小麦花粉无性系的建立及其胚状体的发生

本文报道的小麦花粉无性系,已继代培养了两年零一个月共27代,目前仍具有分化能力。继代分化固体培养基以:MS附加NAA0.6毫升/升+KT0.2毫克/升为最好。较好的恢复再生培养基为MS液体培养基附加2.4-D 0.6毫克/升+NAA0.2毫克/升+6-BA 2毫克/升+CH500毫克/升予处理三天后转入附加2.4—D0.6毫克/升+KT 2毫克/升+CH 500毫克/升的MS固体培养基,培养十八天后,丧失分化能力已达八个月之久的愈伤组织又恢复了再生能力,分化出植株。通过愈伤组织的细胞学观察,小麦花粉愈伤组织无性系,分化成小植株的途径有二:一是由特化的胚性细胞经多次分裂后发育成胚状体长成小植株;二是由特化的表层细胞经多次分裂后发育成芽苗。胚性细胞发生于愈伤组织的表皮层和表皮附近的细胞层,有的也可在内层已衰老的细胞中产生。胚状体与芽的区别特征是:胚状体具有两极性,两极间有维管组织相连接;芽具有单极性,芽端的维管组织与愈伤组织内维管组织相连接。     

油菜游离细胞培养及易再生的体细胞无性系的建立

以芥菜型油菜(Brcssica juncea)下胚轴来源的愈伤组织为材料,进行悬浮细胞振荡培养,得到游离的单细胞。这些细胞作浅层液体静置培养,可获得高频率的愈伤组织。在附加有水解乳蛋白200毫克/升、BA 2—3毫克/升及GA,0.1—1毫克/升的MS培养基上,这些愈伤组织分化了芽。分化的芽在无激素或附加有0.01—0.1毫克/升IAA或NAA的MS培养基上长出根,从而发育成完整植株。当对游离细胞获得的再生植株的茎切段愈伤组织,再经上述程序进行细胞培养时,发现愈伤组织诱导率及愈伤组织分化频率均远远高于原供体,从而建立了B.juncea易再生的体细胞无性系。     

百合离体培养再生植株

植物名称:百合Lilium brownii F.E.Brown var.viridulum Baker.材料类别:多年生鳞茎的鳞片切块和试管无菌幼苗的片段培养条件:鳞茎培养基:MS无机盐,附加B_10.5(毫克/升,下同)、B_60.2、甘氨酸3、烟酸0.5、NAA2、IBA0.4、KT2。幼苗培养基:MS基本培养基,诱导愈伤组织时,附加2,4-D1、IAA1、     

华西贝母的组织培养

植物名称:华西贝母(Fritillaria sichuanicaS.C.Chen,sp.nov.) 材料类别:取2—3年生的幼嫩贝母鳞茎和4—5年生的老贝母鳞茎。经0.2％升录消毒15分钟,无菌水冲洗干净,在无菌条件下将鳞茎切成0.3—0.5厘米的小块。培养条件:(1)诱导出愈伤组织及叶状体的胱分化培养基是MS_9(MS NAA 1毫克/升 2.4-D2毫克升),(2)形成小鳞茎、不定芽及分化出根、苗等,用培养基MS_(16)(6BA13毫克/升 NAA0.5毫     

中国水仙(Narcissus tazetta var.Chinensis Roem)愈伤组织的培养及植株分化试验

以中国水仙鳞茎切块(开花前的为好)作为培养材料,鳞茎盘及心芽诱导率为高。不同附加成份的MS培养基所诱导的愈伤组织类型不同。在附加2,4-D0.6;IAA10;NAA0.2;肌醇200毫克/升;椰子汁10毫升;蔗糖2％的MS培养茎上,愈伤组织质地疏松,呈灰白色,稍透明而富粘性(图1),生长迅速,不易分化,可连续继代培养。附加2,4-D2;KT0.3;3％     

烟草叶组织培养中愈伤组织和芽形成的细胞学观察

用烟草叶组织切块,培养在附加2毫克/升 NAA 和0.5毫克/升 BA 的 MS 培养基上诱导愈伤组织形成,以及在加有2毫克/升 BA 的培养基上诱导形成芽,研究了愈伤组织和芽形成过程中的组织细胞学变化。培养3天后,叶肉细胞增大,核染色加深,细胞积累淀粉;在叶切口处的叶肉细胞,维管束上方的栅栏组织细胞以及维管薄壁细胞开始分裂。随后细胞分裂逐渐遍及整个培养材料,其中以切口处的细胞分裂最为活跃。在栅栏组织中,由于细胞多次横向分裂的结果,形成排列整齐的细胞。叶肉细胞中叶绿体也随之逐渐减少,以至消失。培养7天后,在叶组织中即形成大量的分生细胞团,这种分生组织起源于两类细胞,即叶肉细胞,以及维管组织中的韧皮部薄壁细胞和维管束鞘细胞。在加有 NAA 和 BA 的培养基上,活跃细胞分裂的结果即导致形成愈伤组织。而在附加 BA 的培养基上培养10天,即可见分生细胞团进一步分化形成大量芽原基。芽可以起源于表层的分生细胞团,也可由组织较深处的分生组织分化而成。在芽形成的过程中,细胞中积累的淀粉逐渐被利用而消失。     

