大鼠诱导型一氧化氮合酶基因转录调控区的克隆与鉴定

采用单特异引物ＰＣＲ克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转录调控区ＤＮＡ片段．核酸序列分析证实,大鼠ｉＮＯＳ基因的５′－侧翼区含有ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α应答元件及ＮＦ－κＢ结合位点的保守序列．这些保守序列的位置及排列显著区别于人和小鼠的ｉＮＯＳ基因．电泳迁移率改变分析（ＥＭＳＡ）表明,ＶＳＭＣ受ＩＬ－１和ＩＦＮ－γ刺激后,细胞核内产生某种可与ｉＮＯＳ基因５′－侧翼区特异结合的核蛋白因子．     

TNF-α、IL-1β及LPS对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达的影响及作用机制研究

通过ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定检查ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因表达及ＮＯ生成的影响．结果表明,ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ均能显著诱导ＶＳＭＣｉＮＯＳ基因表达和促进ＮＯ生成,其作用强度与浓度和作用时间有关;双因素（ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ,ＬＰＳ＋ＩＬ－１β）对诱导ｉＮＯＳ基因表达及ＮＯ生成产生协同作用．ＰｏｌｙｍｙｘｉｎＢ和地塞米松可部分抑制ＴＮＦ－α对ｉＮＯＳ基因表达的诱导作用及ＮＯ生成     

硫代反义寡核苷酸在细胞培养内抗甲型流感病毒活性

为了研究抗流感病毒特异性反义核酸药物,针对Ａ型流感病毒基因组３＇和５＇端保守序列,设计并合成了４条硫代寡核苷酸（ＯＤＮ）：３＇端反义ＯＤＮ（ＩＶ３＾＃）与３＇端正义ＯＤＮ（ＩＶ３Ｓ）,５＇端反义ＯＤＮ（ＩＶ４＾＃）与５＇端正交ＯＤＮ（ＩＶ４Ｓ）。以流感病毒血凝滴度和致细胞病变作用为指标,测定了ＯＤＮｓ在ＭＤＣＫ细胞中对Ａ型流感病毒Ａ／京防／８６－１（Ｈ１Ｎ１）复制的影响。结果表明,与流感病毒基因组     

iNOS在不同种属血管细胞中诱导表达差异的比较研究

为了探讨不同种属血管细胞中ｉＮＯＳ基因诱导表达的差异及其分子机制,采用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ印迹、电泳迁移率改变分析（ＥＭＳＡ）和细胞转染实验对ｉＮＯＳ基因在人、牛、大鼠血管内皮细胞（ＥＣ）和兔、大鼠平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）中的诱导表达和转录调控机制进行了研究．结果显示,ＩＬ－１β可诱导人、大鼠的ＥＣ和大鼠的ＶＳＭＣ表达ｉＮＯＳ,但对兔ＶＳＭＣ和牛ＥＣ无诱导作用．在ＩＬ－１β＋ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ作用下,人和大鼠血管细胞ｉＮＯＳ的表达活性显著高于牛和兔,同一种属动物的ＶＳＭＣ比ＥＣ更易被诱导活化．用含有大鼠ｉＮＯＳ基因上游－１０３７～－４３８片段的报告基因转染这些细胞,经细胞因子和ＬＰＳ处理后,被转染细胞的ＣＡＴ活性变化与细胞的ｉＮＯＳ表达活性相一致．上述结果表明,ｉＮＯＳ表达调节具有种属特异性和细胞特异性．ＥＭＳＡ证实在不同种属的ＥＣ和ＶＳＭＣ中,与ｉＮＯＳ基因表达调控区（－１０３７～－７８７）相互作用的蛋白因子是不均一的．提示不同种属血管细胞内特异转录因子的种类及浓度不同和（或）反式因子与顺式元件相互作用的方式不同可能是这种差异的分子基础．     

TNF—α—IL—1β及LPS对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达的…

通过ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定检查ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶基因表达及ＮＯ生成的影响,结果表明,ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ均能显诱导ＶＳＭＣｉＳ基因表达和促进ＮＯ生成,其作用强度与浓度和作用时间有关;双因素（ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ,ＬＰＳ＋ＩＬ－１β）对诱导ｉＮＯＳ基因表达及ＮＯ生成产生协同作用,ＰｏｌｙｍｙｘｉｎＢ和地塞米松可部分凶制     

