可乐宁与生长抑素在预防链佐霉素诱导的小鼠高血糖中的相互增强作用

本实验采用小剂量多次腹腔注射链佐霉素(Streptozotocin,STZ)选择性地破坏胰岛β细胞的方法造成高血糖的小鼠动物模型,观察α_2-肾上腺素能受体激动剂可乐宁(Clonidine)与胃肠激素生长抑素(Somatostatin,SS)在预防STZ诱导的高血糖作用中的相互关系。结果如下:(1)接受STZ处理后,小鼠在实验的第6、8、10、15天,血糖均有明显升高;(2)在每次注射STZ前注射可乐宁或SS,均可减轻STZ诱导的高血糖,(8)将可乐宁和SS合并作预防牲注射,对STZ高血糖的抑制作用大大加强,在实验的第15天,联合用药降低高血糖的作用大于两种药单独注射效果的代数和。本工作提示,某些神经因素和体液因素在预防由STZ诱导的高血糖产生中具有相互加强作用,从而为寻找减少激素用量,经济、有效的防治糖尿病方法提供了一定的线索。     

四种胃肠激素对链佐霉素诱发的小鼠高血糖的影响

本实验用腹腔注射链佐霉素(Streptozotocin简称STZ)方法破坏小鼠胰岛B细胞以诱发高血糖,观察生长抑素(Somatostatin,SS)、神经降压素(neurotensin,NT)、胰高血糖素(glucagon,GC)和促甲状腺素释放激素(TRH)4种胃肠激素对小鼠高血糖的影响。在每天腹腔注射STZ(60mg/kg)前10分钟分别经皮下注射上述4种胃肠激素,连续注射5天,在实验的第1,6,8,10,15天取血测血清葡萄糖浓度,对照组注射生理盐水(NS)。结果发现:(1)预先注射SS和NT可不同程度地抑制由STZ引起的实验性高血糖,并呈剂量一效应关系,(2)预先注射GC和TRH,血糖浓度仍明显升高,与NS对照组比较无显著差异,(3)取注射STZ后第15天的高血糖小鼠(血糖高于350mg％者)分为8组,分别以SS和NT作治疗性注射,每天一次共5日,并未见对小鼠高血糖有缓解效果;(4)正常小鼠单独皮下注射NS、SS、NT、GC、和TRH,每天一次连续5天,在注射后15天内未见对血糖水平有明显影响。以上结果提示:预防性注射SS和NT可显著抑制由STZ诱发的高血糖的产生。     

外源性及内源性生长抑素对链佐霉素糖尿病小鼠血清胰岛素的作用

已经证明用链佐霉素(简称 STZ)可诱发小鼠产生低胰岛素糖尿病,本工作用外源性注射生长抑素(简称 SS)和用半胱胺特异性耗竭内源性 SS 的方法,观察 SS 对 STZ 糖尿病小鼠血清胰岛素的影响。在注射 STZ(60mg/kg,ip)前10min 分别皮下注射 1μg/kg,5μg/kg,10μg/kg 的 SS 可预防 STZ 诱发的血清低胰岛素作用,并呈剂量-效应关系。注射半胱胺(300mg/kg,SC)24h 后再连续5d 皮下注射半量半胱胺维持,胰腺组织匀浆中的 SS 含量经放免测定鉴定已基本被耗竭。在实验的第7,9,11,16d 胰腺 SS 含量仍然维持在比对照组为低的水平,给这种小鼠注射 STZ,其血清胰岛素降低程度比仅接受 STZ 小鼠的大,此外,给耗竭胰腺内 SS的小鼠注射不足以引起高血糖的 STZ 也引起了血糖大大升高。以上结果表明,不仅外源性 SS有预防链佐霉素诱发的小鼠低血清胰岛素发生的作用,胰腺组织中的内源性 SS 也可能是一个对胰岛 B 细胞起保护作用的因素。     

磁场对急性胃损伤的治疗效应及其机制的实验研究

目的:探讨腹部磁场作用,对大鼠血液及胃粘膜组织中胃泌素(gastrin,GAS)、胃动素(motilin,MTL)和生长抑素(somatostain,SS),以及胃排空的效应。方法:10只Wistar健康雄性大鼠,腹部接受表面磁强度为1300-1600GS,钡铁氧体恒磁场作用3小时,以放射免疫法,分别测定大鼠血及胃粘膜组织中GAS、MLT及SS含量,用99mTc标记的碳粉糊剂灌胃法,测试胃排空率。结果:恒磁场腹部作用后,大鼠血GAS、MLT及SS水平较对照组,均无显著变化(p均>0.05);胃粘膜组织中,GAS含量无明显改变(p>0.05),MLT水平明显升高(p<0.01),SS水平明显降低(p<0.01);胃排空率无明显改变(p>0.05)。结论:腹部1300-1600GS恒磁场作用3小时,均不能显著调节大鼠血中MLT和SS,以及血和胃粘膜组织内GAS水平;可明显影响胃粘膜内MLT及SS水平;对大鼠胃排空率无明显效应。     

