川崎病患儿并发冠状动脉损伤的危险因素及风险预测指标模型的评价与构建

摘要 目的：分析川崎病（KD）患儿并发冠状动脉损伤（CALs）的危险因素,并评价风险预测指标构建的模型价值。方法：选取2019年1月～2022年5月我院收治的100例KD患儿,根据是否合并CALs分为CALs组33例和非CALs组67例。采用单因素和多因素Logistic回归分析KD患儿并发CALs的影响因素。以多因素Logistic回归所保留的变量构建KD患儿并发CALs的预测模型。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析构建的预测模型对KD患儿并发CALs的预测价值。结果：CALs组发热持续时间≥10 d、丙种球蛋白（IVIG）治疗延迟、IVIG无反应比例、中性粒细胞计数、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、N端脑利钠肽前体（NT-proBNP）、肌酸激酶MB（CK-MB）水平高于非CALs组（均P＜0.05）。多因素Logistic回归分析分析显示,发热持续时间≥10 d、IVIG治疗延迟、IVIG无反应、ESR、CRP、PCT、NT-proBNP、CK-MB为KD患儿并发CALs的危险因素（均P＜0.05）。以上述指标所构建KD患儿并发CALs的联合预测模型评估效能较高,其ROC-AUC（0.95CI）为0.891（0.813～0.950）。结论：发热持续时间、IVIG治疗延迟、IVIG无反应和ESR、CRP、PCT、NT-proBNP、CK-MB升高是KD患儿并发CALs的危险因素,根据风险预测指标构建的预测模型对KD患儿并发CALs的预测能效较好。     

淀粉样蛋白A、D-二聚体、肌酸激酶同工酶联合检测对川崎病患儿冠状动脉损伤的诊断价值分析

摘要 目的：探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、D-二聚体(D-D)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)联合检测对川崎病患儿冠状动脉损伤(CAL)的诊断价值。方法：选取2018年9月～2021年5月我院收治的80例川崎病患儿,根据是否合并CAL分为CAL组(n=34)和NCAL组(n=46)。收集患儿基础资料,并检测SAA、D-D、CK-MB水平。多因素Logistic回归分析川崎病患儿CAL影响因素,受试者工作特征（ROC）曲线分析血清SAA、D-D、CK-MB水平对川崎病患儿CAL的诊断价值。结果：与NCAL组比较,CAL组C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、SAA、D-D、CK-MB水平升高(P＜0.05)。多因素Logistic回归分析显示,CRP、ESR、SAA、D-D、CK-MB为川崎病患儿CAL独立影响因素(P＜0.05)。SAA、D-D、CK-MB、三项联合诊断川崎病患儿CAL的曲线下面积（AUC）分别为0.661、0.687、0.746、0.799,联合应用的诊断效能最高。结论：血清SAA、D-D、CK-MB是川崎病患儿CAL独立影响因素,且联合检测以上指标可辅助诊断川崎病患儿CAL。     

川崎病患儿血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc的表达及其联合检测对冠状动脉损害发生风险的预测效能研究

摘要 目的：探讨川崎病（KD）患儿血清N末端B型利钠肽（NT-proBNP）、淀粉样蛋白A（SAA）、C反应蛋白（CRP）、胱抑素C（Cysc）的表达及其联合检测对冠状动脉损害（CAL）发生风险的预测效能。方法：纳入我院2019年1月到2021年12月期间收治的98例KD患儿,根据超声心动图检查结果分为CAL组（n=31）和无CAL组（n=67）,对比两组血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc水平差异。收集患者资料,采用Logistic多因素分析CAL发生的影响因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc联合检测对CAL发生风险的预测效能。结果：CAL组患儿的血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc水平均高于无CAL组（P＜0.05）。单因素分析结果显示：KD患儿并发CAL与年龄、治疗前发热时间、是否为典型KD以及血小板计数（PLT）、白细胞计数（WBC）水平有关（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc、WBC水平较高、年龄＜3岁、治疗前发热时间＞6 d、非典型KD是KD患儿并发CAL的危险因素（P＜0.05）。血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc预测CAL发生的曲线下面积分别为0.761、0.759、0.753、0.746,四项联合检测预测CAL发生的曲线下面积为0.906,预测价值更高。结论：血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc、WBC、年龄、治疗前发热时间、非典型KD是KD患儿并发CAL的影响因素,联合检测血清NT-proBNP、SAA、CRP、Cysc对CAL发生风险具有较好的预测效能。     

