低氧性肺动脉高压小鼠体内脂质水平的变化

目的：观察低氧性肺动脉高压小鼠体内脂质代谢的变化,探讨脂质代谢异常在低氧性肺动脉高压发生发展中的意义。方法：SPF级雄性C57BL/6小鼠20只,随机分为2组（n=10）：常氧组和低氧组。常压连续低氧3周（9%~11% O₂,23 h/d）复制慢性低氧性肺动脉高压模型,测定小鼠右心室压（RVSP）和右心室与左心室加室间隔重量比,Elisa法检测血浆中总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）的含量;real-time PCR法检测肝组织中3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGCR）、低密度脂蛋白受体（LDLR）、清道夫受体B1（SR-B1）、固醇调节元件结合因子2（SREBF2）等基因的表达。结果：低氧组小鼠RVSP、RV/（LV+S）显著高于常氧组（P<0.05）,血浆中HDL含量及HDL/LDL比值较常氧组显著降低（P<0.05）,肝组织中LDLR、SR-B1基因表达较常氧组显著下调（P<0.05）;RVSP与HDL/LDL比值及LDLR、SR-B1基因表达呈显著负相关（P<0.05）。结论：脂质代谢异常参与小鼠低氧性肺动脉高压的形成。     

不同剂量补铁对低氧训练大鼠力竭运动后骨骼肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的：探讨不同剂量补铁对低氧训练大鼠力竭运动后骨骼肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响。方法：将40只雄性Wistar大鼠随机分为5组（n=8）：安静对照组（C）、运动组（E）、运动低剂量补铁组（EL）、运动中剂量补铁组（EM）、运动高剂量补铁组（EH）。各组大鼠分别在低氧（模拟海拔3 500 m）环境中居住和训练5周,每周6 d。力竭运动后即刻取骨骼肌样本,测定线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ~Ⅳ（CⅠ~Ⅳ）活性。结果：与C组相比,E组、EL组、EM组骨骼肌线粒体呼吸链CⅠ~Ⅳ活性均显著提高（P<0.05,P<0.01）,EH组CⅠ活性显著降低（P<0.05）,CⅢ和CⅣ活性均显著提高（P<0.05,P<0.01）;与E组相比,EL组、EM组和EH组CⅠ~Ⅳ活性均显著降低（P<0.01）。结论：低氧训练及结合补铁均可改善低氧环境骨骼肌线粒体呼吸链功能,提高机体有氧工作能力,但低氧训练结合补铁的效果不及低氧训练。     

血管紧张素原基因多态性与低氧习服效果的关联研究

目的：研究血管紧张素原基因（AGT） G-217A和T174M两个位点的多态性与急性高原反应（AMS）的发生及其低氧习服效果的关系。方法：阶段1：61名北方汉族大学生,在低氧室急性低氧暴露6 h（模拟海拔4 800 m）,入室后先安静休息30 min,再仰卧蹬车20 min,蹬车负荷定量为60 r/min、80 W,用路易斯湖评分系统（LLS）评价AMS,并记录运动过程中HR、动态血压、SpO₂等生理指标的值;阶段2：进行3周模拟低氧训练,氧含量分别相当于海拔2 500 m、3 500 m、4 800 m,同时以中等强度负荷量运动,2 h/d、4 d/周。3周后,再以阶段1的试验条件测试相应指标;采用PCR-RFLP法检测受试者AGT基因G-217A和T174M位点的基因型和等位基因频率。结果：第1次低氧暴露,在AGT基因的G-217A位点上,GG与GA+AA基因型受试者的各项生理指标无显著性差异;第2次低氧暴露,GG基因型受试者的SpO₂明显低于GA+AA基因型（P<0.05）;T174M位点的不同基因型和等位基因携带者在2次暴露中其AMS发生率、VE、SpO₂、HR和血压等生理指标均无显著性差异。结论：G-217A位点可能是低氧习服的遗传学标记;T174M位点的多态性与AMS的发生及低氧习服未见明显关联。     

