苦瓜离体培养过程中内源激素含量的变化

针对苦瓜(Momordica charantia)离体培养中外植体易于产生愈伤组织而难以再生不定芽的问题,本文采用酶联免疫吸附法, 研究了苦瓜组织培养过程中不同发育阶段各外植体内源激素含量的变化, 以探讨不定芽分化与激素水平变化之间的关系, 以及苦瓜难以再生不定芽的内在制约因素。结果表明: (1)苦瓜外植体中IAA含量较高, 而iPAs含量过低, 是苦瓜易于产生愈伤组织而不定芽再生困难的主要原因;(2)不定芽的分化与IAA/iPAs的变化有密切的关系; (3)在离体培养过程中, 保持外源细胞分裂素类物质(如ZT)的适当浓度并及时继代, 有利于苦瓜不定芽的分化。     

细枝木麻黄离体培养过程中愈伤组织和再生芽的细胞组织学观察

为探讨细枝木麻黄(Casuarina cunninghamianaMiq.)愈伤组织分化过程的细胞组织学,对离体培养条件下的愈伤组织进行扫描电子显微镜和石蜡切片观察,分析愈伤组织的细胞分裂、分化以及芽再生的发生过程。结果表明,新鲜外植体培养于愈伤组织诱导培养基上,伤口处的薄壁细胞开始脱分化,培养1周后形成明显的愈伤组织;继续培养2周后,胚性愈伤组织形成,且表层细胞启动分化形成芽原基;培养4周,可肉眼观察到胚性芽原基,数量增多并逐渐分化形成不定芽;培养至第6周,生成不定芽,并大量增殖和分化。因此,细枝木麻黄是通过愈伤组织分化形成胚状体的途径进行植株再生的,为建立细枝木麻黄组织培养高效再生体系提供了理论依据。     

外源激素对金钱松胚外植体愈伤组织的诱导及其器官发生的调节作用

金钱松胚外植体在培养过程中由于外源激素的种类和配比的不同而存在着几种发育途径：直接从胚外植体表面分化不定芽;先诱导愈伤组织,再从愈伤组织分化不定芽;还可由愈伤组织分化出胚状体。激素ＢＡ对外植体不定芽的诱导起着关键作用。激素２,４－Ｄ则诱导愈伤组织,ＢＡ与２,４－Ｄ配比恰当诱导的愈伤组织分化出体细胞胚状体。　ＬＰ’附加低浓度的ＢＡ或ＫＴ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）促进不定芽茎的伸长;　ＬＰ’附加浓度的ＩＢＡ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）诱导不定根的发生。愈伤组织在基本培养基浓度为　×ＬＰ’或１×ＬＰ’的分化培养基上不定芽诱导率相似。     

番茄离体培养过程中器官发生的细胞组织学观察

对番茄下胚轴、子叶、茎段、叶片、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察。研究结果表明番茄不同类型外植体在同样的培养条件下,愈伤组织生长表现出明显差异,其中下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动最早,生长最快,其分裂方式基本为无丝分裂,未见有丝分裂,因此我们认为以不定芽方式获得转基因植株时,植株的所有性状变化,是否纯属目的基因所为,应该反复考察,不能忽视不定芽产生过程中的种种变化;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规则的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到的正常芽的比例高于子叶的;番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

八角莲组织培养的器官发生途径研究

为探究小檗科植物八角莲组织培养的器官发生方式,该研究以八角莲离体叶片、叶柄在MS培养基上诱导产生的愈伤组织、不定芽、不定根为对象,用连续石蜡切片技术分析八角莲组织培养的器官发生途径。结果表明:八角莲愈伤组织形成的解剖学特征是靠近表皮的薄壁细胞经激素刺激恢复分裂能力,继续培养形成拟分生组织。拟分生组织可形成许多分化中心。通过对八角莲组织培养产生的不定芽细胞组织学观察发现芽原基起源于愈伤组织外侧的几层薄壁细胞,芽原基背离愈伤组织中央生长形成不定芽,故八角莲脱分化形成的芽起源方式为外起源。而八角莲的根原基起源于组织深处髓部薄壁细胞和部分维管形成层细胞,进而形成类似球形或楔形并朝韧皮部突起的根原基轮廓,根原基继续发育会突破表皮生成不定根,起源方式为内起源。八角莲离体再生途径为器官发生型,在组培苗生长过程中先诱导形成不定芽,再诱导形成不定根,在愈伤组织上形成维管组织将不定芽和不定根连接成完整植株。     

