骨肉瘤中血管生成拟态与HIF-1α蛋白的关系及临床意义

目的检测骨肉瘤中血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的关系及临床意义,旨在探寻影响骨肉瘤进展及预后的有效指标。方法采用CD34和PAS套染法检测108例骨肉瘤及28例骨软骨瘤中VM、微血管密度(Microvessel density,MVD)及HIF-1α表达水平差异,并分析其与骨肉瘤患者临床病理因素及5年存活率之间的关系。结果骨肉瘤组织中VM、HIF-1α过表达及MVD≥22的阳性率分别为62.96%(68/108)、57.41%(62/108)和58.33%(63/108),骨软骨瘤中分别为0%(0/28)、32.14%(9/28)和28.57%(8/28)(P<0.05);VM、HIF-1α过表达及MVD与骨肉瘤分级、远处转移及软组织浸润和Enneking分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别、部位、肿瘤大体、组织学类型和直径无关(P>0.05);骨肉瘤中VM、HIF-1α过表达与MVD之间呈正相关(P<0.05);VM阳性、HIF-1α过表达及MVD≥22组患者5年存活率分别为8.82%(6/68)、8.06%(5/62)和3.17%(2/63);VM阴性、HIF-1α低表达及MVD<22组分别为87.5%(35/40)、78.26%(36/46)和86.67%(39/45)(P<0.05);Cox多因素分析提示VM、HIF-1α、MVD、远处转移、软组织浸润和Enneking分期是影响骨肉瘤患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 VM可能是判断骨肉瘤预后的新指标,联合检测VM、HIF-1α及MVD对骨肉瘤的侵袭、转移及预后判断有重要意义。     

稽留流产患者血清和绒毛中HIF-1α和VEGF表达水平及其相关性分析

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在稽留流产患者血清和绒毛中的表达水平及其相关性分析。方法:选择2014年8月至2015年8月我院妇产科76例稽留流产患者为观察组及行人工流产的60例正常早产孕妇为对照组;根据患者稽留流产时间将稽留流产患者分为稽留时间2周组(12例),2~4周组(33例),4周组(31例);采用酶联免疫吸附(ELISA)和免疫组化SP法检测并分析患者血清与绒毛中HIF-1α与VEGF的表达水平。结果:观察组血清中HIF-1α与VEGF表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组和对照组绒毛VEGF和HIF-1α均表达,其中VEGF主要表达于滋养层细胞细胞质和细胞间质,HIF-1α主要表达于滋养层细胞的细胞核与细胞质,且观察组患者绒毛HIF-1α与VEGF表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同稽留时间患者绒毛HIF-1α与VEGF表达水平间比较,差异均无统计学意义(P0.05)观察组患者血清HIF-1α与VEGF的表达水平呈现正相关关系(r=0.601;P0.05);且绒毛HIF-1α与VEGF的表达水平也呈现正相关关系(r=0.401;P0.05)。结论:HIF-1α和VEGF在血清和绒毛中的低表达可能是稽留流产的发生的重要原因,临床上可以通过检测患者血清和绒毛组织中HIF-1α和VEGF的水平,有针对性的对患者进行监护和治疗,预防稽留流产的发生。     

