葛根素对正常产后小鼠泌乳作用的影响

摘要 目的：探究葛根素对产后正常小鼠泌乳作用的影响及其机制,并初步探究葛根素对产后正常小鼠的安全性。方法：将雌、雄KM小鼠以3:1比例合笼配种,得到孕鼠饲养至分娩。分娩后的小鼠随机分为正常对照组、葛根素低剂量（18 mg?kg^-1）、高剂量组（72 mg?kg^-1）,每组8只。从产后第3 d起,每天灌胃一次,共10 d。观察小鼠每日泌乳量变化,ELISA法检测血清中催乳素（PRL）、孕酮（P4）、雌二醇（E₂）含量,HE染色观察乳腺、肝、肾、子宫、卵巢组织病理学形态,Western Blot法检测乳腺组织中催乳素受体（PRLR）、酪氨酸激酶 2（JAK2）和信号传导与激活因子5a（STAT5a）的表达。结果：与正常对照组相比,从给药的第6天起,葛根素低剂量组的泌乳量显著升高（P＜0.05）;葛根素低、高剂量组均可见乳腺小叶内腺泡明显变大,分泌物明显增多,且低剂量组更为明显;葛根素低、高剂量组血清PRL水平明显升高（P＜0.01或P＜0.05）;葛根素低剂量组PRLR的蛋白表达明显增加（P＜0.01）,而葛根素高剂量组PRLR、JAK2的蛋白表达明显降低（P＜0.01）。葛根素低剂量组PRLR、JAK2、STAT5a的蛋白表达明显高于葛根素高剂量组（P＜0.01或P＜0.05）。结论：葛根素低剂量对产后正常小鼠有一定促进泌乳作用,高剂量时对泌乳作用不明显。葛根素低、高剂量均未对产后正常小鼠的肝、肾、卵巢和子宫产生明显的病理学改变。     

炙甘草汤通过抗氧化抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化

摘要 目的：探讨炙甘草汤对特发性肺纤维化（Idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）小鼠纤维化相关指标的影响,挖掘炙甘草汤治疗IPF的机制。方法：将60只SPF级ICR小鼠随机分为空白组、模型组、吡菲尼酮组和炙甘草汤组,除空白组外,其余组采用气管滴注博莱霉素（5 mg/kg)方法复制IPF小鼠模型,并给予相应的药物治疗。空白组和模型组小鼠灌胃生理盐水,吡菲尼酮组和炙甘草汤组小鼠分别灌胃吡菲尼酮(50 mg/kg)和炙甘草汤（25.4 g/kg）,各组均连续给药4周后取材,记录各组小鼠的死亡情况,计算各组肺系数;观察肺组织切片病理变化;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量;比色法检测肺组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性;免疫组化、荧光定量PCR检测α-SMA、COL1A蛋白和mRNA的表达水平。结果：炙甘草汤组小鼠死亡数减少,肺系数显著降低（P＜0.01）,炎性细胞浸润和胶原沉积面积大量减少,肺泡结构逐渐修复,HYP、MDA含量降低（P＜0.01）,SOD活性（P＜0.05）和GSH-Px活性（P＜0.01）显著增强;α-SMA、COL1A蛋白和mRNA表达均降低（P＜0.01）。结论：炙甘草汤通过抑制氧化应激反应,从而抑制成纤维细胞活化,减少细胞质基质沉积,从而减缓IPF疾病进程。     