IL-1β对正常和自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞iNOS基因转录调控因子的影响

用ＩＬ－１β处理体外培养的ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）,比较两种大鼠ｉＮＯＳ基因表达活性的变化,Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果表明,ＶＳＭＣ受ＩＬ－１β刺激后,两种细胞的ｉＮＯＳ基因均表现出极高的转录活性,并且ＳＨＲ的ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平高于ＷＫＹ大鼠．以大鼠ｉＮＯＳ基因转录调控区上游６００ｂｐ（－１０３７～－４３８）和下游５００ｂｐ（－４３７～４６）ＤＮＡ片段为探针,与ＶＳＭＣ核蛋白孵育后,进行凝胶电泳迁移率改变分析（ＥＭＳＡ）,结果显示,两种大鼠的ＶＳＭＣ被ＩＬ－１β处理后,其核蛋白可分别与转录调控区上游或下游序列结合形成一条电泳滞后带．但是,转录调控区上游序列和下游序列与核蛋白形成的复合物具有明显不同的电泳迁移率．与ＷＫＹ大鼠相比,ＳＨＲ的ＶＳＭＣ核蛋白与ＤＮＡ结合活性较高．提示ＳＨＲ的ＶＳＭＣｉＮＯＳ基因及其转录调控因子对ＩＬ－１β的反应与ＷＫＹ大鼠明显不同．     

抗寒剂CR－4提高玉米幼苗抗寒力及质膜5＇－核苷酸酶冷稳定性的研究

抗寒剂ＣＲ－４提高玉米幼苗抗寒力及质膜５＇－核苷酸酶冷稳定性的研究孙龙华,简令成,王瑞萍（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＳＴＵＤＩＥＳＯＦＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣＲ－４ＦＯＲＩＮＣＲＥＡＳＩＮＧＣＯＬＤＨＡＲＤＩＮＥＳＳＡＮＤＳＴＡＢＩ...     

新麦草的组织培养及染色体分析

新麦草的组织培养及染色体分析孙震晓,夏光敏,陈惠民（山东大学生物系．济南２５０１００）ＴＩＳＳＵＥＣＵＬＴＵＲＥＡＮＤＣＨＲＯＭＯＭＥＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＰｓＡＴＨＹＲＯＳＡＣＨＹＳＪＵＮＣＥＡ（ＦＩＳＣＨ．）ＮＥＶＳＫＩｓｕｎＺｈｅｎ－ｘｉａｏ;ｘ...     

脂多糖对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达及细胞增殖的影响

应用ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定检查脂多糖（ＬＰＳ）对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）一氧化氮合酶（ＮＯＳ）基因表达及ＮＯ合成的影响,用３Ｈ－ＴｄＲ参入实验观察ＬＰＳ对细胞ＤＮＡ合成的影响．结果表明,ＬＰＳ在诱导ＶＳＭＣｉＮＯＳｍＲＮＡ表达和促进ＮＯ合成的同时,抑制ＶＳＭＣＤＮＡ合成．证明ＬＰＳ的作用与其浓度和作用时间有关     

植物抗寒剂的使用方法与效果分析

植物抗寒剂的使用方法与效果分析简令成（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＭＥＴＨＯＤＳＯＦＰＬＡＮＴＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＡＮＤＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＩＴＳＥＦＦＥＣＴＩＶＥＮＥＳＳ￥ＪｉａｎＬｉｎｇ－ｃｈｅｎｇ（Ｉｎｓ...     

脂多糖对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达及细胞增殖的影响

应用ＲＮＡ迷分析和亚硝酸盐含量测定检查脂多糖（ＬＰＳ）对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）一氧化氮合酶（ＮＯＳ）基因表达及ＮＯ合成的影响,用Ｔ３Ｈ－ＴｄＲ参入实验观察ＬＰＳ对细胞ＤＮＡ合成的影响,结果表明,ＬＰＳＤ 诱导ＶＳＭＣｉＮＯＳｍＲＮＡ表达和促进ＮＯ合成的同时,抑制ＶＳＭＣＤＮＡ合成,证明ＬＰＳ的作用与其浓度和作用时间有关。     

金樱子花粉形态及营养成分研究

金樱子花粉形态及营养成分研究刘剑秋,张清其,吴文珊（福建师范大学生物系,福州３５０００７）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＭＯＲＰＨＯＬＯＧＹＡＮＤＮＵＴＲＩＴＩＯＮＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳＯＦＰＯＬＥＮＯＦＲＯＳＡＬＡＥＶＩＧＡＴＡ￥ＬｉｕＪｉａｎｇ－ｑｉｕ;Ｚ...     

池塘养殖环境中底质－水界面营养盐扩散通量的现场测定

池塘养殖环境中底质－水界面营养盐扩散通量的现场测定ＦＩＥＬＤＤＥＴＥＲＭＩＮＡＴＩＯＮＯＦＤＩＦＦＵＳＩＯＮＦＬＵＸＯＦＮＵＴＲＩＥＮＴＳＦＲＯＭＳＥＤＩＭＥＮＴ－ＷＡＴＥＲＩＮＴＥＲＦＡＣＥＯＦＣＵＬＴＵＲＥＰＯＮＤ￥ＳｕｎＹａｏ（ＹｅｌｌｏｗＳｅ...     