风信子的组培

用风信子(Hyacinthus orientalis) 的小鳞茎常规消毒,切成0.4×0.4厘米的小块,接种在MS+6BA10毫克/升+ NAA1毫克/升培养基内,在15—20℃自然光加1000勒克司日光灯,每天10小时光照15天后,形成愈伤组织块,一个月后每块形成10—66个胚状体。将胚状体移植于生长培养基MS+6BA2毫克/升+NAA2毫克/升内继续培养,15天后     

番木瓜的愈伤组织和苗端再生植株

用两种离体培养方法以再生番木瓜植株。一种是从愈伤组织再生;另一种是从单个苗端的外植体产生多个植株。番木瓜的愈伤组织是从幼苗茎的切段诱导的,茎段培养在含有1毫克/升 NAA(萘乙酸)和0.1毫克/升 KT(激动素)的培养基中。当愈伤组织转移到含有低浓度生长素(0—0.5毫克/升IAA(吲哚乙酸)和较高浓度的 KT(1-2毫克/升)的培养基时,再生了苗     

芥菜型油菜原生质体再生成植株的研究

芥菜型油菜子叶和下胚轴原生质体在含0.5毫克/升NAA、0.5毫克/升2,4-D和1毫克/升BA的Nitsch培养基中发育成愈伤组织。“黄辣芥”子叶原生质体来源的愈伤组织在无生长素而含有3毫克/升BA或2毫克/升KIN的MS固体培养基上分化了芽;即使是低水平的生长素(0.05毫克/升NAA)也不利于芽的分化。当芽长到2—3厘米高时,将其从愈伤组织上切下,转移到不含细胞分裂素而有0.01—0.05毫克/升IAA的MS培养基上,很快长出根,从而得到完整的再生植株。     

水稻花粉植株的诱导及其后代观察

研究了水稻(Oryza sativa)花药的离体培养及其花粉植株后代的表现,得到如下结果: 1.用加有2,4-D 1—5毫克/升的Blaydes培养基培养水稻花药,诱导出水稻花粉愈伤组织。采用花粉处于单核期的花药进行培养比较合适。 2.诱导愈伤组织成苗,以二次诱导法效果较好。即将愈伤组织种植在低浓度激素的培养基上(IAA 0.05—0.5毫克/升,激动素1—2毫克/升),在此培养基上分化快,芽点多,但芽不易伸长;芽点出现后再移到激素浓度较高的培养基上(IAA 2毫克/升,激动素4毫克/升),很快出现幼苗。 3.水稻花粉植株二代,田间表现和室内分析结果表明基本整齐一致,没有分离。杂种F_1花粉植株后代在许多性状上超过双亲,有选种价值。说明水稻花药培养用于育种是可能的。     

郁金香的组织培养

植物名称:郁金香(Tulipa gesneriana) 材料类别:鳞茎及鳞片切块(鳞茎切块指带有鳞茎底盘的切块)。培养条件:以MS为基本培养基,诱导愈伤组织每升附加NAA3—4mg,BA2—3mg;诱导芽分化每升附加NAA0.5mg,BA1—2mg;诱导生根用1/2MS(MS大量元素减半)培养基,每升附加NAA0.5—1mg,蔗糖减至2％。温度16—24℃,光照10小时,光强1000—1500lx。生长与分化情况:材料经低温处理(5℃处理一个月)后接种,在黑暗条件下培养一个月后,鳞茎切     

太白米组织培养的研究

太白米地下鳞茎在MS附加不同浓度KT、BA、IAA、NAA、2,4－D的培养基上,可诱导产生愈伤组织,其中在MS附加NAA 0.5mg/L,KT0.1mg/L的培养基上愈伤组织诱导率最高,可达65％,且生长快;培养在MS附加2,4－D 1.0mg/L,KT 0.1mg/L培养基上的鳞茎可经不定根直接发育成新的鳞茎,由此建立了太白米的鳞茎再生体系,鳞茎再生率达2．17倍。     

植物激素对草莓叶片不定芽形成的影响

用试管内生长的草莓幼嫩叶片作外植体,培养在MS基本培养基上附加1.5—2.5毫克/升6—BA和0.1毫克/升NAA,可直接诱导成不定芽,诱导率可达20%。如果不定芽继代培养在同样浓度的培养基上,继而可形成大量的丛生芽。能使叶外植体形成不定芽的植物激素组合而不能使其愈伤组织分化成芽。IAA与6—BA的不同浓度组合对不定芽形成效果不明显。     

