双歧杆菌与辐射损伤的拮抗效应

目的探讨双歧杆菌拮抗辐射损伤的时效、量效和理想的拮抗分子。方法实验动物均选用SPF级C57BL小鼠,用不同药物和不同照射剂量处理后,建立急性放射损伤模型。WBC计数:用不同数量级浓度的双歧杆菌菌悬液对小鼠灌肠28 d后,5.0 Gy照射后3 d、6 d和10 d采取小鼠外周血检测WBC数。30 d小鼠生存率:用1×109CFU/m l双歧杆菌菌悬液灌肠28 d后,用一次性8.0 Gy60Coγ射线全身照射,建立急性放射损伤模型,每日上下午各观察小鼠1次,记录死亡动物数和死亡日期。抗氧化指标检测:用双歧杆菌菌体3种不同成分LTA、WPG和EPS,连续7 d腹腔注射小鼠后6.0 Gy照射,检测肝组织CAT和SOD的活性。结果WBC计数结果显示:双歧杆菌提高了辐射损伤WBC的最低值(P<0.05),随着剂量增加有上升趋势,理想的双歧杆菌菌悬液浓度为1×109CFU/m l。30 d小鼠生存率试验结果显示:双歧杆菌将小鼠生存率提高了43.3%。抗氧化结果显示:双歧杆菌菌体3种成分均具有抗氧化作用,尤其LTA抗氧化作用最为明显(P<0.05)。结论双歧杆菌对辐射损伤具有拮抗作用,其较为理想的双歧杆菌菌悬液浓度数量级为109CFU/m l,双歧杆菌细胞壁的3种成分中抗辐射较为理想的效应分子是LTA。     

三种乳杆菌对小鼠溃疡性结肠炎的缓解作用及机制CSCD

目的探讨3株乳杆菌(植物乳植杆菌、罗伊氏粘液乳杆菌和副干酪乳酪杆菌)对小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的缓解作用及机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)法构建C57BL/6J小鼠急性UC模型,并在造模前后均给予乳杆菌干预治疗;测量各组小鼠体质量、结肠长度;采用蛋白免疫印迹技术检测小鼠结肠上皮紧密连接蛋白表达水平;HE染色观察分析小鼠结肠组织病理变化;16S rDNA高通量测序分析小鼠肠道菌群组成情况;转录组测序分析小鼠结肠组织基因表达差异。结果与DSS模型组相比,植物乳植杆菌干预组(t=2.285,P=0.045)和副干酪乳酪杆菌干预组(t=2.360,P=0.040)小鼠体质量增加显著;植物乳植杆菌干预组(t=2.335,P=0.042)结肠长度显著增加;植物乳植杆菌干预组(ZO-1:t=4.975,P=0.003;Occludin:t=2.629,P=0.034)和罗伊氏粘液乳杆菌干预组(ZO-1:t=3.523,P=0.013;Occludin:t=2.525,P=0.040)紧密连接蛋白表达水平显著上调。乳杆菌干预组结肠黏膜组织病理损伤得以缓解,肠道菌群丰度及多样性降低得以改善。植物乳植杆菌干预组vs DSS模型组共有69个差异表达基因,KEGG pathway分析提示差异基因富集于免疫调节、内分泌与消化系统相关疾病等通路上。结论3株乳杆菌对UC小鼠展现出较好的缓解作用,其作用机制与修复肠道屏障、调节肠道微生物群结构和降低肠道炎症水平相关。     

阿莫西林干预对婴儿优势菌在无菌小鼠体内定植的影响

目的考察阿莫西林干预对婴儿优势菌双歧杆菌及乳杆菌在无菌小鼠体内定植的影响。方法 1日龄Balb/c无菌乳鼠接种婴儿粪便悬液。饲养至7~21日龄灌胃阿莫西林(100mg/kg),对照组在同日龄给予等体积的生理盐水。利用qRT-PCR检测小鼠粪便中双歧杆菌、乳杆菌的含量。结果阿莫西林处理可显著降低乳杆菌(P0.05)、双歧杆菌(P0.05)在无菌小鼠体内定植数量,但停药后饲养至成年(53日龄)二者定植数量与对照组小鼠比较差异无统计学意义(P0.05)。结论哺乳期阿莫西林干预会导致乳杆菌、双歧杆菌在小鼠体内定植量下降,但停药后小鼠饲养至成年二者可达到正常定植量,婴儿菌群定植小鼠模型可以模拟与现有动物模型一致的阿莫西林对双歧杆菌、乳杆菌定植的影响规律。     

双歧杆菌对免疫抑制小鼠白色念珠菌感染的保护作用

为探讨双歧杆菌对白色念珠菌感染的保护作用,作者采用环磷酰胺腹腔注射方法复制了免疫抑制小鼠模型,研究白色念珠菌感染前后两歧双歧杆菌灌饲的保护作用。结果表明：白色念珠菌感染前灌饲两歧双歧杆菌能有效地抑制白色念珠菌在小鼠肠道中的定植,并且保护肠粘膜的完整性。对其机理的研究认为,两歧双歧杆菌可能是通过调整肠道菌群平衡、增加肠道中生理菌群的数量、降低肠道ｐＨ值、以及产生抗菌物质等途径发挥保护作用     