重症病毒性脑炎患儿预后不良的危险因素及预测模型的构建与评价

摘要 目的：探讨重症病毒性脑炎（SVE）患儿预后不良的危险因素并构建和评价其预测模型。方法：选取2021年1月～2022年5月我院收治的120例SVE患儿，根据6个月后的儿童格拉斯哥预后评分量表（CGOS）评分将其分为预后不良组和预后良好组。收集SVE患儿临床资料，采用多因素Logistic回归分析SVE患儿预后不良的危险因素并构建其预测模型，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析SVE患儿预后不良预测模型的预测价值。结果：120例SVE患儿预后不良发生率为42.50%（51/120）。预后不良组病程和发热、惊厥持续时间长于预后良好组，惊厥、应激性高血糖、中重度脑电图异常比例高于预后良好组，脑脊液降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）水平高于预后良好组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示，病程、发热持续时间及惊厥持续时间延长、应激性高血糖、中重度脑电图异常和PCT、CRP升高为SVE患儿预后不良的独立危险因素（P＜0.05）。SVE患儿预后不良预测模型方程：y＝－16.463＋0.376×病程＋0.198×发热持续时间＋0.353×惊厥持续时间＋0.661×应激性高血糖＋1.305×中重度脑电图异常＋0.662×PCT＋0.071×CRP，该模型H-L检验P＞0.05。ROC曲线分析显示，该预测模型预测SVE患儿预后不良的曲线下面积为0.938，敏感度和特异度分别为82.35%、93.51%。结论：病程、发热持续时间、惊厥持续时间、应激性高血糖、脑电图异常、PCT、CRP为SVE患儿预后不良的影响因素，基于上述危险因素构建的预测模型对SVE患儿预后不良的预测价值较高。     

血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1与脓毒症患儿心肌损伤指标的相关性及与预后的关系

摘要 目的：探讨血清降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）、糖原磷酸化酶脑型（GPBB）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）水平与脓毒症患儿心肌损伤指标以及预后的关系。方法：选择2019年3月至2022年3月中国人民解放军联勤保障部队第九二六医院收治的271例脓毒症心肌损伤患儿（心肌损伤组）和同期收治的227例脓毒症感染性疾病但未发生心肌损伤患儿（对照组）。检测两组血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平以及心肌损伤指标水平。应用Pearson相关系数分析血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1与心肌损伤指标之间的相关性。根据心肌损伤组患儿28d的预后情况分为死亡组和存活组，脓毒症心肌损伤患儿死亡的危险因素通过多因素Logistic回归分析。结果：心肌损伤组血清PCT、肌红蛋白（Mb）、CRP、GPBB、心肌肌钙蛋白I（cTnI）、HMGB1、肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平均高于对照组（P＜0.05）。血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平均与血清Mb、CK-MB、cTnI水平呈正相关（P＜0.05）。死亡组脓毒症休克比例、APACHE Ⅱ评分、SOFA评分、尿素氮、血肌酐、血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平高于存活组（P＜0.05）。前白蛋白低于存活组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，高APACHE Ⅱ评分、存在脓毒症休克、高PCT、高CRP、高GPBB、高HMGB1、高cTnI是脓毒症患儿预后的危险因素（P＜0.05）。结论：脓毒症心肌损伤患儿血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平增高，且与预后不良以及心肌损伤指标有关。     