甜菊(Stevia rebaudiana Bertoni)的组组培养

用本所栽培的甜菊的幼嫩茎叶,或由种子形成的无菌幼苗作为材料。诱发愈伤组织培养基为MS培养基(2,4-D0.8～1.0;KT或6-BA0.2～0.5;或KT及6-BA各加0.2毫克/升)和kT培养基(KT1.0;2,4-D1～3;NAA0.2毫克/升)。10天左右,渐形成生长旺盛的、淡黄或淡绿色的愈伤组织(图1,2),诱导率60％以上。愈伤组织可长期继代培养而不失其旺盛的生长能力。分化培养基成     

不同激素对伊贝母组织培养中染色体不稳定性的研究

伊贝母鳞茎培养在附加2,4—D、IAA、NAA和2,4—D+KT、IAA+KT、NAA+KT的MS培养基上(2,4—D、IAA、NAA1毫克/升,KT0.1毫克/升),研究了愈伤组织细胞染色体的变异及愈伤组织的分化和再生植株的染色体倍性。结果表明,2,4—D能有效地引起染色体数目的变化,当和KT结合使用时,可诱导高频率的多倍化细胞。IAA的作用次之,NAA较小。各种激素均能程度不同地引起各种类型的有丝分裂异常及染色体结构变异,其效应与对染色体数目变异的影响呈现明显的一致性。研究还得出,染色体的整倍性是愈伤组织得以分化的重要因素,所以再生植株主要是二倍体,也有少量的四倍体,混倍体仅占少数。根据实验结果,对染色体变异的原因以及染色体数目变异与愈伤组织分化的关系进行了讨论。     

川芎的组织培养及植株再生

植物名称:川芎(Ligusticum wallichii Franch)材料类别:长有1—2片真叶的幼嫩茎段和叶片培养条件:基本培养基采用MS。诱导愈伤组织培养基为MS,每升补加2,4-D2.0毫克,6BA0.4毫克;诱导芽分化培养基为MS,每升补加6BA0.4毫克、IAA0.5毫克;诱导根分化培养基为1/2MS,每升补加6BA0.2毫克,IAA1.0毫克。培养温度     

离体培养菠萝的分化

菠萝的各种器官(幼嫩的聚花果、花药、吸芽或裔芽的腋芽、小的冠芽和小的裔芽)培养在含有1—10毫克/升的 NAA(萘乙酸)和 BA(6—苄基腺嘌呤)的 MS 培养基上。花药的培养是采用含有四分体至成熟花粉各时期的材料,但均没有观察到形成花粉愈伤组织,偶而能形成花丝愈伤组织,     

单倍体水稻体细胞组织的植株再生及其激素调节

本文报道激素对调节单倍体幼穗组织去分化与分化的方向以及器官形成的影响。发现在试验浓度内(2毫克/升),2,4-D诱导组织去分化,NAA诱导根的大量形成,KT抑制愈伤组织形成和器官分化。KT2毫克/升 NAA2毫克/升使外植体不经过愈伤组织阶段就直接分化大量的苗。当KT/NAA=2:2时,直接分化苗的频率较高,达76％,不同浓度的2,4-D试验表明,2,4-D2毫克/升或4毫克/升时,愈伤组织诱导率高达94％以上。固体和液体继代培养中,低浓度的2,4-D(0.5—0.1毫克/升)加0.1毫克/升的KT,对愈伤组织保持旺盛的生长和后来的分化有良好的作用。发现单倍体体细胞组织再生的植株,白苗很少。讨论了单倍体体细胞愈伤组织无性系用于诱发突变和体细胞遗传研究的可能性。对于愈伤组织的再分化,不仅需要细胞分裂素,而且诱导培养基中生长素浓度的影响也是显著的。     

黄花菜组织培养研究简报

植物名称:黄花菜(Hemerocallis fullva)。材料类别:心叶。培养条件:诱导愈伤组织培养基(培养基-1):N_6+2,4-D2毫克/升+6BA_1毫克/升;分化培养基(培养基-2):N_6+2,4-D0.25毫克/升+6BA2毫克/升+肌醇100毫克/升。将芽及愈伤组织转移至N_6+2,4-D0.1毫克/升+IAA_1毫克/升+6BA0.2毫克/升+肌醇     

银杏组织培养的初步研究

用银杏(Ginkgo biloba Linn.)种子胚剪成2—3段,培养在White+2,4-D5毫克/升+NH_4Cl5.34—53.49毫克/升+LH200—400毫克/升的培养基上,诱导愈伤组织形成,并在培养10—25天后在胚轴的伤口上形成芽,再转移到加有0.05％活性碳的上述培养基上,6—10天后生根长成完整植株。