柴半六合汤对慢性肾衰竭模型大鼠血清胃泌素、胃动素及生长抑素的影响(英文)

目的:观察柴半六合汤对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠血清胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、生长抑素(SS)水平的影响,探讨其作用机制。方法:采用5/6肾切除的方法复制CRF大鼠模型,设立假手术组、模型组、柴半六合汤高剂量组、低剂量组、尿毒清对照组,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)及生长抑素(SS),取胃粘膜行HE染色,光镜下观察其组织病理变化。结果:用药各组大鼠治疗后Scr、BUN低于模型组;柴半六合汤高剂量组大鼠Scr、BUN、GAS、MTL低于低剂量组、SS高于低剂量组;柴半六合汤高、低剂量组大鼠GAS、MTL低于尿毒清对照组、SS高于尿毒清对照组。结论:柴半六合汤通过降低CRF模型大鼠GAS、MTL水平、SS升高水平,改善胃肠道症状。     

生长抑素可预防链佐霉素诱发的大鼠胰岛 B 细胞分泌功能的损伤

本工作通过测定大鼠血清、胰腺灌流液以及肤腺组织中胰岛素含量,观察生长抑素(SS)对链佐霉素(STZ)诱发的实验性糖尿病的作用。结果如下:皮下注射生理盐水后10min,再向腹腔注射链佐霉素(35mg/kg),24h 后大鼠血清胰岛素浓度明显降低。胰腺组织匀浆中的胰岛素含量也明显减少。如若在注射链佐霉素前10min 皮下注射生长抑素,则可有效地防止上述两项指标的改变,(NS STZ)和(SS STZ)两组之间具有显著差异。单独注射生长抑素,24h 后血清胰岛素及胰腺组织中胰岛素含量与正常对照无明显差异。用分离的大鼠胰腺作体外灌流,观察到:NS STZ 组大鼠灌流胰腺对19.7mmol/L 的高浓度葡萄糖刺激无胰岛素释放反应,而 SS STZ 组大鼠的胰腺对高浓度葡萄糖有反应性,刺激后出现胰岛素分泌峰。上述结果表明,SS(30μg/kg)预防性注射可以防止 STZ 引起的胰岛 B 细胞分泌功能的障碍。     

磁场对血浆和胃粘膜内胃肠激素及胃动力效应的实验研究

目的：探讨腹部磁场作用,对大鼠血液及胃粘膜组织中胃泌素（gastrin,GAS）、胃动素（motilin,MTL）和生长抑素（somatostain,SS）,以及胃排空的效应.方法：10只Wistar健康雄性大鼠,腹部接受表面磁强度为1300-1600GS,钡铁氧体恒磁场作用3小时,以放射免疫法,分别测定大鼠血及胃粘膜组织中GAS、MLT及SS含量,用99mTc标记的碳粉糊剂灌胃法,测试胃排空率.结果：恒磁场腹部作用后,大鼠血GAS、MLT及SS水平较对照组,均无显著变化（p均〉0.05）;胃粘膜组织中,GAS含量无明显改变（p〉0.05）,MLT水平明显升高（p〈0.01）,SS水平明显降低（p〈0.01）;胃排空率无明显改变（p〉0.05）.结论：腹部1300-1600GS恒磁场作用3小时,均不能显著调节大鼠血中MLT和SS,以及血和胃粘膜组织内GAS水平;可明显影响胃粘膜内MLT及SS水平;对大鼠胃排空率无明显效应.     

大鼠肝郁证胃肠运动功能障碍动物模型的建立

目的 通过运用模具加水浴方法制备肝气郁结证候动物模型.方法 将大鼠分为空白对照组、模型组、自复组、反证组4组.运用模具加水浴方法造成大鼠肝郁证胃肠运动功能障碍动物模型.测量各组动物的体重、腹围、自发活动、智力、胃和小肠运动功能变化,观察胃肠组织形态学变化,测定血浆胃动素(MTL)、胃泌素(Gas)、生长抑素(SS)、血管活性肠肽(VIP)指标研究肝郁证大鼠胃肠激素的变化.结果 模型组大鼠体重增加减慢,腹围指数变大,自发活动减少,智力下降;胃残留率增加、小肠推进率减慢;Gas、MTL和VIP的含量降低,SS的含量升高.用四逆散治疗后上述指标恢复正常.结论 用模具加水浴方法制备肝郁证动物模型接近中医肝气郁结证的发病学因素,其模型的情志改变呈现肝郁证典型的临床特点.     