杨和苹果离体茎尖培养和愈伤组织分化与内源IAA、ABA的关系

用杨和苹果的茎尖进行离体培养,在ＭＳ培养基中添加不同浓度的ＢＡ 、ＮＡＡ 或２ ,４Ｄ,诱导（１） 茎的增殖或根的分化,（２） 愈伤组织形成以及愈伤组织分化根、芽或体胚,再生完整植株。测定了不同发育状态器官和组织的内源ＩＡＡ 和ＡＢＡ,并计算了ＩＡＡ／ＡＢＡ 的比值。培养物中其比值较高者,易于诱导不定根分化或形成胚性的愈伤组织,也是木本植物离体培养幼化程度较高的例证。在试管内培养时,杨比苹果培养物易于幼化,因而器官分化、愈伤组织形成和分化、再生完整植株较容易,在ＭＳ 培养基中添加的外源ＢＡ、ＮＡＡ 和２ ,４Ｄ 的浓度也较低。     

杨和苹果离体茎尖培养和愈伤组织分化与内源IAA,ABA的关系

用杨和苹果的茎尖进行离体培养,在ＭＳ培养基中添加不同浓度的ＢＡ,ＮＡＡ或２,４－Ｄ,诱导（１）茎的增殖或根的分化,（２）愈伤组织形成以及愈伤组织分化根,芽或体胚,再生完整植株。测定了不同发育状态器官和组织的内源ＩＡＡ和ＡＢＡ,并计算了ＩＡＡ／ＡＢＡ的比值。培养物中其比值较高者,易于诱导不定根分化或形成胚性的愈伤组织,也是木本植物离体培养幼化程序较高的例证。     

硝酸银对离体培养烟草叶片愈伤组织形成和芽再生及其脯氨酸和丙二醛含量的影响(简报)

培养基中添加不同浓度硝酸银离体培养烟草叶片的结果表明,1～5mg·L-1硝酸银可提高烟草愈伤组织的芽分化率,5 mg·L-1硝酸银对芽再生的促进作用最佳,而高于10mg·L-1的硝酸银抑制愈伤组织的形成和芽再生.在愈伤组织和再生芽中,脯氨酸和丙二醛含量均随硝酸银浓度的增加而增加.     

番茄离体培养过程中器官发生的细胞组织观察

对番茄下胚轴、子叶、茎段、叶片、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察。研究结果表明：番茄不同类型外植体在同样的培养条件下,愈伤组织生长表现出明显差异,其中下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动最早,生长最快,其分裂方式基本为无丝分裂,未见有丝分裂,因此我们认为以不定芽方式获得转基因植株时,植株的所有性状变化,是否纯属目的基因所为,应该反复考察,不能忽视不定芽产生过程中的种种变化;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规则的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到的正常芽的比例高于子叶的;蕃茴离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

白头翁花茎离体培养及组织分化的研究

对白头翁(Pulsatilla chinensis)花茎不同部位的切段分别进行了培养,在MS+6-BA1ppm+2,4-D0.1ppm的培养基上,诱导愈伤组织频率最高的可达90.4％,分化芽的频率最高的可达23.8％;花茎不同部位切段的反应基本相同。细胞组织学研究表明,由外植体皮层细胞、韧皮部细胞及维管束周围细胞均可脱分化启动产生愈伤组织。在外植体培养一月后,由愈伤组织表层细胞形成不定芽或由愈伤组织形成类似叶状体的圆柱状结构,再由其表层分化出不定芽。     

Rapid in vitro propagation of Aloe barbadensis Mill

Axillary bud development and adventitious bud formation was obtained with decapitated shoot explants of Aloe barbadensis Mill. Maximal bud growth and rooting of shoots was obtained on a modified medium of Murashige and Skoog supplemented with 5 M IBA. More adventitious and axillary buds developed on nutrient media supplemented with IBA than with NAA. Axillary buds but not adventitious buds developed with IAA in the medium. Morphogenesis was inhibited by 2,4-D. Kinetin, benzyladenine and thidiazuron were toxic to the explants and did not stimulate the development of axillary of adventitious buds. The optimal temperature for bud growth and development was 25°C. Axillary bud growth and the formation of adventitious buds was slowed down at 10°C and totally inhibited by 30°C. The optimal sucrose concentration was 3% with the inhibition of bud growth and development by higher sucrose levels.     