脓毒症患儿血清SAA、PCT、CRP水平与预后的关系及其诊断价值分析

摘要 目的：探讨脓毒症患儿血清淀粉样蛋白A（SAA）、降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）与预后的关系,并分析三者对脓毒症的诊断价值。方法：纳入我院于2016年8月～2020年6月期间收治的脓毒症患儿60例开展回顾性研究,作为脓毒症组,选取同期于我院进行体检的健康儿童40例作为对照组,比较两组血清SAA、PCT、CRP水平。根据脓毒症患儿1个月内的生存、死亡情况,分成生存组（n=42）、死亡组（n=18）,比较两组临床资料及血清SAA、PCT、CRP水平,经COX回归模型分析脓毒症患儿死亡的危险因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析血清SAA、PCT、CRP对脓毒症的诊断价值。结果：脓毒症组血清SAA、PCT、CRP水平显著高于对照组（P＜0.05）。死亡组器官障碍数量＞2个、脓毒性休克患儿占比分别为55.56%、44.44%,显著高于生存组的19.05%、9.52%（P＜0.05）;死亡组入院后1 h内使用抗菌治疗患儿占比为38.89%,显著低于生存组的69.05%（P＜0.05）;死亡组血清SAA、PCT、CRP水平高于生存组（P＜0.05）。COX多因素分析结果显示,器官障碍数量＞2、脓毒性休克及血清SAA、PCT、CRP水平升高是脓毒症患儿死亡的危险因素（P＜0.05）,而入院后1 h内使用抗菌治疗是脓毒症患儿死亡风险的保护性因素（P＜0.05）。血清SAA、PCT、CRP单独及三者联合诊断脓毒症的曲线下面积（AUC）分别为0.808、0.780、0.761、0.912。结论：脓毒症患儿血清SAA、PCT、CRP明显升高,三者升高均为脓毒症患儿死亡的危险因素,且对脓毒症具有一定诊断价值。     

不同病情手足口病患儿血清肿瘤坏死因子-α、C-反应蛋白、降钙素原的变化及其对预后不良的预测价值研究

摘要 目的：探讨不同病情手足口病（HFMD）患儿血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C-反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）的变化,并分析三者联合检测对预后不良的预测价值。方法：选取2019年1月～2022年1月我院儿科收治的117例HFMD患儿（HFMD组）,根据不同病情分为普通组32例、重症组45例、危重症组40例,根据治疗后预后情况分为预后不良组32例和预后良好组85例,另选取同期50例体检健康儿童作为对照组。收集HFMD患儿基本资料,检测所有研究对象血清TNF-α、CRP、PCT水平。采用多因素Logistic回归分析HFMD患儿预后不良的影响因素,受试者工作特征（ROC）曲线分析血清TNF-α、CRP、PCT水平对HFMD患儿预后不良的预测价值。结果：HFMD组血清TNF-α、CRP、PCT水平高于对照组（P均＜0.05）。普通组、重症组、危重症组血清TNF-α、CRP、PCT水平依次升高（P均＜0.05）。单因素分析结果显示：预后不良组发热≥39℃、发热持续时间≥3 d比例和病情分级为危重症、中性粒细胞比例、TNF-α、CRP、PCT水平高于预后良好组,淋巴细胞比例、心输出量、氧合指数低于预后良好组（P均＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,发热持续时间≥3 d、病情分级为危重症和TNF-α、CRP、PCT升高为HFMD患儿预后不良的独立危险因素,心输出量和氧合指数增加为独立保护因素（P均＜0.05）。ROC曲线分析显示,血清TNF-α、CRP、PCT单独与联合预测HFMD患儿预后不良的曲线下面积分别为0.769、0.793、0.799、0.947,血清TNF-α、CRP、PCT联合预测的曲线下面积大于各指标单独预测。结论：血清TNF-α、CRP、PCT水平升高与HFMD患儿病情加重和预后不良有关,联合检测血清TNF-α、CRP、PCT水平对HFMD患儿预后不良的预测价值较高。     