杨梅素对高脂喂养小鼠代谢及自发活动节律的影响研究

摘要 目的：探讨杨梅素对高脂喂养小鼠代谢情况及自发活动节律的影响。方法：6周龄清洁级C57BL/6雄性小鼠15只,随机分为普通饲料组（CON）、高脂饲料组（HFD）、高脂饲料+杨梅素组100 mg /（kg?d）组（HFD+MYR）。从干预第10周开始使用Clocklab生物节律采集分析系统记录三组小鼠自发活动数据。干预第13周结束,检测三组小鼠体重、血脂数据。结果：与CON组相比,HFD组体重、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白均显著升高（P<0.001）,高密度脂蛋白显著降低（P<0.001）,活动峰值时相（Activity phase）显著后移（P<0.001）,自发活动量中值（Activity mesor）和总自发活动量（Total counts）明显增加（P<0.05）,HFD+MYR组体重和低密度脂蛋白无明显变化（P>0.05）,甘油三酯、总胆固醇均显著升高（P< 0.01）,高密度脂蛋白显著降低（P<0.01）,活动峰值时相显著后移（P<0.001）,自发活动量中值和总自发活动量无明显变化（P>0.05）。与HFD组相比,HFD+MYR组体重、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白明显降低（P<0.05）,高密度脂蛋白明显升高（P<0.05）,活动峰值时相明显前移（P<0.05）,自发活动量中值和总自发活动量明显减少（P<0.05）。结论：杨梅素可改善高脂喂养小鼠的代谢状态及减轻小鼠自发活动节律紊乱。     

糖皮质激素对小鼠急性肝衰竭的干预作用研究

摘要 目的：探讨糖皮质激素对小鼠急性肝衰竭（Acute liver failure, AHF）的干预作用。方法：通过腹腔注射D-GaIN/LPS构建AHF小鼠模型,并随机分为对照组、AHF模型组（AHF组）和糖皮质激素处理急性肝衰竭组（GCs + AHF组）。通过全自动生物化学分析仪检测小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL水平;采用ELISA试剂盒测定小鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-6水平;通过定量PCR检测mRNA表达水平;苏木精-伊红（H&E）染色检测肝组织病理学情况;免疫组织化学检测肝组织中SOX9表达水平;蛋白质印迹检测Hedgehog信号通路关键蛋白因子的表达水平。结果：与对照组相比,AHF组小鼠血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL、MDA、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高,SOD、GSH和CAT活性水平显著降低（P＜0.01）;与AHF组相比,GCs+AHF组小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL、MDA、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著降低,SOD、GSH和CAT活性水平显著升高（P＜0.01）。H&E染色结果显示,对照组小鼠的肝脏切片显示正常的细胞结构,AHF组小鼠出现广泛的细胞坏死和炎性细胞浸润;与AHF组相比,GCs + AHF组小鼠中细胞坏死和炎性细胞浸润等病理变化显著减弱。免疫组织化学结果显示：与对照组相比,AHF小鼠肝脏中SOX9的表达水平显著升高（P＜0.01）;与AHF组相比,GCs+AHF组小鼠肝脏中SOX9的表达水平显著降低（P＜0.01）。Western blotting结果显示,与对照组相比,AHF组小鼠的Hedgehog通路关键蛋白因子Shh、Ptch-1和Gli-1蛋白表达水平显著升高（P<0.01）;与AHF组相比,GCs+AHF组的Shh、Ptch-1和Gli-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。结论：GCs可有效改善AHF小鼠肝功能指标,降低炎性因子表达,提高急性肝衰竭小鼠抗氧化能力,并使Hedgehog通路关键蛋白因子表达恢复正常。     