发酵乳杆菌AR497改善DSS诱导的小鼠炎症性肠病

本实验主要探究发酵乳杆菌AR497对DSS诱导的小鼠炎症性肠病的影响。发酵乳杆菌AR497在低pH、高胆盐浓度、高渗透压等极端条件下仍具有良好的生长能力,对大部分抗生素敏感;在C57BL/6J小鼠中研究其对由葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎的缓解作用,发酵乳杆菌AR497处理后抑制小鼠体重减少,降低疾病活动指数,上调紧密连接蛋白基因Claudin 3,ZO-1和E-cadherin 1的表达。实验结果表明发酵乳杆菌AR497具有优良的生物学特性并可通过保护肠道屏障从而缓解DSS诱导的结肠炎。     

一株携带质粒的人两歧双歧杆菌的分离与鉴定

目的:分离携带天然质粒的人双歧杆菌.方法:用自制的改良型Blb双歧杆菌选择培养基,从人新鲜粪便分离双歧杆菌,对初步质粒检测阳性的单菌落通过糖发酵试验、(G C)mol%测定和16S rDNA序列分析,进行菌株鉴定.结果:筛选到一株携带天然质粒的人双歧杆菌,编号B200304,在1.0%琼脂糖凝胶上,测得质粒的相对分子质量约为22 kb.通过对该菌株的形态学观察和糖发酵试验等生理生化特征研究,证明该菌株为两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);HPLC法测得其(G C)mol%为55.6,16SrDNA序列分析进一步证实该菌株为两歧双歧杆菌.结论:分离得到一株携带天然质粒的人两歧双歧杆菌新菌株.     

试管内双歧杆菌、复方双歧杆菌制剂对肠道致病菌的拮抗作用

试管内,两歧双歧杆菌(6-1)株对福氏志贺氏痢疾杆菌和侵袭性大肠杆菌都具有一定的拮抗作用。复方双歧杆菌制剂对福氏志贺氏痢疾杆菌具有很强的拮抗作用,甚至能完全抑制其生长繁殖。提示,在抑制肠道致病菌方面,复方双歧杆菌制剂要比单一的双歧杆菌具备更强的效能和更多的优越性。     

双歧杆菌对小鼠肠道树突状细胞数量的影响

目的研究双歧杆菌对小鼠肠道树突状细胞(dendritic ce ll,DC)数量的影响。方法分别采用活双歧杆菌菌液(1×109CFU/m l)、灭活双歧杆菌菌液(1×109CFU/m l)、双歧杆菌耗尽培养上清(Spen t cu lturesupernatan t,SCS)、无菌生理盐水给BALB/c小鼠灌胃,均为0.5 m l/(只.d),连续7 d,取小肠空、回肠段,SP免疫组织化学法分析检测肠道DC数量。结果DC分布于整个空、回肠的黏膜固有层。细胞大小不一,外形不规则,胞核外形亦不规则,多数呈偏心位,且DC有不规则突起,与周围细胞有紧密的接触。计数发现,双歧杆菌灌胃后小鼠小肠黏膜固有层DC数量增加(P<0.05),以活菌作用最明显,死菌次之,培养上清作用最弱,经统计学处理差异有显著性(P<0.05)。结论外源性双歧杆菌能增加小鼠小肠黏膜固有层中DC的数量,活菌作用最明显。提示双歧杆菌通过胃肠道途径可能影响DC的分化、发育;对DC的作用可能就是双歧杆菌影响机体免疫功能的重要环节;且保持活菌状态对机体免疫有重要作用。     

短双歧杆菌和嗜酸性乳杆菌对小鼠抗肿瘤活性的激活作用

用活的短双歧杆菌,嗜酸性乳杆菌和BCG给昆明小鼠腹腔注射,在原位激活后,由肝脏分离的非实质性细胞(NPC)对YAC-1,P815和L929的细胞毒性作用,以及NPC和Kupffer(KC)培养上清中所显示出对三株瘤细胞的肿瘤坏死因子(TNF)活性都比对照组明显增强。其次,胸腺细胞和脾细胞对ConA刺激的增殖反应也明显增强。实验结果表明双歧杆菌和乳杆菌在小鼠体内诱发抗肿瘤活性的启动能力与BCG几乎相等。     

双歧杆菌脂磷壁酸抗体的制备及其在双歧制品中的检测应用

目的制备双歧杆菌脂磷壁酸抗体并用以检测双歧制品中脂磷壁酸和双歧杆菌活菌的含量。方法提取两歧双歧杆菌脂磷壁酸,加甲基化牛血清白蛋白与佐剂免疫预先已用卡介苗进行多克隆激活的BALB／C小鼠,间接ELISA法检测抗体效价与特异性,用免疫血清经双抗体夹心ELISA法和免疫结合微量培养的方法分别检测酸奶中脂磷壁酸和双歧杆菌活菌量。结果免疫血清最高效价可达1：1280,与所测其他人体双歧杆菌种属存在较强交叉反应,与非双歧杆菌种属无交叉反应。对于脂磷壁酸和双歧杆菌活菌的含量检测取得良好结果,检测线可达10^5 CFU／ml。结论以双歧杆菌脂磷壁酸制备免疫血清,效价高,属特异性好,可用于双歧食品中脂磷壁酸和双歧杆菌活菌的含量检测。