微生物胞内产物分离的新方法—双水相萃取技术

本文简要地介绍了双水相萃取技术的概念,综述了双水相取技术的特点及其在内产物分离中的应用,讨论了影响细胞碎片的去除和双水相萃取效果的参数,以及成相材料的回收利用等问题,展示了双水相萃取技术的新发展。     

双水相萃取技术在白藜芦醇提纯工艺中的应用

论文研究了双水相萃取体系在提纯白藜芦醇工艺中的应用,用乙醇-硫酸胺-水双水相体系使虎杖提取液中的各物质按极性不同在油水两相中得到分离。双水相萃取时,白藜芦醇的含量远高于有机溶剂萃取,达34.29%。可见双水相技术可以完全代替有机溶剂萃取技术提纯白藜芦醇,产品纯度高,具有工艺简单,毒性小,成本低等优点。     

双水相萃取分离技术的评价和展望

双水相萃取分离技术的评价和展望谭天伟（北京化工大学化工系,北京１０００２９）沈忠耀（清华大学化工系,北京１０００８４）自１９５６年瑞典伦德大学的Ａｌｂｅｒｔｓｓｏｎ发现双水相体系［１］到１９７９年德国ＧＢＦ的Ｋｕｌａ等人将双水相萃取分离技术应用于生物...     

Separation of Flavonoids from Bamboo Leaves by Aqueous Two-Phase Extraction

以竹叶黄酮水提溶液为原料,采用PEG(聚乙二醇)/(NH4 )2SO4双水相体系对竹叶黄酮进行萃取,考察了PEG平均相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、pH值、NaCl质量分数、原液质量分数、萃取温度等对双水相及竹叶黄酮萃取效果的影响.双水相萃取法提取竹叶黄酮的最优条件为:PEG 400 31％,(NH4)2 SO4 11％,pH3.9,NaCl 0.7％,原液51.5％,萃取温度20℃,在此条件下得到的竹叶黄酮萃取率为97.8％.结果说明,双水相萃取法操作简单方便,成本低,不会引起生物质失活或变性,适合于黄酮类化合物的萃取分离.     

双水相萃取法分离竹叶黄酮的工艺研究

以竹叶黄酮水提溶液为原料,采用PEG(聚乙二醇)/(NH4)2SO4双水相体系对竹叶黄酮进行萃取,考察了PEG平均相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、pH值、NaCl质量分数、原液质量分数、萃取温度等对双水相及竹叶黄酮萃取效果的影响。双水相萃取法提取竹叶黄酮的最优条件为:PEG 400 31%,(NH4)2SO411%,pH 3.9,NaCl 0.7%,原液51.5%,萃取温度20℃,在此条件下得到的竹叶黄酮萃取率为97.8%。结果说明,双水相萃取法操作简单方便,成本低,不会引起生物质失活或变性,适合于黄酮类化合物的萃取分离。     

利用双水相萃取技术分离纯化尿激酶

通过研究双水相萃取系统的各种影响因素：乙醇／（NH4）2SO4的组成比例、pH值、无机盐的加入、粗酶的浓度等,探索以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系纯化尿激酶的最佳条件。建立以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系分离纯化尿激酶的新途径。结果表明：双水相萃取系统冰乙醇浓度为65％,（NH4）2SO4浓度为10．0％,pH8．0,酶加入量为30％,且不加入任何其他无机盐的条件下,尿激酶的纯化倍数可达到9．2倍,回收率最高达92％。     

乙醇-磷酸氢二钾双水相体系萃取L-精氨酸

采用乙醇-磷酸氢二钾(K2HPO4)双水相体系萃取L-精氨酸。实验考察了乙醇浓度、K2HPO4浓度、pH、萃取温度对萃取分离L-精氨酸的影响。结果表明,L-精氨酸在该双水相体系的分配系数K随体系乙醇浓度、K2HPO4浓度的增大、萃取温度的升高而增大,随着体系pH的增大而减小;L-精氨酸在该双水相体系的萃取率随体系乙醇浓度和pH的增大而减小,随着体系K2HPO4浓度增大、萃取温度的升高而增大。     

离子液体双水相体系及其在生物分离中的应用

作为一种高效而温和的新型绿色分离体系,离子液体双水相体系结合了离子液体和双水相体系的优点。因此倍受国内外研究者的青睐。介绍了双水相萃取技术的原理和离子液体双水相体系;综述了离子液体双水相体系在生物分离中的研究进展,主要包括抗生素、蛋白质、和食用色素等的萃取分离;并展望了离子液体双水相体系在生物分离中的应用前景。     

双水相技术在酶分离纯化中的运用

阐述了双水相技术在酶分离纯化中的应用 ,分析了影响双水相技术分离纯化酶的各种因素 ,并探讨了双水相技术在酶分离纯化应用中的发展方向     

双水相体系萃取人参根中人参皂苷的研究

建立稳定的聚乙二醇(PEG)与(NH4)2SO4双水相体系以分离人参根中人参皂苷。通过上下相体积比(R)、分配系数(K)和回收率(Y)分析双水相体系对人参皂苷的萃取效果,研究了PEG分子量、PEG/(NH4)2SO4质量分数、pH值和温度等因素对双水相成相及人参皂苷萃取的影响。结果表明:PEG分子量为3350、PEG3350的质量分数为12%、(NH4)2SO4质量分数为16%、溶液pH为7.0、温度为60℃时,双水相体系对人参皂苷有较高的萃取率,回收率可到达88.94%。     