血糖控制水平与2型糖尿病患者根尖周病的相关关系研究

摘要 目的：探讨血糖控制水平与2型糖尿病合并根尖周病的相关性。方法：回顾性选择2018年9月～2022年9月我院收治的300例2型糖尿病患者临床资料,根据是否发生根尖周病将患者分为根尖周病组（45例）和对照组（255例）,根据糖化血红蛋白（HbA1c）分为血糖控制不佳组（HbA1c≥6.5%,105例）,血糖控制良好组（HbA1c＜6.5%,195例）。多因素Logistic回归分析2型糖尿病合并根尖周病的相关因素,受试者工作特征曲线（ROC）分析HbA1c诊断2型糖尿病合并根尖周病的价值。结果：血糖控制不佳组根尖周病发病率（28.57% vs 7.69%）、PAI评分（2.66±0.41分 vs1.24±0.26分）均高于血糖控制良好组（P＜0.001）。根尖周病组吸烟史比例、牙周疾病比例、血糖控制不佳比例、FPG高于对照组（P＜0.001）,2型糖尿病病程长于对照组（P＜0.001）,服用二甲双胍比例低于对照组（P＜0.01）。多因素Logistic回归结果显示血糖控制不佳、吸烟史是2型糖尿病患者合并根尖周病的危险因素（P＜0.001,P＜0.01）,服用二甲双胍是保护因素（P＜0.001）。HbA1c诊断2型糖尿病患者合并根尖周病的曲线下面积为0.659（95%CI：0.650-0.756, P＜0.01）,灵敏度为73.33%,特异度为62.75%,约登指数为0.3608。结论：血糖控制不佳可能与2型糖尿病患者根尖周病的发生有关,临床应积极控制血糖水平以阻止根尖周病的发生。     

车前草提取物对缺氧性肺动脉高压大鼠模型氧化应激的影响

摘要 目的：研究车前草提取物（PW）的抗氧化性对缺氧性肺动脉高压(HPH)大鼠模型氧化应激的影响,分析并测定PW中发挥抗氧化的主要成分。方法：随机选取18只SD 雄性大鼠分为3组：CONT组、HPH组、HPH+PW组。CONT组和HPH组予生理盐水灌胃,HPH+PW组予车前草提取物灌胃,连续灌胃4周,测定大鼠肺动脉压力（mPAP）,肺功能相关指标（0.4 sFEV、FVC、 0.4sFEV/FVC、MMEF）后处死。试剂盒测定各组大鼠肺泡灌洗液中SOD、CAT、LDH、MDA含量。液相色谱-质谱分析鉴定PW中的有效成分并测定PW有效成分对超氧阴离子的清除能力。结果：HPH组与PW组相比,mPAP显著升高（**P＜0.01）,0.4 sFEV、FVC、0.4sFEV/FVC、MMEF显著降低（**P＜0.01）,HPH+PW可逆转上述趋势。HPH组与Cont组相比,SOD、CAT显著降低（**P＜0.01）,LDH、MDA显著升高（**P＜0.01）,HPH+PW可逆转上述趋势。液相色谱-质谱分析并鉴定出PW中含有车前子苷、高车前苷、β-谷甾醇、齐墩果酸、熊果酸、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷、葡萄糖8种有效成分,其中桃叶珊瑚苷的超氧阴离子清除能力最强。结论：PW可提高HPH大鼠抗氧化酶含量,减轻氧化应激反应并降低肺动脉压力,改善肺功能;PW有效成分中桃叶珊瑚苷（AU）的抗氧化能力最强。     

SS-31通过调控线粒体功能延缓细胞衰老的分子机制

摘要 目的：探讨SS-31通过调控线粒体功能延缓细胞衰老的调控效应。方法：将HEK293T细胞分为空白组、模型组、SS-31组。使用H₂O₂诱导应激性衰老模型,然后采用SS-31对HEK293T细胞进行干预。SA-β-gal衰老染色试剂盒检测细胞衰老水平;JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位水平;荧光倒置显微镜观察线粒体活性氧（ROS）荧光强度;ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平;蛋白质免疫印迹检测P53,P21,Acetyl-p53,Sirt1蛋白表达。结果：模型组SA-β-gal阳性率高于空白组,应用SS-31后阳性率显著降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;ROS荧光检测：与空白组比较,模型组荧光强度上升,而SS-31组荧光强度较模型组下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;线粒体膜电位检测：与空白组比较,模型组红色荧光强度显著下降,SS-31干预后,红色荧光强度显著上升,差异有统计学意义（P＜0.05）;ATP检测：模型组ATP水平低于对照组,SS-31组高于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）;此外,模型组P53,P21及Acetyl-p53蛋白表达水平较空白组增加（P＜0.05）,而SS-31组较模型组有所降低,差异有统计学意义（P＜0.05）,模型组Sirt1蛋白表达水平较空白组降低（P＜0.05）,而SS-31组较模型组升高,差异有统计学差异（P＜0.05）。结论：SS-31能够通过改善线粒体功能延缓HEK293T细胞衰老。     

