率最高。培养基中不添加蔗糖较添加一定浓度蔗糖时植株的形态和色泽差,但保存时间更长,转继代后能正常恢复生长。添加生长抑制剂能减缓生长速度,延长保存时间,最佳浓度分别为:CCC1.2～1.6mg/L;PP3331.6mg/L;ABA0.5～4.0mg/L;MH0.5mg/L。其中,ABA0.5～4.0mg/L对植株的生长最好,CCC浓度为1.2mg/L和1.6mg/L时,保存时间长,360d时,存活率达90%。     

Micropropagation of sweet orange, Citrus sinensis Osbeck. for the development of nucellar seedlings

Protocol for micropropagation of elite plants of sweet orange (Citrus sinensis) through nucellar embryo culture has been standardized. Three to four nucellar embryos and a zygotic embryo could be excised from a single mature seed and successfully generated as healthy plants in basal MS medium. MS medium supplemented with NAA (1 mg/L) or 2, 4.D (1 mg/L) promoted callus development in both nucellar and zygotic embryos. GA3 (1 mg/L) enriched medium induced plantlets initiation but their growth was very poor. No significant differences were observed between initial growth patterns of nucellar and zygotic seedlings developing from the same ovule. Five to six shoots were obtained from collar region of both category of embryos in MS medium supplemented with BAP (1 mg/L) within 60 days of inoculation. The number of plantlets were almost doubled after their transfer in the same medium and culture for another 30 days. Higher doses of BAP resulted in initiation of callus directly from the embryos. The regenerated shoots (2-3 cm) could be rooted in MS medium supplemented with either only NAA (0.75 mg/L) or NAA (0.50 mg/L) and IBA (2.0 mg/L). A number of plantlets could be obtained from a nucellar embryo grown shoot within a limited time period.