细胞因子基因导入人肿瘤细胞的方法及鉴定

从人外周血单核细胞中抽提总ＲＮＡ为模板,分别用５‘含ＥｃｏＲⅠ３含ＢａｍＨＩ限制性酶切位点的细胞因子基因特异引物成含信号肽全长ＩＬ－２,γ－ＩＦＮ及α－ＴＮＦｃＤＮＡ。然后将这些细胞因子ｃＤＮＡ分别重组入含筛选标记基因Ｎｅｏ逆转录病毒载体ＬＸＳＮ中,采用磷酸钙共沉淀法转染逆转录病毒包装细胞系ＰＡ３１７。分别收集到含ＩＦＮ－γ,ＴＮＦ－α和ＩＬ－２基因的缺陷型逆转录病毒上清及只具空白载体质粒ｐＬＸＳ     

二种不同抗冷性水稻品种剑叶5’－核苷酸酶的细胞化学定位

二种不同抗冷性水稻品种剑叶５’－核苷酸酶的细胞化学定位陈善娜邹晓菊梁斌（云南大学生物系，昆明６５００９１）ＴＨＥＣＹＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＬＯＣＡＴＩＯＮＯＦ５’－ＮＵＣＬＥＯＴＩＤＡＳＥＩＮＳＷＯＲＤＳＨＡＲＰＥＤＬＥＡＶＥＳＯＦＴＷＯＤＩＦＦＥＲ...     

NOS结构及NOS氧化酶域与抑制剂络合的研究进展

ＮＯＳ氧化精氨酸生成ＮＯ,ＮＯ是一种信息分子和防御细胞毒素的效应分子。细胞因子诱导型ＮＯＳ氧化酶域（ｉＮＯＳｏｘ）具有独特的折叠方式及血红素周围结构。两个ＮＯＳ单元形成二聚体时,ＮＯＳ才具有活性,二聚体形成受蝶呤（Ｈ４Ｂ）结合的影响。咪唑（ＩＭ）及氨基胍结合位点的发现对药物设计具有重要意义,为寻找多位点结合抑制剂提供了研究方向。     

关于平列型气孔定义的讨论

关于平列型气孔定义的讨论汪乐原（湖北药检高等专科学校,武汉４３００６４）ＡＤＩＳＣＵＳＳＩＯＮＯＮＴＨＥＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮＳＯＦＰＡＲＡＣＹＴＩＣＳＴＡＭＡＴＡＷａｎｇＬｅ－ｙｕａｎ（ＨｕｂｅｉＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＭｅｄｉｃａｌＥｘａｍｉｒ...     

逆转录病毒载体介导诱导型NO合酶在神经细胞中表达

为了深入研究诱导型一氧化氮合酶基因表达产物在阿片耐受和依赖中作用,采用脂质体介导基因转染技术,将ｉＮＯＳ ｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体导入ＮＧ１０８－１５神经细胞,获得Ｇ４１８抗性克隆,命名为ＮＧ－ＬＮＣＸｉＮＯＳ细胞。ＤＮＡ印迹杂交,ＰＣＲ扩增及ＲＴ－ＰＣＲ和蛋白质免疫印迹杂交分析,证实ＮＧ－ＬＮＣＸｉＮＯＳ细胞有外源ｉＮＯＳ基因整合,转录和表达;ＮＡＤＰＨ黄递酶（ＮＡＤＰＨ ｄｉａｐｈｏｒａｓｅ     

整体化石植物复原方法介绍

整体化石植物复原方法介绍李中明（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＡＮＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＴＯＴＨＥＭＥＴＨＯＤＳＯＦＲＥＣＯＮ－ＳＴＲＵＣＴＩＯＮＯＦＷＨＯＬＥＦＯＳＳＩＬＰＬＡＮＴＳ￥ＬｉＺｈｏｎｇ－ｍｉｎｇ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏ...     

紫外线对大豆胚芽化学发光的影响

紫外线对大豆胚芽化学发光的影响范立通（山西大学分子科学研究所,太原０３００６）ＥＦＦＥＣＴＯＦＵＴＲＡＶＩＯＬＥＴＲＡＹＯＮＴＨＥＣＨＥＭＩＬＵＭ－ＩＮＥＳＣＥＮＣＥＯＦＳＯＹＢＥＡＮＥＭＢＲＹＯＮＩＣＳＨＯＯＴ￥Ｆａｎｌｉ－ｔｏｎｇ（Ｉｎｓｔｉｔｕ...