阿魏酸钠对肺结核模型小鼠免疫功能及肺泡巨噬细胞吞噬功能的调控作用研究

摘要 目的：探讨与分析阿魏酸钠对肺结核模型小鼠免疫功能及肺泡巨噬细胞吞噬功能的调控作用。方法：肺结核模型小鼠(n=36)随机分为模型组、利福平组、阿魏酸钠组,每组各12只。利福平组、阿魏酸钠组分别给予100 mg/kg剂量的利福平与阿魏酸钠,模型组小鼠灌胃等量生理盐水,1次/d,给药6周,观察与记录所有小鼠的一般特征;分别于给药第2周、第4周、第6周,HE染色观察小鼠的病理特征;MDA检测试剂盒和总SOD活性检测试剂盒测定肺组织MDA水平与SOD活性;流式细胞仪检测小鼠T淋巴细胞亚群-CD3⁺T淋巴细胞、CD4⁺T淋巴细胞水平;酶联免疫法检测血清IL-6、IL-8含量;AnnexinV-FITC检测肺泡巨噬细胞凋亡率。结果：利福平组、阿魏酸钠组给药第2周、第4周、第6周的肺组织丙二醛（Malondialdehyde,MDA）水平低于模型组（P<0.05）,超氧化物岐化酶（superoxide dismutase,SOD）活性高于模型组（P<0.05）,利福平组与阿魏酸钠组对比也有明显差异（P<0.05）。利福平组、阿魏酸钠组给药第2周、第4周、第6周的血液CD3⁺T淋巴细胞、CD4⁺T淋巴细胞比例明显高于模型组（P<0.05）,阿魏酸钠组也高于利福平组（P<0.05）。利福平组、阿魏酸钠组给药第2周、第4周、第6周的血清IL-6、IL-8含量明显低于模型组（P<0.05）,阿魏酸钠组也低于利福平组（P<0.05）。利福平组、阿魏酸钠组给药第2周、第4周、第6周的肺泡灌洗液（broncho alveolar lavage fluid,BALF）巨噬细胞凋亡率明显低于模型组（P<0.05）,阿魏酸钠组也明显低于利福平组（P<0.05）。结论：阿魏酸钠在肺结核模型小鼠的应用可抑制炎症因子的表达,并改善氧化状况,还能增强小鼠的免疫功能,降低肺泡灌洗液巨噬细胞凋亡率。     

刺槐素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用与机制研究

摘要 目的：探讨刺槐素对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用以及可能的作用机制。方法：对24只Sprague-Dawley (SD)大鼠进行随机分组,分为：假手术组、模型组、刺槐素给药组、刺槐素+AG490给药组,每组6只,通过结扎冠状动脉左前降支,缺血30 min,再灌注120 min复制心肌缺血再灌注损伤模型。利用氯化三苯基四氮唑测定心肌梗死面积,紫外分光光度计和酶联免疫法检测血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）的活性,蛋白印迹法分别检测心肌组织中Bcl-2、Bax、Stat3和p-Stat3蛋白相对表达水平。结果：与假手术组比较,模型组大鼠血清中CK-MB、LDH活性明显升高（P＜0.01）,心肌梗死面积百分比显著增加（P＜0.01）,p-Stat3/Stat3比率、Bcl-2/Bax比率显著下降（P＜0.01）;与模型组相比,刺槐素给药组中CK-MB、LDH的活性,以及心肌梗死面积百分比显著降低（P＜0.01）,Bcl-2/Bax比率和p-Stat3/Stat3比率显著提高（P＜0.05）。然而在刺槐素+AG490药物组中刺槐素对于受损心肌的保护作用被AG490消除。结论：刺槐素可减轻MIRI大鼠心肌损伤,发挥心肌保护作用,其机制可能与活化Jak2/Stat3信号通路进而抑制心肌细胞凋亡有关。     