氢气对慢性间歇性低氧大鼠肝脏氧化应激损伤的改善作用

目的：研究氢气对慢性间歇性低氧大鼠肝脏损伤的改善作用。方法：24只雄性成年SD大鼠,随机分为3组（n=8）：常氧组（Norm）、慢性间歇性低氧组（CIH）、氢气+慢性间歇性低氧组（H₂+CIH）。Norm组暴露于空气中,CIH组与H₂+CIH组接受间歇性低氧处理5周,其中H₂+CIH组在间歇性低氧处理前给予1 h 67%浓度的氢气吸入。5周后比较各组大鼠血清氧化应激指标、炎症因子指标、肝酶水平、血脂水平,并在电镜下观察大鼠肝组织超微结构变化。结果：与Norm组相比,CIH组肝组织超微结构受损严重,谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平显著升高（P<0.05）;血清8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平显著升高;超氧化物歧化酶（SOD）活性显著降低;白介素-6（IL-6）水平显著升高。与CIH组相比,H₂+CIH组肝组织超微结构损伤减轻,ALT、AST水平显著降低（P<0.05）;8-OHdG与IL-6水平显著降低,SOD活性显著升高。与Norm组相比,CIH组IL-1水平升高;血清TC、TG、LDL水平升高,但无统计学差异。HDL在各组之间无统计学差异。结论：氢气可以减轻慢性间歇性低氧对大鼠肝脏的损伤,有效降低氧化应激水平,保护肝细胞受损。     

高脂饮食对慢性低氧大鼠肺组织eNOS/NO的影响

目的：本研究旨在探讨高脂饮食对慢性低氧SD大鼠肺组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/一氧化氮（NO）的影响及其可能机制。方法：24只雄性SD大鼠随机分为3组,常氧组（N组,南京,海拔10 m）、低氧组（H组,低压氧舱,模拟海拔5 000 m）和低氧联合高脂饮食组（H＋HFD组,低压氧舱,模拟海拔5 000 m）,经普通饮食或高脂饮食5周后,留取外周血和肺组织标本,用全自动血细胞分析仪检测静脉血血红蛋白（Hb）浓度,WST-1法检测超氧化物歧化酶（SOD）活力、TBA比色法检测血浆丙二醛（MDA）含量,终点法和直接检测法检测血脂含量,荧光实时定量PCR检测肺组织eNOS mRNA水平,Western blot法检测肺组织eNOS蛋白水平,硝酸还原酶法检测肺组织NO代谢产物硝酸盐/亚硝酸盐（NOx）水平。结果：低氧组大鼠肺组织中eNOS mRNA及蛋白水平及NOx含量明显低于常氧组,而低氧联合高脂饮食组上述三项指标水平明显低于低氧组（P〈0.05）;低氧联合高脂饮食组血浆SOD活力低于低氧组,血浆MDA含量、总胆固醇（TCH）及低密度脂蛋白（LDL）水平明显高于低氧组（P〈0.05）。结论：慢性低氧降低大鼠肺组织eNOS/NO水平,高脂饮食进一步降低低氧大鼠肺组织eNOS/NO水平,减弱其对肺组织保护作用,机制可能与血脂异常及氧化—抗氧化状态失衡有关。     

低氧脑水肿大鼠脑组织VEGF和AQPs基因及蛋白表达的变化

目的：探讨低氧脑水肿时血管内皮细胞生长因子（VEGF）、水通道蛋白（AQP1和AQP4）基因和蛋白表达变化,为阐明急性低氧对脑组织的损伤及低氧脑水肿的发病机制提供实验依据。方法：Wistar大鼠随机分为4个组：常氧对照组（Control）、低氧暴露4 000 m组（4 000 m）、低氧暴露6 000 m组（6 000 m）和低氧暴露8 000 m组（8 000 m）,低氧组于低压舱中模拟相应海拔高度持续暴露8 h建立低氧脑水肿模型。用干-湿重法测定脑组织水含量,常规光镜观察脑组织形态学的改变;用RT-PCR法和免疫组化法检测低氧脑水肿时大鼠脑组织VEGF、AQP1和AQP4mRNA和蛋白表达的变化。结果：①干-湿重法测定表明,低氧（≥6 000 m）暴露后,大鼠脑组织水含量明显增加（P〈0.01）。②常规光镜检测结果表明,低氧暴露4 000 m时大鼠脑神经细胞、血管内皮细胞和星形胶质细胞足突轻度肿胀,组织中出现漏出液;低氧暴露6 000 m时脑血管内皮细胞和星形胶质细胞足突肿胀加重,血管与组织间隙扩大,组织中漏出液增多;低氧暴露8 000m时脑血管内皮细胞和星形胶质细胞足突重度肿胀,血管与组织间隙进一步扩大,组织中漏出液明显增多。③低氧脑水肿时,VEGF、AQP1、AQP4mRNA表达水平增高,AQP1在内皮细胞异常表达,内皮细胞VEGF和AQP1、星形胶质细胞足突AQP4蛋白质表达水平增高。结论：低氧脑水肿时,VEGF、AQP1和AQP4表达和分布的变化可能是引起血脑屏障损伤、导致低氧脑水肿的发病机制之一。     