双水相技术在抗生素分离中的应用

简单阐明了双水相技术在抗生素的分离中应用的发展状况,分析了影响双水相系统分离抗生素的各种因素,提出了导致双水相中抗生素非对称分配的主要作用力为疏不作用力,并对双水相技术在抗生素分离中应用的发展方向作了探讨。     

现代分离技术在抗生素提取中的应用*

详细介绍了膜分离技术在抗生素分离提取中的应用进展,并简单阐明了高效毛细管电泳技术、双水相技术和反胶束萃取技术在抗生素提取中的应用情况。对这些现代分离技术的发展前景作了简要探讨。     

1-辛基-3-甲基咪唑二氰铵盐/硫酸铵双水相体系分离纯化银杏黄酮

建立了由亲水性离子液体1-辛基-3-甲基咪唑二氰铵盐([C8mim][N(CN)2])和(NH4)2SO4形成的双水相萃取体系并应用于银杏黄酮的分离纯化研究。研究了盐浓度、体系温度、pH值、NaCl量等因素对银杏黄酮萃取效率的影响;并对下相中无机盐进行回收。体系由18.52%[C8mim][N(CN)2],25.93%(NH4)2SO4构成,加入1.5 mmol NaCl,在室温下进行萃取时萃取效率最佳,在最佳的条件下[C8mim][N(CN)2]/(NH4)2SO4体系对银杏黄酮的萃取效率达96.73%。与传统的双水相体系相比,该体系的萃取效率高,粘度低,同时(NH4)2SO4的回收率达90.54%。[C8mim][N(CN)2]/(NH4)2SO4双水相体系是一种很好的分离纯化银杏黄酮的方法。     

白地霉Cryytococcus neoformans脂肪酶的双水相萃取

本文研究了不同无机盐的双水相体系对白地霉脂肪酶的萃取分离效果,对PEG/（NH4）2SO4成相系统进行了系统的研究,通过考察体系PEG分子量、不同的无机盐、PEG浓度、（NH4）2SO4浓度、离子强度、pH值及（NH4）2SO4浓度对反萃取的影响,并通过正交实验进一步优化了实验条件,初步确定在PEG浓度15%,（NH4）2SO4浓度22.5%,pH8.0,不加NaCl的条件下进行双水相萃取,脂肪酶分离系数和纯化倍数分别为6.8和7.5,比活力达到40.3 U/mg蛋白。     

双水相萃取丽江山慈菇中的秋水仙碱

建立了由聚乙二醇(PEG6000)与(NH4)2SO4形成的双水相体系萃取丽江山慈菇中秋水仙碱的新方法。考察了PEG分子量、PEG的浓度、(NH4)2SO4的浓度和pH值对双水相成相及秋水仙碱萃取率的影响,并结合HPLC对萃取相进行检测。结果表明:PEG6000质量分数为8%,(NH4)2SO4质量分数为20%,pH为7.0时,双水相体系对丽江山慈菇粗提液中秋水仙碱萃取率达82.09%,富集倍数为6.84倍。此方法可用于丽江山慈菇中秋水仙碱的初步分离富集,且操作简单,绿色无污染。     

(乙醇+丙酮)/硫酸铵二元双水相萃取分离螺旋藻中β-胡萝卜素

采用(乙醇+丙酮)(v/v=1:2)/硫酸铵双水相体系分离螺旋藻β-胡萝卜素,确定其体系组成为15%(乙醇+丙酮)(v/v=1∶2)和24%硫酸铵。通过单因素和Box-Behnken实验探讨β-胡萝卜素粗提液、p H、萃取温度对萃取效果的影响。结果表明:β-胡萝卜素粗提液质量分数为6%、体系p H 8.0、萃取温度30℃时,萃取率可达94.55%。研究结果为β-胡萝卜素提取分离提供了新途径,双水相萃取技术在天然β-胡萝卜素提取中具有良好应用前景。     

姜老师信箱

蛋白质研讨班学员问:姜老师,您好!我想向您请教关于怎样利用双水相萃取重组蛋白的问题。我查了些资料,但对以下问题还不是很清楚:1.应该选取什么浓度范围的体系组合来从发酵的     

PEG／（NH4）2SO4双水相体系在加杨叶总黄酮萃取分离中的应用

目的：寻找加杨叶粗提液中的总黄酮的有效方法。方法：利用双水相体系萃取分离、紫外分光光度法直接测定。结果：萃取分离加杨叶总黄酮的最佳双水相体系是25％PEG400与12％（NH4）2SO4,最佳萃取条件为：pH=9,NaCl的添加量为3％,粗提液3mL,温度25℃。结论：该方法的相对标准偏差（RSD）≤0．28％（n=5）,具有良好的精密度和选择性,为黄酮类化合物萃取分离的一种有效方法。     

白地霉脂肪酶的双水相萃取和反胶团提取

对影响双水相萃取和反胶团提取脂肪酶的各种因素进行了探讨,并通过正交实验进一步优化提取条件,PEG浓度15%,(NH4)2SO4浓度22.5%,pH8.0的条件下进行双水相萃取,脂肪酶纯化倍数达到7.5倍;CTAB浓度150mmol/L,相体积比4/2,水相pH8.0,温度40℃的条件下进行反胶团提取,脂肪酶的比活力达到最大,但其比活力稍有下降,约为原来的0.9倍。     

双水相技术在抗生素分离中的应用

简单阐明了双水相技术在抗生素的分离中应用的发展状况,分析了影响双水相系统分离抗生素的各种因素,提出了导致双水相中抗生素非对称分配的主要作用力为疏水作用力,并对双水相技术在抗生素分离中应用的发展方向作了探讨。