抗炎合剂对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及机制

摘要 目的：探讨抗炎合剂对脓毒症致心肌损伤的保护作用及可能机制。方法：将32只体重22～25 g的雄性C57小鼠随机分为4组：正常组、假手术组、模型组（脓毒症模型）、抗炎合剂组。采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture，CLP）建立脓毒症模型，模型组、抗炎合剂组在造模后分别用生理盐水、抗炎合剂（Anti-inflammation mixture，AIM）对大鼠进行干预。正常组：正常进食饮水；假手术组：假手术前每天给予生理盐水（1.4 mL/100 g），并腹腔注射生理盐水（5 mg/kg）每日1次，连续3日。第4日行假手术；模型组（CLP组）：CLP术前给予生理盐水（1.4 mL/100 g），每天1次，并腹腔注射生理盐水（5 mg/kg）每日1次，连续3日。第4日CLP；抗炎合剂组：CLP术前给予中药抗炎合剂（1.4 mL/100 g），每天1次，并腹腔注射生理盐水（5 mg/kg）每日1次，连续3日。第4日行CLP；各组分别于手术后24小时行标本采集，采用HE染色和TUNEL染色观察小鼠心肌组织损伤情况，同时检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）水平。结果：与正常对照组或假手术组相比，CLP模型组小鼠的心肌组织出现大量炎性细胞浸润，心肌细胞凋亡率显著升高（P<0.01）；而抗炎合剂组相较于CLP模型组心肌细胞凋亡率显著下降（P<0.01）。与正常对照组或假手术组相比，CLP模型小鼠血清TNF-α、IL-1β水平显著升高（P<0.001），而中药抗炎合剂组TNF-α、IL-1β水平相较于模型组显著降低（P<0.01）。此外，与正常对照组和假手术组相比，模型组SIRT1 mRNA水平和蛋白表达水平显著降低，抗炎合剂显著提高SIRT1的mRNA和蛋白表达水平。结论：抗炎合剂可能通过提高SIRT1的表达，抑制CLP脓毒症小鼠的炎症反应，进而减轻心肌损伤。     

PEMT2过表达抑制大鼠肝癌细胞PI3K, Akt的表达(英)

为探讨磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶2(PEMT2)过表达抑制大鼠肝癌细胞增殖的机制,构建了PEMT2高表达细胞克隆,并采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞仪技术,研究了PEMT2过表达对PI3K/Akt信号转导途径的影响.实验结果显示,PEMT2过表达可抑制细胞PI3K和Akt的表达,并诱导细胞凋亡.这一结果提示,PI3K/Akt信号转导途径下调可能是PEMT2抑制肝癌细胞增殖的部分机制.     

过表达鸡Gata2或Gata3基因抑制Pparγ基因的转录

脂肪细胞分化是脂肪组织发育的一个重要过程. 目前,鸡脂肪细胞分化的分子调控机制还不十分清楚. 哺乳动物的研究结果表明,转录因子GATA结合蛋白2(Gata2)和GATA结合蛋白3(Gata3)具有抑制脂肪细胞分化的功能,它们在白色脂肪组织和棕色脂肪组织中的表达模式不同. 鸡没有棕色脂肪组织,目前还没有关于Gata2 和Gata3作用于鸡脂肪细胞分化的研究报道. 本研究利用半定量RT PCR的方法分析了Gata2和Gata3基因在鸡腹部脂肪组织和前脂肪细胞中的表达规律,发现鸡腹部脂肪组织中高水平表达Gata2 基因,低水平表达Gata3基因|鸡前脂肪细胞中Gata2 基因的表达水平远高于Gata3基因的表达水平,油酸诱导分化后的鸡前脂肪细胞Gata2基因的表达水平明显下调.此外,鸡过氧化物酶体增殖体激活受体γ(Pparγ)启动子（－1985/－89）报告基因荧光素活性分析和半定量RT PCP发现,在DF1细胞中过表达Gata2 或Gata3抑制鸡PPARγ基因的转录. 本研究结果为进一步研究鸡脂肪细胞分化的分子调控机制和Gata2和Gata3基因的生物学功能提供了参考.     