内质网应激在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的作用

目的：观察低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠的肺血管重塑并探讨内质网应激（ERS）在肺动脉高压中的作用。方法：将40只SD大鼠随机分为四组：常氧对照组（N）、低氧高二氧化碳组（HH）、ERS通路抑制剂4-苯基丁酸（4-phenylbutyric acid）组（4-PBA）、ERS通路激动剂衣霉素（tunicamycin）组（TM）,n=10。测量各组大鼠的肺动脉平均压（mPAP）、颈动脉平均压以及右心室肥大指数,免疫荧光α-SMA标记法鉴定各组肺中小动脉平滑肌细胞,电镜观察肺组织及肺中小动脉形态学变化,原位末端标记法（TUNEL）检测各组肺动脉平滑肌细胞的凋亡指数,采用RT-PCR和Western blot分别检测各组大鼠葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、C/EBP同源蛋白（CHOP）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12（caspase-12）mRNA及蛋白质表达。结果：①与N组相比,HH组、4-PBA组、TM组mPAP、右心室游离壁重量/左心室加心室间隔重量[RV/（LV+S）]、肺动脉管壁面积/管总面积（WA/TA）比值增加（P<0.0 1）,肺动脉管腔面积/管总面积（LA/TA）比值减小（P<0.01）,细胞凋亡指数降低（P <0.05或P<0.01）。ERS相关蛋白质及mRNA的表达量升高,各差异均有统计学意义。②与HH组相比,4-PB A组mPAP和[RV/（LV+S）]、WA/TA值减小（P<0.01）,LA/TA值和细胞凋亡指数上升（P<0.05或P<0.01）,ERS相关蛋白质和mRNA的表达量均下调（P<0.05或P<0.01）;③与HH组相比,TM组mPAP、[RV/（LV+S）]、WA/TA值升高（P<0.05或P<0.01）;肺动脉中膜层增厚,LA/TA值和细胞凋亡指数降低（P<0.01）。ERS相关蛋白质及mRNA的表达量均升高,除GRP78蛋白质表达量无明显变化外,其余各差异均有统计学意义。结论：低氧高二氧化碳诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重塑可能与肺动脉平滑肌细胞增殖过度及凋亡过少有关;ERS相关因子（JNK、caspase-12和CHOP）参与低氧高二氧化碳性肺动脉高压的调控。     

ERK1/2通路在低氧上调大鼠PASMCs钙激活性氯离子通道表达的作用

目的：探讨钙激活性氯离子通道（CLCA2）在大鼠低氧性肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）中mRNA和蛋白表达的变化及其与ERK1/2信号通路的关系。方法：PASMCs随机分为：常氧组（N组）,低氧组（H组）,DMSO对照组（D组）,U0126干预组（U组）,Staurosporine aglycone干预组（SA组）,采用免疫印迹法检测CLCA2蛋白的表达;选用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术测定CLCA2 mRNA水平的表达。结果：PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表达量,H组较N组明显上调（P<0.01）;U组较D组明显上调（P<0.01）;SA组较D组mRNA的表达显著下调（P<0.01）,蛋白的表达轻微下调。结论：低氧可上调CLCA2中mRNA和蛋白在PASMCs的表达;ERK1/2通路激活剂-Staurosporine aglycone能下调CLCA2在PASMCs中mRNA和蛋白的表达量;ERK1/2通路抑制剂-U0126可上调CLCA2在PASMCs中mRNA和蛋白的表达量。     