结直肠癌组织中Ezrin和P53的表达及临床病理特征的关系研究

目的:探讨结直肠癌组织中Ezrin和P53的表达及临床病理特征的关系。方法:选取2014年5月至2016年6月我院收治的140例结直肠癌患者,行手术切除结直肠癌组织,经纳入排除标准后,94例癌组织标本纳入本研究并作为研究组,并从中抽取35例手术标本切缘的正常结直肠黏膜组织作为对照组,采用免疫组化测定Ezrin和P53的表达情况,并对两者进行相关性分析。结果:Ezrin、p53蛋白在研究组的表达阳性率分别为52.13%、56.38%,明显高于对照组的0.00%(x~2=25.731、33.496,P0.05)。高、中分化患者Ezrin、p53表达阳性率分别为46.99%、51.81%,明显低于低、未分化患者的90.91%、90.91%(x~2=7.508,P0.05;x~2=4.401,P0.05);有淋巴结转移患者Ezrin、p53表达阳性率分别为77.05%、68.85%,明显高于无淋巴结转移患者的6.06%、33.33%(x~2=43.245,P0.05;x~2=15.846,P0.05);浸润深度T3、T4患者的Ezrin表达阳性率55.81%明显高于浸润深度T1、T2患者的12.50%(x~2=5.503,P0.05);TNM分期Ⅲ、Ⅳ患者Ezrin、p53表达阳性率分别为88.24%、74.51%,明显高于TNM分期Ⅰ、Ⅱ患者的9.30%、34.88%,(x~2=5.522,P0.05;x~2=5.036,P0.05)。49例Ezrin表达阳性患者中,p53表达阳性有11例,而56例Ezrin表达阴性患者中,p53表达阴性14例,Ezrin表达与p53表达无相关性(r=0.209,P0.05)。结论:Ezrin和P53蛋白均与结直肠癌发生和发展存在一定的相关性,有助于结直肠癌预后的判断。     

人非小细胞肺癌中缺氧诱导因子1α的表达及临床意义

目的:探讨人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达及临床意义.方法:采用免疫组化染色方法检测80例NSCLC及12例正常肺组织标本中HIF-1α、Ki-67和血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的表达水平,分析其表达与肿瘤细胞增殖、血管新生及预后的关系.结果:NSCLC组织中HIF-1α表达率(63.75%)显著高于正常肺组织(25.00%)(P<0.05),NSCLC组织中HIF-1α表达水平与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移及TMN分期密切相关(P<0.05),在HIF-1α高表达组,相应Ki-67、VEGF的阳性表达率增高(P<0.05).Kaplan-Meier单因素生存分析显示HIF-1α高表达为NSCLC患者预后的不良因素(P<0.05),COX多因素回归分析同样显示HIF-1α高表达为NSCLC患者不良预后的独立因素.结论:HIF-1α高表达可促进NSCLC患者肿瘤细胞增殖并诱导新生血管形成,是肿瘤恶性程度及疾病预后的重要检测标志物.     

神经胶质瘤中PTEN、Ki-67和HIF-1α的表达及临床意义

目的:抑癌基因PTEN、癌基因Ki-67及HIF-1α对多种人类肿瘤的恶性进展均起重要的调控作用。本研究主要探讨PTEN、Ki-67及HIF-1α在人脑胶质瘤中的表达及临床意义,为胶质瘤患者预后的判定、分子病理学的诊断、基因靶向的治疗奠定理论基础。方法:在83例原发性人脑胶质瘤组织样本中,通过免疫组化的方法检测PTEN、Ki-67及HIF-1α的表达情况,并分析其表达相互间及其表达与肿瘤恶性级别之间的相关性。结果:在正常脑组织中,PTEN的表达均为阳性,Ki-67的表达均为阴性,10%(1/10)的样本HIF-1α的表达为阳性。在胶质细胞瘤中,PTEN的表达显著降低(P=0.001),而Ki-67(P0.001)和HIF-1α(P=0.001)的表达明显增高。随肿瘤恶性级别的增高,PTEN的表达呈降低趋势(P0.001),而Ki-67和HIF-1α的表达呈升高趋势(两者P均0.001)。相关性分析表明,PTEN的表达与Ki-67和HIF-1α的表达呈负相关(r值分别为-0.289和-0.304;P值分别为0.008和0.005),Ki-67的表达与HIF-1α的表达呈正相关(r=0.833;P0.001)。结论:胶质瘤组织缺乏抑癌基因PTEN蛋白的表达,而高度表达癌基因Ki-67和HIF-1α。抑癌基因PTEN表达减少或失活,癌基因Ki-67和HIF-1α的过表达对胶质瘤恶性进展可能起到至关重要的作用。PTEN、Ki-67和HIF-1α蛋白的联合检测对胶质瘤恶性程度和预后的判定有十分重要的临床意义。     