润肠通便合剂对便秘模型小鼠结肠MUC2、AQP3的影响*

目的: 研究润肠通便合剂对便秘模型小鼠的治疗作用及对结肠黏蛋白(MUC2)、水通道蛋白(AQP3)表达的影响。方法: 将小鼠分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组及润肠通便合剂高、中、低剂量组(40、20、10 ml/kg)(n=10),通过复方地芬诺酯(30 mg/kg灌胃1次或20 mg/kg灌胃14 d)来复制便秘动物模型,观测润肠通便合剂给药3 d对便秘小鼠排便、小肠推进的影响,给药14 d对便秘小鼠结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平,观测润肠通便合剂给药3 d或14 d对便秘小鼠排便、小肠推进、结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平的影响。结果: 与空白对照组比较,模型对照组小鼠给予30 mg/kg复方地芬诺酯1次后,小肠推进长度及推进率显著降低,首便时间延长,6 h排便粒数减少;给予20 mg/kg复方地芬诺酯14 d后,小鼠结肠出现明显病理学变化,CLAF中Muc2的含量降低,近端结肠AQP3的基因表达水平升高,结肠湿干重比值降低(P＜0.01)。与模型对照组比较,给予润肠通便合剂能明显增加小肠推进长度及推进率,缩短首便时间,增加6 h排便粒数,改善便秘小鼠结肠病理学,提高CLAF中Muc2的含量,抑制近端结肠AQP3的基因表达,提高结肠湿干重比值(P＜0.05, 0.01)。结论: 润肠通便合剂可加速排便,改善结肠病理学,其中促进Muc2分泌、下调AQP3 mRMA表达而改善结肠水代谢是其通便的机制之一。     

Eps15同源结构域包含蛋白2通过调控Cyclin D1-CDK4-pRb信号轴影响食管鳞癌细胞的增殖

微丝结合蛋白是微丝细胞骨架的重要组成成分,它们通过促进微丝的聚合和解聚来影响微丝的动力学。大量研究已经表明,微丝和微丝结合蛋白参与细胞癌变的所有阶段。我们通过对食管癌蛋白质组数据挖掘结果显示,微丝结合蛋白Eps15同源结构域包含蛋白2(EHD2)在食管癌组织中低表达,且EHD2低表达的食管癌患者预后不良。以往的研究已经证明,EHD2参与调控糖代谢、自噬和肿瘤迁移。然而,EHD2在食管癌进展中的作用和机制仍不清楚。本研究旨在探究EHD2在食管鳞癌细胞中的影响及其作用机制。免疫荧光和细胞组分分离结果显示,EHD2 不仅定位于细胞膜和细胞质,还存在于细胞核中。使用克隆形成实验、EdU细胞增殖实验和细胞流式术检测EHD2对食管鳞癌细胞增殖能力的影响。结果显示,过表达EHD2 和EHD2-3×NLS(核定位信号)抑制食管鳞癌细胞增殖和细胞周期G₁/S转换;同时,双荧光素报告基因结果显示,过表达EHD2 和EHD2-3×NLS抑制Wnt 信号通路活性。而siRNA敲降则获得相反的结果。免疫共沉淀和Duolink-PLA实验证明,EHD2与Wnt信号通路关键分子β-连环蛋白(β-catenin)和T细胞因子3(T-cell factor 3,TCF3)相互作用。蛋白质印迹和荧光定量PCR结果证实,过表达EHD2 和EHD2-3×NLS抑制TCF3下游与增殖和细胞周期相关的靶基因的转录,以及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白激酶4(CDK4)和pRb的蛋白质表达。以上结果表明,核EHD2与β-catenin和TCF3 复合体相互作用,通过Cyclin D1-CDK4-pRb信号轴来调控食管鳞癌细胞的增殖和细胞周期进程。     