低氧预适应对氧糖剥夺损伤SH-SY5Y细胞的保护作用

目的：观察低氧预适应（HPC）对氧糖剥夺（OGD）损伤人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的保护作用,并探讨其可能机制。方法：SH-SY5Y细胞随机分为4组：正常对照组：常规培养,不进行OGD处理;HPC处理组：将神经元放入低氧培养箱内（2% O₂）,30 min后立即取出,再恢复常氧培养,反复5次;OGD组：无糖培养基、低氧培养箱内（1% O₂）处理细胞10 h,然后复氧复糖培养24 h;HPC+OGD处理组：细胞HPC后,行OGD处理。通过形态学观察,MTT比色法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）漏出量判断细胞损伤的程度,原位末端标记（TUNEL）法检测凋亡水平,Western blot检测Caspase 3、低氧诱导因子1α（HIF-1α）的蛋白表达。结果：HPC可减轻OGD引起的SH-SY5Y细胞凋亡,降低LDH漏出量,明显增加OGD组SH-SY5Y细胞的活力（P<0.05）。Western blot显示HPC+OGD组Cas-pase 3蛋白的表达明显低于OGD组（P<0.05）;HIF-1α蛋白的表达明显高于OGD组（P<0.05）。结论：HPC对体外培养的SH-SY5Y细胞OGD损伤具有保护作用,其机制可能与上调HIF-1α蛋白有关。     

HIF-1α和eNOS基因多态性与个体低氧训练效果的关联性研究

目的：拟从基因多态性角度探索人类个体低氧训练效果差异性的分子生物学机制。方法：选取41名健康受试者在模拟海拔2500m高度进行4周“高住-高练-低训”（低氧暴露10h／d,3次70％VO2max低氧训练／周,共4周）,观察低氧诱导因子-1α基因（HIF-1α）C1772T多态性、内皮型一氧化氮合酶基因（eNOS）第4内含子27bp（4b／a）可变数目重复性多态性（VNTR）与低氧训练期间最大摄氧量（VO2max）、血红蛋白（Hb）、红细胞数（RBC）及血氧饱和度（SpaO2）等生理指标变化的关联性。结果：携带CT基因型和CT＋ba复合基因型的受试者,4周低氧训练后△VO2max显著增加（P〈0．05）,CT基因型受试者低氧训练前、后△RBC,△Hb无显著性差异,但较其它基因型相比,表现出升高趋势;CT基因型与ba基因型受试者在低氧定量负荷实验中,SpaO2表现出高于其它基因型的趋势,但无显著性差异。结论：HIF-1α基因C1772T多态性及eNOS基因4b／a多态性可能与低氧训练效果及低氧环境下适应能力的个体差异性有关,CT基因型及CF5ba复合基因在低氧适应能力上具有一定的优势。     

急性低氧和间断低氧习服对HepG2细胞内血管内皮细胞生长因子基因表达的影响

目的:观察急性低氧和间断低氧习服对人HepG2细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF)及转录因子低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的mRNA和蛋白含量的影响及其可能的生物学意义.方法:HepG2细胞随机分为常氧对照组,急性低氧组和间断低氧习服组.采用Northern blot和Western blot分别检测不同组别HepG2细胞内VEGF和HIF-1α mRNA表达和蛋白含量的变化.结果:急性低氧诱导HepG2细胞内VEGF和HIF-1α基因的转录,增加两种蛋白在细胞内的含量.间断低氧习服组的细胞内VEGF和HIF-1α的mRNA含量分别为常氧对照组细胞的(108.6±17.7)%和(116.74±19.8)%,与常氧对照组相比无显著差异(P＞0.05);而其蛋白表达的含量分别为对照组细胞的1.4和2.7倍,都明显低于急性低氧组细胞内两种蛋白的含量(P＜0.05).结论:HepG2细胞达到低氧习服状态后,抑制急性低氧对HepG2细胞内VEGF基因表达的促进作用,其中HIF-1α可能起着重要的调节作用.     

