无核白葡萄胚挽救育种技术研究

无核白葡萄在授粉后20－50d,将胚珠接种在含不同激素的Nitsch培养基上,培养80－90d后转入胚荫发培养基中,待胚萌发20d左右,再转入成苗培养基中使其发育成正常幼苗。结果表明,胚萌发适宜的培养基是附加0．5mg/L IAA,1.5mg/L BA和0.5mg/LGA3的Nitsh培养基,在所试10个接种时期中,无授粉后39d胚的发育率最高。     

影响早熟油桃胚轴培养及再生因素的研究

以早熟油桃华光、曙光为试验材料,对影响其胚轴再生的外源乍长调节剂浓度及组合、培养基、胚发育时期、低温处理等因素进行了研究。结果表明,胚发育时期在盛花后74d(74DAFB)更适合于做为胚轴再生的外植体。幼胚经过75d的低温处理,能够提高胚的萌发率,而且幼苗生长状态良好。胚轴能够直接再生植株。上、下胚轴无显著差异。华光油桃胚轴再生以G TDZ3．0mg／L KT1．0mg／L NAA3．0mg／L效果最好;曙光油桃胚轴再生以QL TDZ2．0mg／L NAA0．5mg／L效果最好。     

梨的胚珠培养

植物名称:梨(Pyrus)。材料类别:胚珠。培养条件:(1)诱导幼胚生长培养基:改良的Nitsch培养基 0.5mg/L BA 100mg/L LH 5％蔗糖;(2)胚萌发成苗培养基:改良MS 2％蔗糖。培养室温度25±3℃;光照度3000lx;每日光照16h。生长与分化情况:胚珠在诱导幼胚生长培养基上培养30d后,其中的幼胚利用珠心、胚乳及培养基中的多种营养进一步维持胚性生长,得到生长的胚,其平均长度均大于8mm。将胚取出并转移到胚     

无核葡萄胚挽救影响因素的研究

分别以‘底莱特’和‘大粒红无核’自交、‘红宝石无核’ב新郁’和‘爱莫无核’ב黑奥林’胚珠为材料进行无核葡萄胚挽救影响因素的研究。结果显示:(1)‘底莱特’自交和‘红宝石无核’ב新郁’胚珠剥胚后萌发率分别为11.4%和10.0%,高于横切胚珠情况下的萌发率(5.5%、0.6%);(2)用Nitsch培养基培养的‘大粒红无核’自交和‘爱莫无核’ב黑奥林’胚珠的胚萌发率分别为9.5%和5.6%,胚状体诱导率分别为6.3%和3.9%,明显高于ER培养基的萌发率。结果表明:剥胚有利于无核葡萄胚的萌发;Nitsch比ER培养基更有利于胚萌发和胚状体诱导;同时,由于杂交亲本染色体倍性的差异导致胚萌发率不同,表现为:二倍体无核自交>二倍体无核×二倍体有核>二倍体无核×四倍体有核。     

非洲紫罗兰叶片体细胞胚培养及快繁技术研究

以非洲紫罗兰叶片为材料进行胚状体诱导及快繁技术研究.结果表明:.在MS NAA0.1mg/L BA0.1 mg/L 2,4-D1.0 mg/L的培养基上培养15d利于诱导胚性细胞分化,起始黑暗培养5～10d可提高胚性细胞分化率;在MS BA0.05～1mg/L的培养基上可诱导胚状体大量发生;在MS NAA0.1mg/L十BA0.1 mg/L的培养基上能够获得茎芽快速增殖;在1/2MS NAA0.01mg/L的培养基上可以生根.     

石蒜与萱草远缘杂交育种研究

目的：为培育石蒜属植物新品种（系）提供参考依据。方法：以石蒜属（Lycoris）、朱顶红属（Hippeastrum）、萱草属（Hemerocallis）植物为试材，采用花粉离体培养、田间杂交、胚拯救等方法，研究了石蒜属植物在远缘杂交过程中的生殖隔离。结果：1、在花粉活力测定中，所得最适宜朱顶红花粉萌发的培养基组成为：70 g/L蔗糖+5 mg/L硼酸+0.01 g/L氯化钙+50 g/LPEG-4000；萱草组花粉的最适培养基组成为：100 g/L蔗糖+0.3 mg/L硼酸+0.4 mg/L氯化钙。2、以石蒜属植物作母本，设计8个杂交组合试验，结果表明子房膨大率随杂交组合的不同而呈现差异性，其中与四倍体萱草杂交组合所得平均子房膨大率为59.81%，高于二倍体萱草组（33.12%）。3、胚拯救初期，各组合获得胚珠0～44个，其中鹿葱×萱草‘金娃娃’组合最多，中国石蒜×萱草‘金娃娃’组合最少。胚珠膨大率随杂交组合的不同出现差异，7个杂交组合的胚珠均发生膨大，膨大率在1.79%～96.15%之间。其中鹿葱×’Custard Candy’组合胚珠膨大率较高（96.15%），稻草石蒜×’Cust...     