肾细胞癌组织中PTEN和HIF-1α的表达及临床意义

目的:探讨PTEN和HIF-1α在肾细胞癌组织中的表达及临床意义。方法:随机选取2012年1月~2016年1月我院留样的90例肾细胞癌组织(肾癌组)、90例癌旁非癌组织(癌旁组),另选取30例非癌正常肾组织作为正常组,利用免疫组化法检测组织中PTEN和HIF-1α的表达,并分析其与肾细胞癌临床特征的关系。结果:PTEN主要表达在细胞浆,HIF-1α主要表达在细胞核,PTEN、HIF-1α在三组间的表达均有统计学差异(P0.05);PTEN高表达阳性率与Robson分期、Fuhmian分级、有无淋巴结转移、有无远处转移有关(P0.05),HIF-1α高表达阳性率与Robson分期、病理分型、Fuhmian分级、有无淋巴结转移、有无远处转移有关(P0.05);PTEN表达与肾细胞癌Robson分期和Fuhrman分级均呈负相关(r=-0.581,-0.442,P0.05);HIF-1α表达与肾细胞癌Robson分期和Fuhrman分级均呈正相关(r=0.597,0.489,P0.05);PTEN与HIF-1α表达呈负相关(r=-0.435,P0.05)。结论:PTEN和HIF-1α的表达与肾细胞癌的临床分期、组织学分级以及淋巴结和远处转移等具有明显关联性,可作为提示肾细胞癌的进展的指标。     

HIF-1α和COX-2在溃疡性结肠炎患者外周血及黏膜组织中表达及意义

目的:探讨HIF-1α和COX-2在溃疡性结肠炎(UC)患者外周血及黏膜组织中表达及意义。方法:87例UC患者根据临床病情分为活动期(n=63)和缓解期(n=24),同期选取行结肠镜检查无异常健康者40名作为对照组,利用qRT-PCR对外周血及黏膜组织标本中HIF-1α和COX-2表达进行检测。结果:活动期UC患者外周血和黏膜组织中HIF-1αmRNA和COX-2mRNA相对表达量均高于缓解期患者,且均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);活动期UC患者中,临床病情重型患者外周血及黏膜组织中HIF-1αmRNA和COX-2mRNA相对表达量高于中型及轻型患者,差异均有统计学意义(P0.05),内镜表现分级Ⅲ级患者外周血及黏膜组织中HIF-1αmRNA和COX-2mRNA相对表达量高于Ⅱ级及Ⅰ级患者,差异均有统计学意义(P0.05);Pearson相关分析显示,活动期UC患者外周血及黏膜组织中HIF-1αmRNA和COX-2mRNA相对表达量均与Mayo评分呈正相关(r=0.592、0.722和0.694、0.456,P0.05);Spearman相关分析显示,活动期UC患者外周血及黏膜组织中HIF-1αmRNA和COX-2mRNA相对表达量均与临床病情呈正相关(r=0.804、0.826和0.752、0.763,P0.05),且与内镜表现分级呈正相关(r=0.803、0.749和0.858、0.793,P0.05)。结论:HIF-1α和COX-2在UC患者外周血及黏膜组织中呈高表达,且与患者病情严重程度有关。     

VEGF、HIF-1α、Vasohibin在子宫内膜腺癌血管生成中的作用及与预后的关系

目的通过研究血管内皮生长因子(vascular endometrial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和vasohibin在正常子宫内膜(normal endometrium,NE)和子宫内膜样腺癌(endom-etrioid adenocarcinoma,EA)组织中的表达,探讨上述指标与间质微血管密度(microvessel density,MVD)、EA临床病理特性及预后的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测105例EA和20例NE组织中VEGF、HIF-1α、vasohibin和MVD的表达。分析各指标相互之间及与EA临床病理特性和预后间的关系。结果(1)EA组中,VEGF、HIF-1α和MVD的表达明显高于NE组(P0.05),vasohibin的表达明显低于NE组(P0.01)。(2)VEGF、HIF-1α和MVD的表达与EA的手术病理分期相关(P0.05)。(3)在EA组,除vasohibin外,VEGF、HIF-1α和MVD三者的表达量两两间均呈正相关(P0.05)。(4)98例有完整随访资料患者的5年生存率为87.8%,VEGF、HIF-1α及vasohibin表达阳性组与阴性组5年生存率无显著性差异;MVD高表达组5年生存率明显低于MVD低表达组(P0.05)。结论异常增生的微血管与EA发生、发展及预后有关。VEGF、HIF-1α、vasohibin三者间动态平衡的失调促进了EA组织中的微血管生成,重建三者间的正常调节关系,刺激vasohibin的表达,可能是EA治疗的一个靶点。     