低氧对小鼠学习记忆力及脑中tau蛋白磷酸化的影响

目的：研究不同低氧暴露对小鼠学习记忆及脑中tau蛋白磷酸化的影响。方法：雄性昆明小鼠40只,随机分为4组（n=10）：对照组（control）、8h低氧暴露组（8h）、7d低氧暴露组（7d）和28d低氧暴露组（28d）。将低氧暴露模型组置于模拟高原海拔5500m的低压氧舱,每天低氧暴露8h,避暗和旷场实验检测其活动能力及学习记忆能力：免疫印迹技术检测小鼠海马和皮层中tau蛋白磷酸化水平。结果：随着低氧时间的增加,小鼠短期学习记忆力及活动能力下降程度增大,28d低氧暴露后其下降程度最大;海马中tau蛋白多个位点的磷酸化水平呈现升高趋势,28d时tau蛋白磷酸化程度最高（P〈0．05）;皮层中的磷酸化水平在低氧暴露7d时达到最高,低氧暴露28d时略有降低,但与control组相比仍有明显差异（P〈0．05）。结论：慢性间歇性低氧可导致小鼠学习记忆能力下降,其机制可能与tau蛋白过度磷酸化相关。     

Apelin对改善小鼠低氧性肺动脉高压的作用及与调节脂质代谢的关系

目的：探讨外源性apelin对小鼠慢性低氧性肺动脉高压的作用及其机制。方法：SPF级雄性apoE基因敲除（apoE-KO）小鼠30只,随机均分为3组（n=10）,即常氧组、低氧组和低氧+apelin组,apelin组小鼠每天于低氧前经腹腔注射apelin-13（10 nmol/（kg·d））,其他组腹腔注射相同体积的生理盐水。采用常压连续低氧方法（9%~11% O₂,23 h/d）复制慢性低氧性肺动脉高压模型。低氧3周后,采用右心导管法测定小鼠右心室压（RVSP）和右心室与左心室加室间隔重量比,Elisa法检测血浆中高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和总胆固醇（TC）的含量;real-time PCR法检测肝组织中三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）、清道夫受体B1（SR-B1）、低密度脂蛋白受体（LDLR）和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGCR）等基因的表达。Western blot法检测小鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白的表达。结果：①低氧组小鼠RVSP、RV/（LV+S）较常氧组分别高87%、85%（P均<0.05）,apelin组小鼠RVSP、RV/（LV+S）较低氧组分别低39%、33%（P均<0.05）。②apelin组小鼠血浆中HDL-C含量、HDL/LDL比值分别较hypoxia组高21%、20%（P均<0.05）,而血浆中TC、LDL-C含量两组间无显著差异（P均>0.05）。③apelin组小鼠肝组织中LDLR、SR-B1、ABCA1基因表达分别较低氧组上调241%、112%、69%（P均<0.05）,而HMGCR基因表达下调45%（P<0.05）。④apelin组小鼠肺组织中PPARγ蛋白表达较低氧组上调47%。结论：Apelin可降低小鼠低氧性肺动脉高压,其机制与调节脂质代谢有关。     

低氧大鼠脑线粒体体外转录活性的研究

目的：探讨低氧对大鼠脑线粒体DNA表达的影响及其与能量生成的关系。方法：雄性Wistar大鼠随机分为3组：急性低氧组（AH）、慢性低氧组（CH）和对照组,其中急、慢性低氧组动物分别连续暴露于模拟海拔4000m高原3d(AH)和40d（CH）。分离脑线粒体,分别测定线粒体体外转录活性、F0F1－ATP酶活性以及ATP对线粒体体外转录的影响。结果：急性低氧大鼠脑线粒体体外转录活性及F0F1－ATP酶活性显著降低,慢性低氧时有所回升,两者呈线性相关。ATP对大鼠脑线粒体体外转录活性呈双相效应。结论：低氧时脑线粒体转录活性改变可能参与低氧抑制线粒体能量代谢的机制,ATP可能通过反馈作用对线粒体转录进行微调。     