G蛋白偶联受体119——治疗糖尿病的新靶点

G蛋白偶联受体119(GPR119)与激动剂结合后,通过cAMP信号转导途径,促进葡萄糖依赖性胰岛素和肠肽激素的分泌,是新一代的治疗2型糖尿病药物靶点。本文对GPR119的组织学分布、生理学作用、内源性配体以及小分子激动剂作一简要的介绍。     

截叶铁扫帚水部位促胃肠动力作用的研究

研究截叶铁扫帚水部位及其各洗脱组分的动物体内外促胃肠动力作用。采用半固体营养糊法测定了截叶铁扫帚水部位及其各洗脱组分ig给药后小鼠的胃内残留率、小肠推进率,另外检测了水部位20%乙醇洗脱组分灌胃后小鼠血清MTL、Ghrelin和VIP的水平;离体实验测定了截叶铁扫帚水部位及其各洗脱组分对豚鼠胃底、胃体及胃窦和家兔空肠平滑肌的收缩性,以及水部位20%乙醇洗脱组分对阿托品、去甲肾上腺素及异丙肾上腺素预先处理的空肠平滑肌的收缩性。结果表明:与模型组比较,截叶铁扫帚水部位及其20%乙醇洗脱组分显著降低小鼠胃内残留率,明显提高小肠推进率,并且明显升高小鼠血清MTL、Ghrelin水平,明显降低小鼠血清VIP水平;离体实验发现截叶铁扫帚水部位及其20%乙醇洗脱组分显著增大豚鼠胃底、胃窦环行肌和胃体纵行肌收缩波幅度和频率、家兔空肠平滑肌收缩幅度和活动力,阿托品对截叶铁扫帚水部位20%乙醇洗脱组分所致的离体空肠平滑肌收缩作用无影响,而异丙肾上腺素明显对抗水部位20%乙醇洗脱组分收缩空肠平滑肌的作用,去甲肾上腺素也有一定拮抗作用。结果显示,截叶铁扫帚水部位具有明显促胃肠运动的作用,且其促胃肠运动作用的活性组分是20%乙醇洗脱组分,其活性成分很可能是酚酸类含有酚羟基、羧基等极性基团的化学成分;其促胃肠运动机制可能与促进MTL、Ghrelin的分泌和减少VIP分泌,以及抑制胃肠β、α肾上腺素能通路有关。     

马来酸曲美布汀联合莫沙必利对功能性消化不良患者胃电图参数、肠道菌群和血清NPSR-1、CGRP、MTL、GAS的影响

摘要 目的：观察马来酸曲美布汀联合莫沙必利对功能性消化不良（FD）患者胃电图参数、肠道菌群和血清神经肽S受体-1（NPSR-1）、降钙素基因相关肽（CGRP）、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)的影响。方法：选取2019年8月~2021年6月期间我院收治的FD患者100例,根据信封抽签法分为对照组（莫沙必利治疗,n=50）和观察组（马来酸曲美布汀联合莫沙必利治疗,n=50）。对比两组疗效、胃电图参数、肠道菌群变化情况和血清NPSR-1、CGRP、MTL、GAS水平,记录两组不良反应发生率。结果：观察组的临床总有效率高于对照组（P<0.05）。治疗后,两组空腹及餐后正常慢波百分比均较治疗前升高,胃电频率、胃电紊乱节律百分比均较治疗前下降,且观察组的变化幅度更大（P<0.05）。治疗后,两组肠杆菌、肠球菌、酵母菌数量较治疗前下降,且观察组的下降幅度更明显（P<0.05）。治疗后,两组血清CGRP水平较治疗前下降,NPSR-1、MTL、GAS水平较治疗前升高,且观察组的变化幅度更大（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比差异无统计学意义（P>0.05）。结论：马来酸曲美布汀联合莫沙必利治疗FD患者,可有效改善胃电图参数和肠道菌群分布,调节其血清NPSR-1、CGRP、MTL、GAS水平,安全有效。     