乳腺癌乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)与雌激素受体表达的关系

目的探讨乳腺癌乏氧诱导因子-1α(hypoxia induci blefactor-1α,HIF-1α)与雌激素受体(ER)表达的关系。方法利用免疫组织化学方法在42例乳腺癌组织中进行HIF-1α染色,并与ER表达情况及其他临床病理资料进行相关性分析。结果乳腺癌组织中HIF-1α阳性表达率为54.76%,ER表达阳性率为66.67%(28/42)。ER表达率在HIF-1α阳性者中为56.52%,HIF-1α阴性者中为78.95%,P=0.125。而在细胞水平上,ER在HIF-1α阳性者和阴性者中的表达量积分,分别为2.96±1.97、5.11±2.58,t=3.06(P=0.004),Spearman等级分析,r=-0.49(P=0.003)。另外,HIF-1α表达除常见于绝经后患者外,与肿瘤大小、病理类型、孕激素受体、腋窝淋巴结转移、Ki67、C-erbB-2表达均无显著相关。结论乳腺癌组织中HIF-1α表达可能参与了ER表达下调的机制。     

妊娠期糖尿病孕妇胎盘中HIF-1α、ET-1及VEGF的表达及与妊娠结局的关系研究

目的:探讨妊娠期糖尿病孕妇胎盘中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、内皮素-1(ET-1)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达及与妊娠结局的关系。方法:选取2015年8月至2016年10月间济南市中心医院收治的妊娠期糖尿病患者80例。根据患者血糖控制效果分为血糖控制不良组(A组)40例和血糖控制良好组(B组)40例,另取同期于我院体检的健康孕妇40例为C组。应用免疫组化SP法检测各组胎盘中HIF-1α、ET-1及VEGF的表达情况,观察各组不良妊娠结局发生情况,并分析妊娠期糖尿病孕妇胎盘中HIF-1α、ET-1及VEGF的表达与妊娠结局相关性。结果:A组孕妇胎盘中HIF-1α、ET-1及VEGF的阳性表达率均高于B组与C组,B组HIF-1α、VEGF的阳性表达率高于C组(P0.05)。A组羊水过多、巨大儿、产后出血的发生率均高于B组与C组,胎儿窘迫、妊娠高血压的发生率高于C组,B组胎儿窘迫、羊水过多、产后出血、妊娠高血压的发生率高于C组(P0.05)。经Spearman相关性分析可得,妊娠期糖尿病孕妇胎盘中HIF-1α、ET-1及VEGF的表达与妊娠高血压、产后出血、巨大儿、羊水过多、胎儿窘迫等不良妊娠结局呈正相关(P0.05)。结论:妊娠期糖尿病孕妇胎盘中HIF-1α、ET-1及VEGF呈高表达,其表达会增加不良妊娠结局的发生率。     

壳聚糖酶的克隆表达与壳寡糖的制备分析

目的:克隆壳聚糖酶基因于大肠杆菌中实现高表达,制备壳寡糖。方法:以枯草芽孢杆菌总DNA为模板扩增壳聚糖酶基因(CSN),克隆至载体pET23a(+)上,转化菌株BL21(DE3)。重组子经0.5 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE和质谱检测与鉴定重组酶。酶纯化后水解壳聚糖,薄层色谱分析其水解产物。结果:质谱证明壳聚糖酶(31.5kDa)成功表达,表达量占菌体总蛋白的45%左右。纯化后重组酶浓度为900 mg/L,纯度95%、回收率85%,酶活力为10 000 U/mg。壳聚糖降解产物为壳二糖至壳四糖。结论:原核表达载体pET23a(+)-CSN构建正确,壳聚糖酶表达量与活性高,适用于水解壳聚糖制备壳寡糖。     

国内外蝗害治理技术现状与展望

本文首先概述了国内外蝗虫发生与为害的态势,总结了现阶段我国蝗虫发生与为害的主要特点:即农田飞蝗暴发频繁而且严重,草原土蝗的发生时常造成严重的经济损失,而且侵入城市干扰市民生活,我国与周边国家之间蝗虫过境迁移频繁,使用化学农药污染环境和农产品;分析了国内外蝗虫防治对策与技术的发展现状,重点介绍了应急防治和可持续治理对策、...     