4周低氧训练对男子足球运动员有氧耐力与T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨4周低氧训练对男子足球运动员有氧耐力相关指标与免疫系统中T淋巴细胞亚群的影响。方法：选取某体育学院及其附属竞技学校20名男子足球运动员为受试者,平均分为训练组、低氧组、低氧训练组以及对照组。训练组进行每日60 min,每周5次,持续4周的功率自行车训练,运动强度为65%~75%最大摄氧量;低氧组进行持续4周每日60 min,每周5次处于低氧环境（氧浓度为14.7%）,不进行功率自行车训练;低氧训练组在低氧环境（氧浓度为14.7%）下进行与训练组相同条件的训练;对照组不做任何影响。结果：经4周训练后,低氧训练组红细胞计数、血红蛋白含量较对照组、训练组以及低氧组均存在显著性差异（P < 0.05）;低氧训练组VO₂max水平和3 000 m跑成绩较对照组、训练组以及低氧组均存在显著性差异（P < 0.05）;低氧训练组T淋巴细胞CD3⁺水平较对照组、低氧组均存在显著性差异（P < 0.05）。结论：相比于其他方式,每日60 min,每周5日,持续4周的65%~75%最大摄氧量强度低氧训练更有利于提高男子足球运动员的有氧耐力水平,并且可能有利于运动员机体免疫功能的提高。     

低氧反应基因调控的研究进展

需氧生物对低氧的应激与适应主要通过有关低氧反应基因（ｈｙｐｏｘｉａ ｒｅｓｐｏｎ－ｓｉｖｅ ｇｅｎｅｓ,ＨＲＧ）转录水平的调控来实现。低氧诱导因子－１（ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ－１,ＨＩＦ－１）及其它元件可能参与低的感受及低氧信号的传导、以及对低氧的急、慢相应。寻找利于机体低氧习服－适应的基因应是今后重视的研究方向。     

低氧调节大鼠前额叶皮层IGFs家族基因的表达

目的：探讨急性和慢性低氧对胰岛素样生长因子（IGFs）家族中IGF-I,IGF一Ⅱ,IGF-1R和IGFBPlmRNA表达变化的调节。方法：我们利用低压低氧舱模拟5km低氧环境,研究大鼠暴露于急性和慢性低氧后的前额叶皮层IGF家族基因的表达变化。结果：急性和慢性连续低氧暴露后,大鼠前额叶皮层中IGF-I,IGF-II,IGF-1R和IGFBPlmRNA对低氧应激表现出明显不同的变化模式。急性低氧时,IGF-I和IGFBPlmRNA表达显著升高。而在慢性连续低氧暴露5～15d后,IGF-I和IGFBPlmRNA表达量逐渐回复到对照水平。但IGF-1R的表达仍然保持较高水平。结论：急性低氧上调IGF基因表达可能参与皮层神经元的保护,而慢性低氧升高的IGF-1R基因表达可能参与慢性低氧损伤的适应过程。     

益气温阳活血化痰方对低氧高二氧化碳性肺动脉高压的作用及其机制

目的：探讨益气温阳活血化痰方（YWHHF）经BMP-7/Smads通路抑制内皮-间质转分化（EndoMT）,从而缓解低氧高二氧化碳性大鼠肺动脉压力的机制。方法：雄性健康清洁级SD大鼠50只,体重（180~220） g,随机分为5组（n=10）：常氧组（N）、低氧高二氧化碳组（HH）、YWHHF高剂量组（YH）、中剂量组（YM）、低剂量组（YL）。N组在常氧环境下饲养,其余四组在低氧高二氧化碳（9%~11% O₂、5%~6% CO₂）环境下饲养4周,8 h/日,每周6 d。YH、YM、YL组大鼠灌胃不同浓度的益气温阳活血化痰方（3 ml/kg）,浓度分别为0.6、0.3和0.15 g/kg,HH组灌胃等体积生理盐水。4周后检测大鼠肺动脉平均压,肺灌流后取右心室游离壁及左心室加心室间隔测定右心室肥大指数。电镜观察肺超微结构变化,免疫荧光观察肺动脉结构变化,RT-PCR检测α-SMA、CD31、BMP-7、Smad1/5/8的mRNA水平,Western blot检测α-SMA、CD31、BMP-7、p-Smad1/5/8和Smad1/5/8的蛋白质水平。结果：与N组比,其余四组平均肺动脉压、右心室肥大指数均增大,镜下观察见肺有明显损伤,α-SMA mRNA及蛋白质表达升高,CD31、BMP-7、Smad1/5/8的mRNA水平降低,CD31、BMP-7、p-Smad1/5/8的蛋白质水平亦降低（P< 0.05）;与HH组比,中药组以上变化均有所减轻（P<0.05）。结论：YWHHF通过抑制EndoMT从而缓解肺动脉高压,其机制可能与促进BMP-7/Smads通路的表达有关。     