雷公藤离体快繁过程中内源激素水平的变化

对雷公藤Tripterygium wilfordii组培苗各生长发育阶段的内源激素变化进行研究。结果表明,在芽诱导过程中,培养7～14 d是芽诱导的关键性阶段,ZT含量呈上升趋势,在培养28～35 d时,ABA含量转为上升,芽体生长进入缓慢抑制阶段;在芽继代增殖过程中,GA3含量升高,ABA含量降低,GA3/IAA比值高及ABA/IAA比值低利于雷公藤芽体分化增殖;在壮苗培养过程中,IAA、GA3含量上升,但两者浓度过高或过低均不利于生长;生根培养第7 天,雷公藤根系开始生成,IAA含量达到一峰值,在生根初期,低比值ZT/IAA及高比值GA3/ABA利于雷公藤生根培养。     

棉花花芽分化时期茎尖内源激素的变化

实验结果表明,从子叶展平后到肉眼可花芽（现蕾）,所测几种激素（ABA、IAA、GA3、iPA、ZR）的含量均表现出明显的动态变化,而且在花芽分化临界期表现出最显著的变化（出现高峰或出现低峰）。推测所测几种激素均与花芽分化有密切关系。其中ABA、GA3和CTK（iPA、ZR）在花芽分化临界期时,其含量变化均呈现出一个高峰;而IAA则在花芽分化临界期时出现一个低峰。经比较分析得知,随着花芽分化的进行,ABA/IAA、GA3／IAA、CTK／IAA均表现一个较明显的变化规律。即从子叶展平时起,其比值开始上升,到花芽开始分化时达到一个峰值,之后逐渐下降,并维持在一个较稳定的水平。显然,ABA／IAA、GA3／IAA、CTK／IAA在棉花的花芽分化过程中起着重要的调控作用。由此推测,增加植物体内的ABA、GA3、CTK的含量或降低IAA的含量,都可以促进棉花的花芽分化;反之则抑制棉花的花芽分化。     

Effects of IAA, Zeatin, Ammonium Nitrate and Sucrose on the Initiation and Development of Floral Buds in Torenia Stem Segments Cultured In Vitro

In Torenia stem segments cultured on a defined medium from whichammonium nitrate and growth regulators were omitted, adventitiousbuds were readily formed from epidermal tissue, with subsequentdifferentiation of floral buds. Using this plant material, thecorrelation between the time of application of various chemicalsand the time-course of floral bud differentiation was investigated.Histological examination showed that adventitious buds werevegetative during the first two weeks of the culture, and floralprimordia appeared after about three to four weeks of culture.We divided the flowering process in Torenia stem segments intothe following 3 phases: the first phase (first 2 weeks) duringwhich adventitious buds are formed, the second phase (3rd and4th weeks) during which floral buds are initiated and the thirdphase (5th to 12th weeks) during which floral buds develop.Then we added IAA, zeatin, ammonium nitrate or a high concentrationof sucrose to the medium during one, two or three of these phases.Ammonium nitrate added during the third phase suppressed floralbud development, but the high concentration of sucrose givenduring this phase stimulated it. These two chemicals influencedonly the development of floral buds previously initiated. Theapplication of IAA during the first phase promoted both theinitiation and development of floral buds. However, its applicationafter 2 weeks of culture failed to promote floral bud formation.Zeatin inhibited floral bud formation in a manner similar toammonium nitrate, but if it was added to the medium only duringthe first phase, it slightly promoted the initiation and developmentof floral buds. (Received July 7, 1981; Accepted October 12, 1981)     

植物激素对空心泡叶片不定芽形成的影响

空心泡是蔷薇科悬钩子属植物,属小果类果树,其聚合果肉质多浆,芳香,果味酸甜。空心泡目前尚处于野生状态,是一种很有利用前景的植物。有关悬钩子属植物组织培养已有许多报道,所有这些工作都     

油菜生长发育期间内源激素含量的变化

初花期至盛花期华双3号、华杂4号、恢5900等3个品种花蕾的iPAs含量呈明显上升趋势,而秦油2号则刚好相反(表2)。对双低品种华双3号功能叶的研究表明：苗期至盛花期IAA含量始终最高,其后依次是GA1 3;、iPAs、ABA。功能叶IAA的含量在越冬期处于整个生育期的最低水平,蕾薹期达到高峰,随后下降：GA1 3和iPAs含量随生育进程逐渐升高,并在初花期达到峰值;ABA在苗期及抽薹后一直处于很低水平,但在越冬期达到最高值(图1、2)。蕾薹期IAA主要分布在幼嫩和正在生长的器官中并起重要作用,而在功能叶中相对要少;幼叶GA1 3和iPAs含量最高,功能叶其次,花蕾最低(表1)。角果皮与籽粒的内源激素含量差异极显著,在开花后第39天,籽粒中IAA、GA1 3;、iPAs的含量大大超过角果皮(表3)。结果 表明iPAs在促进籽粒的充实饱满、物质积累转化方面发挥重要作用。     