GPR81激动剂对非酒精性脂肪肝病大鼠胰岛素抵抗的影响

目的: 探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠胰岛素抵抗的影响及乳酸受体G蛋白偶联受体81(GPR81)激动剂的干预作用。方法: 选择清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为3组,对照组、NAFLD组、GPR81激动剂组,每组10只。用高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝模型;GPR81激动剂组:在非酒精性脂肪肝模型基础上腹腔注射GPR81特异性乳酸激动剂(50 nmol/L),每周1次,其余两组注射等量的生理盐水,共12周。测定肝生化指标、空腹血糖及胰岛素和肝匀浆中炎症因子的含量,观察各组肝组织病理学形态;Western blot检测肝组织中NLRP3、含CARD结构域的凋亡相关斑点蛋白(ASC)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物酪氨酸磷酸化(Tyr⁴⁶⁵-IRS-1)、胰岛素受体底物丝氨酸磷酸化(Ser⁶³⁶-IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的蛋白表达;qRT-PCR法检测肝组织NLRP3、ASC、caspase-1、IRS-1、GLUT4 mRNA表达水平。结果: 与对照组相比,NAFLD组大鼠血清肝生化指标甘油三酯(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)值均显著升高(P＜0.05);肝组织病理学形态结果表明,NAFLD组大鼠肝组织可见明显的肝脂肪变性,肝细胞有脂肪滴,存在明显的炎性细胞浸润,且NAFLD组肝组织NLRP3、ASC、caspase-1的mRNA和蛋白表达及Ser⁶³⁶-IRS-1的蛋白表达均显著升高,且肝组织及血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)的含量升高;而IRS-1、GLUT4 的mRNA和蛋白表达Tyr⁴⁶⁵-IRS-1的蛋白表达显著降低(P＜0.05);与NAFLD组相比,GPR81激动剂组上述指标均得到明显改善。结论: NLRP3信号通路活化介导炎症因子产生促进了NAFLD的发生发展,GPR81激动剂可能成为NAFLD潜在的治疗手段。     

胃溃疡患者血清多肽类激素及胃粘膜中单胺类神经递质的水平及其临床意义

目的:分析胃溃疡患者血清多肽类激素及单胺类神经递质的水平变化及其临床意义。方法:选取2014年8月-2015年8月在我院经胃镜检查确诊为胃溃疡的患者103例作为研究组,另选取54例健康志愿者作为对照组。检测两组血清中胃动素(MTL)、肾上腺髓质素(AM)、胃肠激素胃泌素(Gas)、生长抑素(SS)及降钙素基因相关肽水平(CGRP),以及胃黏膜中血管活性肠肽(VIP)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、P物质(SP)水平。结果:胃溃疡患者血清Gas,AM及MTL明显高于对照组,而SS及CGRP明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。胃溃疡活动期患者血清Gas,AM及MTL明显高于愈合期及瘢痕期患者,而SS及CGRP低于愈合期及瘢痕期患者,差异具有统计学意义(P0.05);胃溃疡愈合期患者血清Gas,AM及MTL高于瘢痕期患者,而SS及CGRP低于瘢痕期患者,差异具有统计学意义(P0.05)。胃溃疡患者胃粘膜内5-HT,SP及NE明显低于对照组,而VIP明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。胃溃疡活动期患者胃粘膜5-HT,SP及NE明显低于愈合期及瘢痕期患者,而VIP明显高于愈合期及瘢痕期患者,差异具有统计学意义(P0.05);胃溃疡愈合期患者胃粘膜5-HT,SP及NE明显低于瘢痕期患者,而VIP明显高于瘢痕期患者,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:胃溃疡患者血清多肽类激素及胃黏膜中单胺类神经递质的水平变化与疾病进展密切相关,对胃溃疡的诊断及疗效评价具有指导意义。     

GLP-2对小鼠小肠黏膜的作用及不同脏器分布的影响

目的：观察胰高血糖素样肽-2对小鼠小肠黏膜的作用效果及其受体在不同脏器的分布和表达。方法：选用5-6周龄的雄性健康BALB/C小鼠,体重17～20g。随机分为3组。对照组8只;脑内注射GLP-2组9只,每天按25μg/kg脑内注射GLP-2液2次,连续3天;腹腔注射GLP-2组9只,每天按250μg/kg腹腔注射GLP-2液2次,连续3天。3天后,处死小鼠,做组织切片进行HE染色,观察小鼠小肠黏膜的组织学变化,用免疫组化方法检测GLP-2R在不同脏器的表达和分布。结果：小鼠经腹腔注射GLP-2后,小肠不同肠段黏膜的绒毛高度较对照组明显增加（P〈0.05）,脑内注射组的肠黏膜无明显形态学变化;GLP-2R在小鼠胃、空肠与结肠部位均有表达,而食管与肝显阴性;腹腔注射组的GLP-2R表达较对照组显著下调（P〈0.05）。结论：GLP-2能刺激小肠黏膜上皮增厚,增加小肠不同肠段黏膜的绒毛高度;小鼠的胃、空肠与结肠经GLP-2（腹腔注射）处理后其受体表达下调。     