人体肝癌细胞急性低氧及低氧习服差异表达基因分析

本文分析了人体肝癌细胞(HepG2)急性低氧处理以及低氧习服处理后基因表达谱的改变。急性低氧处理为细胞在1％氧气中培养48h,低氧习服处理为细胞在1％氧气中培养24h,常氧培养24h,以此作为一个周期,重复6个周期。联合应用抑制消减杂交技术和cDNA芯片技术,筛选HepG2细胞经急性低氧处理与正常培养细胞相比差异表达的基因,以及经低氧习服处理细胞与正常培养细胞相比差异表达的基因。结果显示,HepG2细胞经急性低氧处理与在常氧条件下培养相比,差异表达的基因有37个,表达水平全部表现为下调,其中包括参与细胞周期、细胞应激、细胞信号转导、细胞骨架形成、转录相关蛋白及细胞代谢相关蛋白的基因,1个未知基因序列、4个EST序列、5个线粒体蛋白基因,另外有功能不明的蛋白质基因12个。低氧习服处理的细胞与常氧条件下培养的细胞相比,差异表达的基因有6个,其中包括两个线粒体蛋白基因、金属蛋白酶1基因、转铁蛋白基因、Thymosin ．beta-4和TPT1基因。其中线粒体蛋白ND4、转铁蛋白、Thymosin.beta-4和TPT1基因的表达呈上调,线粒体NDl及金属蛋白酶1基因的表达水平呈下调。经低氧习服处理后,细胞低氧耐受力提高,低氧习服处理细胞基因的表达与急性低氧处理细胞和正常培养细胞的基因表达不同,这种变化可能与低氧习服细胞低氧耐受力的增强有关。     

低氧性肺动脉高压小鼠肺组织apoE蛋白表达的变化及其意义

目的：观察低氧性肺动脉高压小鼠肺组织中载脂蛋白E（apoE）蛋白表达的变化,以探讨低氧性肺动脉高压形成过程中apoE蛋白表达的变化及可能的意义。方法：SPF级雄性野生型（WT）C57BL/6小鼠和雄性apoE基因敲除（apoE-KO）小鼠各20只,各随机再分为2组（n=10）：常氧组和低氧组,共4组。常压连续低氧3周（9%~11% O₂,23 h/d）复制慢性低氧性肺动脉高压模型,采用右心导管法测定小鼠右心室压（RVSP）,计算右心室与左心室加室间隔重量比RV/（LV+S）,ELISA法检测血浆中高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和总胆固醇（TC）的含量;Western blot法检测肺组织中apoE和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白的表达。结果：①低氧组WT小鼠RVSP、RV/（LV+S）分别较常氧组高68%和59%（P均<0.05）,血浆中HDL含量及HDL/LDL比值分别较常氧组低17%和40%（P均<0.05）,同时肺、肝组织中apoE及肺组织中PPARγ的蛋白表达分别较常氧组下调48%、52%和37%（P均<0.05）,RVSP与apoE及PPARγ蛋白表达均呈显著负相关（P均<0.01）;②低氧组apoE-KO小鼠RVSP、RV/（LV+S）较常氧组分别高96%和86%（P均<0.05）,低氧组apoE-KO小鼠RVSP和RV/（LV+S）较低氧组WT小鼠分别高29%和24%（P均<0.05）。结论：小鼠低氧性肺动脉高压的形成与肺组织中apoE蛋白表达下调有关。