PICU患儿压力性损伤的临床特征、影响因素及预测模型的构建与评价

摘要 目的：分析儿科重症监护室（PICU）患儿压力性损伤（PI）的临床特征和影响因素,并构建和评价PICU患儿PI预测模型。方法：选取2020年1月～2022年5月我院PICU收治的387例患儿,收集所有PICU患儿临床资料并根据其是否发生PI分为PI组（63例）和非PI组（324）,分析PI患儿临床特征。采用单因素、多因素Logistic回归分析PICU患儿发生PI的影响因素并构建多指标联合应用预测模型,应用受试者工作特征（ROC）曲线分析多指标联合应用预测模型对PICU患儿发生PI的预测价值,采用H-L检验多指标联合应用预测模型的拟合优度。结果：387例PICU患儿PI发生率为16.28％（63/387）,共76处,美国国家压疮咨询委员会（NPUAP）分期以1期为主,其中58.73％（37/63）为黏膜PI,41.27％（26/63）为器械相关PI,64.47％（49/76）发生在头面部,18.42％（14/76）发生在下肢,10.53％（8/76）发生在骶尾部,3.95％（3/76）发生在上肢,2.63％（2/76）发生在躯干。单因素分析显示,PI组心血管疾病、神经系统疾病、昏迷/嗜睡比例和医疗设备数量高于非PI组,入住PICU时间长于非PI组,且Braden-Q量表评分低于非PI组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,心血管疾病、神经系统疾病、昏迷/嗜睡、医疗设备数量增加为PICU患儿发生PI的独立危险因素,Braden-Q量表评分升高为其独立保护因素（P＜0.05）。Braden-Q量表评分与多指标联合应用预测模型的ROC-AUC分别为0.702、0.910,多指标联合应用预测模型的预测效能更高。经H-L检验,多指标联合应用预测模型拟合效果良好。结论：PICU患儿是PI高危人群,NPUAP分期以1期且PI损伤部位多集中于头面部。心血管疾病、神经系统疾病、昏迷/嗜睡、医疗设备数量、Braden-Q量表评分是PICU患儿PI的影响因素,根据以上影响因素构建的PICU患儿PI多指标联合应用预测模型,拟合效果良好、预测价值较高。     

超声在完全与不完全川崎病患儿冠状动脉病变评估中的应用价值

摘要 目的：探讨超声在完全与不完全川崎病（Kawasaki Disease,KD）患儿冠状动脉病变（Coronary artery lesions,CAL）评估中的应用价值。方法：2019年6月到2021年5月选择在西安医学院第二附属医院住院诊治的83例川崎病患儿,其中完全川崎病患儿43例（完全组）,不完全川崎病患儿40例（不完全组）。所有患儿都给予超声检查,评估两组的临床表现、血液学指标、冠状动脉病变情况以及超声的诊断价值。结果：完全组的球结膜充血、皮疹、口唇破裂、手足硬肿、颈部淋巴结肿大等发生率高于不完全组（P>0.05）。两组的白细胞计数、血红蛋白对比差异有统计学意义（P<0.05）,C反应蛋白、血小板、白蛋白对比差异无统计学意义（P>0.05）。完全组的冠状动脉病变发生率为60.5 %,高于不完全组的27.5 %（P<0.05）。在83例患儿中,超声诊断为完全川崎病42例,不完全川崎病41例,超声对完全与不完全川崎病患儿的鉴别诊断敏感性与特异性为97.7 %（42/43）和100.0 %（40/40）。结论：完全与不完全川崎病患儿在临床表现、冠状动脉病变与实验室检测指标上都存在一定的差异,超声能鉴别诊断完全与不完全川崎病患儿的敏感性与特异性都比较好。     

头孢曲松+小剂量糖皮质激素联合肺泡灌洗术治疗儿童大叶性肺炎疗效分析

摘要 目的：探讨头孢曲松+小剂量糖皮质激素联合肺泡灌洗术对儿童大叶性肺炎的治疗效果。方法：选取我院2019年10月到2022年10月收治的270例大叶性肺炎儿童作为研究对象,依据治疗方法将患儿分为A、B、C三组,每组90例。所有患儿均采取常规维持水电解质、酸碱平衡、吸痰、清热、平喘、止咳等治疗,A组患儿在常规治疗基础上应用头孢曲松治疗,B组应用头孢曲松+小剂量糖皮质激素治疗,C组应用头孢曲松+小剂量糖皮质激素联合肺泡灌洗术治疗,对比三组患儿体征消失时间、影像学恢复时间,治疗前后白细胞计数（WBC）、中性粒细胞百分比（GRA）、降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）表达水平,临床疗效以及不良反应发生率。结果：三组患儿肺啰音/哮鸣音消失时间、咳嗽消失时间、发热总天数、影像学恢复时间对比差异显著,且C组明显低于B组和A组（P＜0.05）;三组患儿治疗前WBC、GRA、PCT、CRP、ESR表达水平对比无明显差异（P＞0.05）,治疗后三组患儿WBC、GRA、PCT、CRP、ESR表达水平均降低,且C组明显低于B组和A组（P＜0.05）;三组患儿治疗效果对比差异显著,C组明显高于B组和A组（P<0.05）;三组患儿不良反应发生率对比无明显差异（P＞0.05）。结论：采用头孢曲松+小剂量糖皮质激素联合肺泡灌洗术治疗儿童大叶性肺炎能够快速减轻患儿临床症状,降低炎症因子反应,提升治疗效果,且安全性较高,能够让患儿早日康复出院。     