颧骨颧弓骨折的分类及诊治

颧骨颧弓骨折是最常见的面中部骨折之一,迄今为止,在其分类及诊治的选择上仍然存在一定争议,本文对目前颧骨颧弓骨折的分类及诊治的现状和进展作一综述,以期对临床工作提供参考。     

Molecular characterisation of species and genotypes of Cryptosporidium and Giardia and assessment of zoonotic transmission

The molecular characterisation of species and genotypes of Cryptosporidium and Giardia is essential for accurately identifying organisms and assessing zoonotic transmission. Results of recent molecular epidemiological studies strongly suggest that zoonotic transmission plays an important role in cryptosporidiosis epidemiology. In such cases the most prevalent zoonotic species is Cryptosporidium parvum. Genotyping and subtyping data suggest that zoonotic transmission is not as prevalent in the epidemiology of giardiasis. Molecular characterisation of Cryptosporidium and Giardia is a relatively recent application that is evolving as new genes are found that increase the accuracy of identification while discovering a greater diversity of species and yet unnamed taxa within these two important genera. As molecular data accumulate, our understanding of the role of zoonotic transmission in epidemiology and clinical manifestations is becoming clearer.     

Synthesis and turnover of cerebrosides and phosphatidylserine of myelin and microsomal fractions of adult and developing rat brain.

The synthesis and turnover of cerebrosides and phospholipids was followed in microsomal and myelin fractions of developing and adult rat brains after an intracerebral injection of [U-14C]serine. The kinetics of incorporation of radioactivity into microsomal and myelin cerebrosides indicate the possibility of a precursor-product relationship between cerebrosides of these membranes. The specific radioactivity of myelin cerebrosides was corrected for the deposition of newly formed cerebrosides in myelin. Multiphasic curves were obtained for the decline in specific radioactivity of myelin and microsomal cerebrosides, suggesting different cerebroside pools in these membranes. The half-life of the fast turning-over pool of cerebrosides of myelin was 7 and 22 days for the developing and adult rat brain respectively. The half-life of the slowly turning-over pool of myelin cerebrosides was about 145 days for both groups of animals. The half-life of the rapidly turning-over microsomal cerebrosides was calculated to be 20 and 40 h for the developing and adult animals respectively. The half-life of the intermediate and slowly turning-over microsomal cerebrosides was 11 and 60 days respectively, for both groups of animals. The amount of incorporation of radioactivity into microsomal cerebrosides from L-serine was greatly decreased in the adult animals, and greater amounts of the precursor were directed towards the synthesis of phosphatidylserine. In the developing animals, considerable amounts of cerebrosides were synthesized from L-serine, besides phosphatidylserine. The time-course of incorporation indicated that a precursor-product relationship exists between microsomal and myelin phosphatidylserine. The half-life of microsomal phosphatidylserine was calculated to be about 8 h for the fast turning-over pool in both groups of animals.     

白术同源四倍体的诱导和鉴定及其与二倍体过氧化物酶的比较

以白术（Atractylodes macrooephala Koidz.）二倍体组培苗为材料,对其四倍体诱导方法进行研究,共获得45个白术同源四倍体株系,为优良株系的选育提供了材料。此外,还分析比较了其中8个白术四倍体株系与二倍体的过氧化物酶同工酶（POD）的酶谱差异,发现四倍体各株系过氧化物酶同工酶谱比二倍体的均多了Rf0.310的谱带,且总过氧化物酶比活力也发生了很大改变,对探讨白术四倍体优良株系的生理生化机理具有一定的参考价值。