一株细菌儿茶酚型铁载体分泌的影响因素研究

采用两种新的高分辨率的薄层层析（TLC）方法对一株土壤细菌S1在3种不同培养基上产生的儿茶酚型铁载体进行了分析。结果表明：不同培养基对铁载体的产生影响较大,在3种不同的培养基上菌株S1产生不同的儿茶酚铁载体,其中仅在1种培养基上S1能够分泌2,3-二羟基苯甲酸（2,3-DHBA）。同时,还分析了Al^3＋对S1分泌的儿茶酚型铁载体总量的影响,结果表明：Al^3＋能显著刺激铁载体的分泌,并且能抵消一定浓度范围内的Fe^2＋对铁载体分泌的抑制作用,KMB培养液中产生的4种儿茶酚铁载体中有3种和Al^3＋有较强的螯合力．     

Prolonged Alzheimer-like tau hyperphosphorylation induced by simultaneous inhibition of phosphoinositol-3 kinase and protein kinase C in N2a cells

Co-injection of wortmannin (inhibitor of phosphatidylinositol-3 kinase, PI3K) and GF109203X(inhibitor of protein kinase C, PKC) into the rat brain was found to induce spatial memory deficiency and enhance tau hyperphosphorylation in the hippocampus of rat brain. To establish a cell model with durative Alzheimer-like tau hyperphosphorylation in this study, we treated N2a neuroblastoma cells with wortmannin and GF109203X separately and simultaneously, and measured the glycogen synthase kinase 3 (GSK-3)activity by y-32p-labeling and the level of tau phosphorylation by Western blotting. It was found that the application of wortmannin alone only transitorily increased the activity of GSK-3 (about 1 h) and the level of tau hyperphosphorylation at Ser^396/Ser^404 and Ser^199/Ser^202 sites (no longer than 3 h); however, a prolonged and intense activation of GSK-3 (over 12 h) and enhanced tau hyperphosphorylation (about 24 h) were observed when these two selective kinase inhibitors were applied together. We conclude that the simultaneous inhibition of PI3K and PKC can induce GSK-3 overactivation, and further strengthen and prolong the Alzheimerlike tau hyperphosphorylation in N2a cells, suggesting the establishment of a cell model with early pathological events of Alzheimer‘s disease.     

不同糖耐量人群血清BED锌指蛋白3 表达水平及其与代谢相关指标的关系

目的:探讨不同糖耐量人群血清BED锌指蛋白3(ZBED3)表达水平及其与代谢相关指标的关系。方法:选取2012年1月到2014年3月在我院就医的115例2型糖尿病(T2DM)患者、97例糖耐量异常(IGT)患者及糖耐量正常(NGT的109名健康体检或志愿者,测定其血清中ZBED3的水平,并分析其与相关的代谢指标的关系。结果:女性群体血清ZBED3水平显著高于男性群体(121.3±33.5 pg/m Lvs 113.9±32.9 pg/m L,P=0.02);超重组血清ZBED3水平显著高于非超重组(132.5±31.4 pg/m L vs 111.4±30.2pg/m L,P=0.00);T2DM组血清ZBED3水平显著高于IGT组和NGT组(143.5±31.2 pg/m L vs 123.7±26.4 pg/m L,97.1±20.3pg/m L,P=0.00)。血清ZBED3水平与体重指数、腰围/臀围比值、体脂百分比、舒张压、收缩压、甘油三酯、空腹胰岛素、空腹血糖及Homa-胰岛素抵抗指数呈正相关(P0.01),与高密度脂蛋白胆固醇成明显负相关(P0.01);且腰围/臀围比值、体脂百分比、舒张压、甘油三酯、糖化血红蛋白及Homa-胰岛素抵抗指数是影响血清ZBED3水平的独立相关因素。结论:T2DM、IGT患者及超重群体血清ZBED3水平明显上升,且与肥胖和T2DM的发生发展密切相关。     