壳聚糖酶的克隆表达与壳寡糖的制备分析

目的:克隆壳聚糖酶基因于大肠杆菌中实现高表达,制备壳寡糖。方法:以枯草芽孢杆菌总DNA为模板扩增壳聚糖酶基因(CSN),克隆至载体pET23a(+)上,转化菌株BL21(DE3)。重组子经0.5 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE和质谱检测与鉴定重组酶。酶纯化后水解壳聚糖,薄层色谱分析其水解产物。结果:质谱证明壳聚糖酶(31.5kDa)成功表达,表达量占菌体总蛋白的45%左右。纯化后重组酶浓度为900 mg/L,纯度95%、回收率85%,酶活力为10 000 U/mg。壳聚糖降解产物为壳二糖至壳四糖。结论:原核表达载体pET23a(+)-CSN构建正确,壳聚糖酶表达量与活性高,适用于水解壳聚糖制备壳寡糖。     

国内外蝗害治理技术现状与展望

本文首先概述了国内外蝗虫发生与为害的态势,总结了现阶段我国蝗虫发生与为害的主要特点:即农田飞蝗暴发频繁而且严重,草原土蝗的发生时常造成严重的经济损失,而且侵入城市干扰市民生活,我国与周边国家之间蝗虫过境迁移频繁,使用化学农药污染环境和农产品;分析了国内外蝗虫防治对策与技术的发展现状,重点介绍了应急防治和可持续治理对策、...     

Kinetics and thermodynamics of peroxidase- and laccase-catalyzed oxidation of N-substituted phenothiazines and phenoxazines

N -substituted phenothiazines (PTs) and phenoxazines (POs) catalyzed by fungal Coprinus cinereus peroxidase and Polyporus pinsitus laccase were investigated at pH 4–10. In the case of peroxidase, an apparent bimolecular rate constant (expressed as k _cat/K _m) varied from 1 ×10⁷M⁻¹s⁻¹to 2.6×10⁸M⁻¹s⁻¹ at pH 7.0. The constants for PO oxidation were higher in comparison to PT. pH dependence revealed two or three ionizable groups with pK _a values of 4.9–5.7 and 7.7–9.7 that significantly affected the activity of peroxidase. Single-turnover experiments showed that the limiting step of PT oxidation was reduction of compound II and second-order rate constants were obtained which were consistent with the constants at steady-state conditions. Laccase-catalyzed PT and PO oxidation rates were lower; apparent bimolecular rate constants varied from 1.8×10⁵M⁻¹s⁻¹ to 2.0×10⁷M⁻¹s⁻¹ at pH 5.3. PO constants were higher in comparison to PT, as was the case with peroxidase. The dependence of the apparent bimolecular constants of compound II or copper type 1 reduction, in the case of peroxidase or laccase, respectively, was analyzed in the framework of the Marcus outer-sphere electron-transfer theory. Peroxidase-catalyzed reactions with PT, as well as PO, fitted the same hyperbolic dependence with a maximal oxidation rate of 1.6×10⁸M⁻¹s⁻¹ and a reorganization energy of 0.30 eV. The respective parameters for laccase were 5.0×10⁷M⁻¹s⁻¹ and 0.29 eV. Received: 20 September 1999 / Accepted: 24 February 2000     