中国南瓜（Cucurbita moschata）×印度南瓜（C.maxima）种间杂交幼胚培养和杂种真实性鉴定

细胞质遗传影响作物正反杂交F1性状。印度南瓜×中国南瓜不存在生殖隔离,而其反交:中国南瓜×印度南瓜存在杂交不亲和性障碍,制约了中国南瓜和印度南瓜正反远缘杂交细胞质遗传效应的研究和中国南瓜优良细胞质基因的转育进程。本研究选用抗病中国南瓜高代自交材料MO与核心印度南瓜亲本MA配置中×印南瓜杂交组合,以幼胚为试材,筛选外植体最佳接种时期、最佳灭菌接种方式,以及最适培养基成分,建立中印南瓜杂种幼胚培养体系,并对杂种后代进行分子标记真实性鉴定。通过试验,确定中印南瓜MO×MA亚种间杂交胚胎拯救的最佳接种时期为授粉后25 d。果实采收之后,先在室内剥出幼胚,用2%NaClO浸泡5 min,除去内种皮;再将幼胚转移至超净工作台内,先用75%酒精消毒幼胚30 s,无菌水清洗1次,再利用2%NaClO浸泡5 min,之后用无菌水清洗3次,准备接种。该外植体灭菌流程,幼胚接种后污染率低(39%)、萌发率高(24%)、接种操作方便。幼胚接种于No.8培养基:MS基础培养基+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+0.68%琼脂,胚萌发效果最好,萌发率为25%。暗培养在培养过程中作用不明显。选择在双亲中显示共显性差异的SSR标记,对再生植株进行杂种真实性鉴定,分别有23个差异引物和8个差异引物在6个E0单株中表现为杂合带型和父本MA带型,表明父本DNA已渗入杂种,6个E0单株为真杂种,为通过中国南瓜和印度南瓜远缘杂交转育中国南瓜细胞质基因奠定基础。     

白及种子萌发与快速繁殖技术的研究

将不同胚龄的白及种子接种到不同培养基中进行培养,对白及种子萌发率、萌发时间、丛生芽增殖、生根等方面进行了研究。结果表明:白及种子萌发率与其胚龄及有胚率成正相关,萌发时间则与胚龄及有胚率成负相关;胚龄16周的种子在1 g/L花宝1号 2 g/L花宝2号的培养基上萌发率可达84%;胚龄等于或大于20周的种子萌发率不受培养基成分的影响,均可达100%,萌发时间只需7 d;丛生芽增殖的最佳培养基为1/2 MS 4.0 mg/L6-BA 0.2 mg/L NAA 100 g/L CM,其增殖倍数达4.41倍;诱导生根较好的培养基为1/2 MS 0.2 mg/L NAA,生根率达90%。     

百合胚的组织培养和快速繁殖技术

本试验以百合幼胚作为外植体,进行离体胚培养,观察胚的萌发和生长情况,筛选出适合百合种胚萌发、继代、生根的培养基。结果表明,最适合百合离体胚萌发及生长的培养基为MS+BA0.1mg/L+NAA 0.01mg/L;最适合增殖的继代培养基为MS+NAA0.01mg/L+BA0.25mg/L;在培养基1/2MS+NAA0.05mg/L中,绝大部分的幼苗均可正常生根,对移栽后的成活株数进行了调查,移栽成活率可达到90%以上。     

兰属种间杂交胚拯救研究初报

取兰属大花蕙兰为母本、墨兰为父本进行种间杂交并进行杂种胚拯救研究。结果显示,子房离体培养明显优于胚珠离体培养,是胚抢救培养的有效手段。不同取材时间及在不同培养基中子房培养情况差异明显。在授粉后60 d子房离体培养即可获得成功,但以授粉后90 d子房离体培养最佳,萌发率高,达80%。子房培养的最适培养基为VW+BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蛋白胨3 g/L+水解酪蛋白500 mg/L+椰子汁10%。     

离体条件下暴马丁香切开种子的萌发

分别以三种催芽处理10、20、40 d的暴马丁香种子进行离体培养试验,对种子做三种切割处理,中间切、两端切和完整种子。结果表明:采用切开种子的方法进行离体培养可提高种子发芽率,中间切种子的萌发最好,且在培养10 d后发芽率即达到最高值;经过40 d催芽处理的种子优于未经催芽和只进行20 d催芽处理的种子;切开种子以MS培养基附加5 mg/L BA或5 mg/LBA+0.1 mg/L IBA为最适培养基。     