Synthesis and secondary structure of oligo(alpha-isobutyl beta,L-aspartate)s

The oligo(beta-peptide)s, hexa(alpha-isobutyl beta,L-aspartate) (Hex-AIBLA) and octa(alpha-isobutyl beta,L-aspartate) (Oct-AIBLA), were synthesized in solution by using standard coupling methods. Powder x-ray diffraction showed that the octamer crystallized in the two helical crystal forms known to exist in the homologous poly(beta-peptide), whereas the hexamer seemed to adopt an extended conformation. Both CD and 1H-NMR spectra of Oct-AIBLA in MeOH revealed the presence of a regularly folded conformation in this solvent, presumably the 3(14) helix. The helix-to-coil transition of Oct-AIBLA was observed to take place upon heating in both MeOH and CHCl3, in the second case associated with a not-well-defined aggregation-disaggregation process. The spectroscopic evidence obtained on the presence of folded structures in Hex-AIBLA were much weaker than for the octamer.     

PLC-beta2 monitors the drug-induced release of differentiation blockade in tumoral myeloid precursors

The differentiation therapy in treatment of acute promyelocytic leukemia (APL), based on the administration of all-trans retinoic acid (ATRA), is currently flanked with the use of As2O3, a safe and effective agent for patients showing a resistance to ATRA treatment. A synergy between ATRA and As3O3 was also reported in inducing granulocytic differentiation of APL-derived cells. We have demonstrated that phospholipase C-beta2 (PLC-beta2), highly expressed in neutrophils and nearly absent in tumoral promyelocytes, largely increases during ATRA treatment of APL-derived cells and strongly correlates with the responsiveness of APL patients to ATRA-based differentiating therapies. Here we report that, in APL-derived cells, low doses of As3O3 induce a slight increase of PLC-beta2 together with a moderate maturation, and cooperate with ATRA to provoke a significant increase of PLC-beta2 expression. Remarkably, the amounts of PLC-beta2 draw a parallel with the differentiation levels reached by both ATRA-responsive and -resistant cells treated with ATRA/As2O3 combinations. PLC-beta2 is not necessary for the progression of tumoral promyelocytes along the granulocytic lineage and is unable to overcome the differentiation block or to potentiate the agonist-induced maturation. On the other hand, since its expression closely correlates with the differentiation level reached by APL-derived cells induced to maturate by drugs presently employed in APL therapies, PLC-beta2 represents indeed a specific marker to test the ability of differentiation agents to induce the release of the maturation blockade of tumoral myeloid precursors.     

Identification and distribution of thioredoxin-like 2 as the antigen for the monoclonal antibody MC3 specific to colorectal cancer

MC3 is a colorectal cancer (CRC)-specific mAb previously prepared in our laboratory that can detect CRC with high sensitivity and specificity. However, the target antigen for MC3 had not been identified due to technological limitations. In the present study, immunocytochemistry and immunohistochemistry revealed the expression patterns of MC3 antigen (MC3-Ag) in colon cancer cell lines and CRC tissues. Western blotting analysis showed that the MC3 antibody reproducibly recognized two approximately 30 kDa proteins in the total cell lysates of human colon carcinoma cell lines SW480 and HT-29. Using a proteomic approach, we identified two MC3 immunoreactive spots as two isoforms of thioredoxin-like 2 (Txl-2) protein. Further paired immunostaining showed that Txl-2 had the same expression profile as probed by the MC3 antibody. Western blotting also showed that both antibodies could detect the same two bands, further verifying that Txl-2 is the antigen of MC3 antibody. Additionally, tissue arrays revealed the expression patterns of Txl-2 in various normal and cancer tissues. Further analysis showed that Txl-2 mRNA was elevated in 18 cases of CRC tissues compared to paracancerous tissues and adjacent normal tissues.