Coiled-coil nanomechanics and uncoiling and unfolding of the superhelix and alpha-helices of myosin

The nanomechanical properties of the coiled-coils of myosin are fundamentally important in understanding muscle assembly and contraction. Force spectra of single molecules of double-headed myosin, single-headed myosin, and coiled-coil tail fragments were acquired with an atomic force microscope and displayed characteristic triphasic force-distance responses to stretch: a rise phase (R) and a plateau phase (P) and an exponential phase (E). The R and P phases arise mainly from the stretching of the coiled-coils, with the hinge region being the main contributor to the rise phase at low force. Only the E phase was analyzable by the worm-like chain model of polymer elasticity. Restrained molecular mechanics simulations on an existing x-ray structure of scallop S2 yielded force spectra with either two or three phases, depending on the mode of stretch. It revealed that coiled-coil chains separate completely near the end of the P phase and the stretching of the unfolded chains gives rise to the E phase. Extensive conformational searching yielded a P phase force near 40 pN that agreed well with the experimental value. We suggest that the flexible and elastic S2 region, particularly the hinge region, may undergo force-induced unfolding and extend reversibly during actomyosin powerstroke.     

白术同源四倍体的诱导和鉴定及其与二倍体过氧化物酶的比较

以白术（Atractylodes macrooephala Koidz.）二倍体组培苗为材料,对其四倍体诱导方法进行研究,共获得45个白术同源四倍体株系,为优良株系的选育提供了材料。此外,还分析比较了其中8个白术四倍体株系与二倍体的过氧化物酶同工酶（POD）的酶谱差异,发现四倍体各株系过氧化物酶同工酶谱比二倍体的均多了Rf0.310的谱带,且总过氧化物酶比活力也发生了很大改变,对探讨白术四倍体优良株系的生理生化机理具有一定的参考价值。     

放牧对牧草光合作用、呼吸作用和氮、碳吸收与转运的影响

研究放牧对草地植物生理活动的影响,对于揭示草地放牧演替的生理机制有重要意义.大量研究表明,家畜放牧对牧草光合作用、呼吸作用以及C和N吸收与转运的影响,可以分为生理伤害和生理恢复2个阶段.放牧通过改变草地冠层结构影响牧草光合作用,净光合作用速率短期内迅速下降,随着叶面积指数增加又逐渐上升,呼吸作用有相似的变化趋势.牧草放牧后再生长所需的C和N最初主要来自根系和留茬中的贮藏物质,此后随着牧草生长恢复逐渐由同化作用供给,C代谢与土壤N水平负相关.放牧后牧草生理活动变化与牧草遗传特性、种间竞争、家畜放牧特征、非生物环境等因素密切相关.     

Synthesis of hapten and conjugates of coumestrol and development of immunoassay

3-O-Carboxymethylcoumestrol was prepared as the hapten for immunoassay by a partial alkylation of coumestrol with ethyl chloroacetate in acetone alkalized with potassium carbonate. 3-O-Ethoxycarbonylmethylcoumestrol was separated by column chromatography and finally was hydrolyzed with formic acid. 1H and 13C NMR data (APT, COSY, HMQC, and HMBC) revealed that the reaction was regioselective, as 3-O-ethoxycarboxymethylcoumestrol was the only monosubstituted derivative. The hapten was then conjugated to bovine serum albumin and used for immunization of rabbits. A radioimmunoassay (RIA) system was established based on the polyclonal antiserum and a 125I-labeled hapten-tyrosine methyl ester conjugate as the radioligand. Parameters of the RIA: sensitivity: 12 pg per tube, 50% intercept: 140 pg per tube, working range: 20-4000 pg per tube. The cross-reactivity of a panel isoflavonoid and lignan phytoestrogens was either negligible (e.g. formononetin 0.07%; biochanin A 0.06%) or not detectable at all. The major immunoreactive peak in HPLC fractions from an alfalfa extract had the same retention time as coumestrol standard and represented 94.8% of the signal. The remaining 5.2% of immunoreactivity was distributed between five minor peaks. We conclude that after the validation for particular matrices, the method will be a useful tool for analysis of coumestrol, especially in low volume and low concentration samples.