培养基组分及培养条件对蜡梅花粉萌发及花粉管生长的影响

采用液体培养法研究不同培养基组分和培养条件对蜡梅花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明:(1)PEG-4000是蜡梅花粉离体培养所必需的培养基成分,当培养基中无PEG-4000时,花粉不能正常萌发。(2)培养基内低浓度蔗糖对花粉萌发和花粉管的生长无显著影响,但随着蔗糖浓度的升高,则对花粉萌发和花粉管生长表现出强烈的抑制作用,且浓度越高,抑制效应越强。(3)培养基内其它组分分别在一定浓度范围(0～250g/L PEG-4000、0～50mg/L硼酸、0～30mg/L硝酸钙)内对花粉萌发及花粉管生长有促进作用,但超过上述高限值时则起抑制作用。(4)培养基内镁和钾的浓度对花粉萌发及花粉管生长影响不显著。研究表明,蜡梅最适花粉液体培养基组分为250g/L PEG-4000+50mg/L H3BO3+30mg/L Ca(NO3)2.4H2O,且在pH 5.5、温度15℃和600lx的光照培养条件下蜡梅花粉萌发和花粉管生长最佳。     

节节麦×普通小麦杂种的胚援救和胚愈伤组织再生植株

通过活体-离体胚培养和胚愈伤组织培养有效地克服了节节麦(Aegilops tauschii Cosson.)×小麦(Triticum aestivum L.)杂种幼胚的败育,产生了大量的杂种植株。采用活体-离体胚培技术,节节麦×小麦三个组合杂种幼胚的成苗率为55%,是前人所用传统胚培方法成功率的5—20倍。杂种幼胚在添加有2 mg/L 2,4-D的MS培养基上诱导为愈伤组织,经继代产生全能性愈伤组织,继而分化出再生植株。愈伤组织经继代保存150天仍不丧失分化能力。本文还对两种产生杂种的组织培养方法进行了比较研究。     

鹤顶兰种子萌发及原球茎增殖培养研究

以鹤顶兰成熟蒴果的种子为实验材料,研究影响种子非共生萌发的因素和种胚发育途径,并采用正交设计研究了原球茎增殖的影响因素。结果表明:冷藏影响种子的活力且其萌发率随冷藏时间延长而降低;0.5%NaClO溶液浸泡种子可提高萌发率,缩短初始萌发时间;种胚发育途径为种胚转绿后从种子侧面突破种皮而形成原球茎,随后分化出具根芽结构的完整植株;6-BA对原球茎增殖作用显著,原球茎增殖的最适培养基为1/2MS+3.0mg/L6-BA+1.0mg/L KT+1.0mg/L NAA,增殖倍数为6.67。     

海岛棉悬浮培养体细胞胚胎发生

取海岛棉无菌苗下胚轴作外植体,接种在含有激素２,４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ的改良ＭＳ培养基上。经近２个月的诱导培养,获得淡黄色或淡灰色、松软、湿润、颗粒状的愈伤组织。将此类愈伤组织接入液体培养基进行悬浮培养,３～４个月后产生体细胞胚,获得各个时期的体细胞胚胎。胚性细胞悬浮系经适当的继代培养可长期保持成胚性。     

海南龙血树离体快速繁殖

以3月龄高约25cm的海南龙血树为基本材料,以茎节纵切块为外植体,在改良MS 6-BA2.0mg/L NAA0.1mg/L培养基中培养1个月后萌芽率为78.6%。萌芽在MS 6-BA1.5mg/L NAA0.2mg/L培养基中连续两次继代培养,2个月后芽增殖倍数为2.9。丛芽及单芽都在MS 6-BA1.0mg/L NAA0.2mg/L培养基中进行培养,1个月后丛芽的单芽增殖倍数为4.6,单芽增殖倍数为0.8。萌芽放入MS(改良) NAA0.2mg/L培养基中进行培养,生根率为100%,移栽成活率为100%。     

桤叶唐棣组织培养研究

以桤叶唐棣的带芽茎段为外植体,对桤叶唐棣离体培养技术进行了初步研究,结果表明：初代培养基为MS IAA0．1mg／L 6-BA 0．5mg／L KT 0．5mg／L;增殖培养基为MS IAA 0．1mg／L 6-BA 2.0mg／L,增殖芽数最大,达到5．4;GA3对茎芽长无促进作用;在1／4MS无激素培养基上,生根率达87．9％。     

枇杷属野生植物种胚离体培养和植株再生研究

以枇杷属Eriobotrya植物11个野生种、1个远缘杂交后代材料为试材,采用胚为外植体,在不同植物生长调节剂配比培养条件下,进行胚离体培养和植株再生研究。结果表明,胚培养的最佳培养基配方为MS + 6-BA 1.0 mg·L-1 + KT 1.0 mg·L-1 + NAA 0.1 mg·L-1。在此培养基中,所有试验材料均获得成功,其中栎叶枇杷E. prinoides的萌发率和丛芽率均达100%,有效地建立了枇杷属野生种的胚离体培养及其植株再生体系。