罗汉果花芽分化过程中形态及其激素水平变化特征

采用石蜡切片和酶联免疫法(ELISA)对罗汉果雄性、雌性、两性花芽分化过程的形态和激素水平变化进行观测,为罗汉果开花调控和品种选育提供科学依据。结果表明:(1)罗汉果雄性、雌性、两性花的花芽分化过程均可分为花芽未分化期、花芽分化初期、花序分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期和雌蕊原基分化期7个阶段。雄蕊原基分化期前,3种花芽分化过程无明显差异,各时期形态特征均依次为:茎端呈圆锥状(花芽未分化期)→茎端经半球形变成扁平状(花芽分化初期)→距茎端5~7节位处分化出穗状花序(花序分化期)→小花原基周围形成5个萼片原基(萼片原基分化期)→萼片原基内侧形成5个花瓣原基(花瓣原基分化期)。雄蕊和雌蕊原基分化期,3种花芽分化过程存在明显差异,雄蕊原基内侧出现雌蕊原基后,雄花芽雄蕊原基继续发育成雄蕊,雌蕊原基停滞生长,退为一个小突起;雌花芽雌蕊原基继续发育成雌蕊,雄蕊原基生长缓慢,退化为小花丝;两性花芽雌蕊和雄蕊原基均继续发育,形成外观正常的雌蕊和雄蕊。(2)内源激素脱落酸(ABA)、赤霉素(GAs)和玉米素核苷(ZR)含量在3种花芽分化过程中变化规律相似,即ABA含量在花芽生理分化期降低,花芽形态分化期升高,而GAs和ZR含量则基本保持不变;吲哚乙酸(IAA)含量在3种花芽分化过程中变化存在明显差异,雌花芽IAA含量在花芽生理分化期升高,花芽形态分化期逐渐降低,而雄性和两性花芽的IAA含量则基本保持不变。ABA/GAs、ABA/IAA、ZR/IAA和ZR/GAs激素含量比值在3种花芽分化过程中变化规律相似,ABA/GAs在花芽生理分化期降低,花芽形态分化期升高,而BA/IAA、ZR/IAA和ZR/GAs则基本保持不变。研究认为,罗汉果花芽分化过程经历一个"两性期",高ABA含量和ABA/GAs比值有利于罗汉果花芽分化,IAA可能对罗汉果花性分化具有重要作用。     

Plant regeneration via adventitious bud formation from cotyledon explants of Panax ginseng C. A. Meyer

Cotyledon explants of ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) produced somatic embryos directly on medium without growth regulators, with 89% of the explants forming somatic embryos. Cytokinin treatment greatly suppressed somatic embryo formation but stimulated the direct formation of adventitious buds. BAP treatment was more effective than the kinetin treatment for adventitious bud formation. Auxin (0.05 mg/l IBA) in combination with cytokinin enhanced adventitious bud formation, with the highest frequency, 40%, at 0.05 mg/l IBA and 5 mg/l BAP. Adventitious buds were mainly formed near the distal portion of the cotyledons, while somatic embryos were formed near the proximal excised margins. Shoots were developed from adventitious buds after transfer to MS medium with 10 mg/l GA₃. Root formation from the shoots was obtained after the shoots were transferred to half-strength MS medium with auxin (IAA). When the plants derived from adventitious buds were transferred to greenhouse soil, 36% were successfully acclimatized. Received: 7 November 1997 / Revision received: 12 January 1998 / Accepted: 7 February 1998     

金塔柏扦插不定根形成与内源激素的调控研究

金塔柏（Platycladus orientalis ‘Beverleyensis’）是重要的观赏树种。生长素（IAA）、玉米素（ZT）、脱落酸（ABA）和茉莉酸（JA）在金塔柏扦插不定根再生过程中起着重要的调控作用,但不同发育阶段内源激素的动态变化及其对不定根发生的影响仍不清楚。以金塔柏半木质化枝条为材料,采用连续组织切片技术观察了不定根发生过程,利用高效液相色谱串联质谱法检测了4种内源激素含量的动态变化。结果表明,金塔柏不定根原基起源于愈伤组织、髓射线、木质部、维管形成层、次生韧皮部、皮层、髓射线与形成层交界处等部位,属于多位点发生模式和多类型生根方式。在不定根形成过程中,随着愈伤组织的形成,IAA和ZT含量下降,ABA和JA含量升高;随着根原基的分化,IAA和ZT含量缓慢升高,ABA和JA含量下降;随着不定根形成与伸长,IAA、ZT、JA逐渐升高,ABA维持在低水平。激素平衡分析发现,IAA/ABA比值和IAA/JA比值下降、IAA/ZT比值上升利于愈伤组织的形成,反之利于根原基的诱导分化,而IAA/ABA比值升高,IAA/ZT和IAA/JA维持在较低水平利于不定根形成与伸长。研究结果为揭示不同内源激素对金塔柏扦插不定根再生的调节作用提供了依据。