表达人TCRα转基因小鼠1型糖尿病模型的建立及其免疫机制的初步研究

目的建立T细胞介导的1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)动物模型,为进一步研究该病发病免疫机理奠定基础。方法将雌雄各10只系统表达人T细胞受体α基因(T cell receptor,TCRα)小鼠随机分为模型组和对照组,其中模型组小鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)每次100 mg/(kg·bw),间隔1 d后再注射一次,对照组注射等量的生理盐水;注射后每周测定一次血糖和体重,当出现重度糖尿病临床表现时处死,其余小鼠注射后8周处死,观察胰腺组织病理学改变,并进行外周血淋巴细胞亚群,以及血清胰岛素和细胞因子的测定。结果模型组小鼠发病率为10/10,对照组为0/10;模型组外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平较对照组均有显著降低(P<0.01),B细胞表型CD19+水平与对照组差异无显著性(P>0.05);注射STZ后约8周,模型组血清胰岛素、IFN-γ、TNF-β较对照组差异有显著性(P<0.01),IL-2高于对照组但差异无显著性(P>0.05)。结论在系统表达人TCRα基因小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后2～8周可建立稳定1型糖尿病的小鼠模型。     

生长激素释放肽-6对小鼠下丘脑摄食相关核团c-fos表达时间依从性影响北大核心CSCD

本研究旨在探讨外周注射ghrelin受体激动剂生长激素释放肽-6(growth hormone releasing peptide-6,GHRP-6)对NMRI小鼠摄食的影响以及摄食相关核团(弓状核、视上核和室旁核)的激活情况及其有效作用时间。腹腔注射GHRP-6 1,3,6 h后观察小鼠累计摄食量,同时用免疫组织化学方法检测GHRP-6对自由饮食小鼠和禁食小鼠下丘脑摄食相关核团c-fos表达影响,并观察GHRP-6作用的时间依从性。结果显示,腹腔注射了GHRP-6的小鼠摄食量明显大于生理盐水注射鼠,且在注射后3 h时观察到的摄食量的增加尤为显著,但注射后6 h内总的累计摄食量无显著变化;同时,GHRP-6能够在不依赖于摄食的情况下促进弓状核和室旁核中c-fos的表达,且c-fos的表达在注射后1 h时达到峰值,随后逐渐下降。以上结果提示,外源性注入GHRP-6可显著增加动物在给药后1、3 h的累积摄食量,该作用至少部分是通过上调弓状核和室旁核中的c-fos蛋白表达起作用的,而且具有时间依从性。本研究结果可为临床ghrelin受体激动剂的使用间隔提供理论依据。     

生长激素释放肽-6对小鼠下丘脑摄食相关核团c-fos表达时间依从性影响

本研究旨在探讨外周注射ghrelin受体激动剂生长激素释放肽-6(growth hormone releasing peptide-6,GHRP-6)对NMRI小鼠摄食的影响以及摄食相关核团(弓状核、视上核和室旁核)的激活情况及其有效作用时间。腹腔注射GHRP-6 1,3,6 h后观察小鼠累计摄食量,同时用免疫组织化学方法检测GHRP-6对自由饮食小鼠和禁食小鼠下丘脑摄食相关核团c-fos表达影响,并观察GHRP-6作用的时间依从性。结果显示,腹腔注射了GHRP-6的小鼠摄食量明显大于生理盐水注射鼠,且在注射后3 h时观察到的摄食量的增加尤为显著,但注射后6 h内总的累计摄食量无显著变化;同时,GHRP-6能够在不依赖于摄食的情况下促进弓状核和室旁核中c-fos的表达,且c-fos的表达在注射后1 h时达到峰值,随后逐渐下降。以上结果提示,外源性注入GHRP-6可显著增加动物在给药后1、3 h的累积摄食量,该作用至少部分是通过上调弓状核和室旁核中的c-fos蛋白表达起作用的,而且具有时间依从性。本研究结果可为临床ghrelin受体激动剂的使用间隔提供理论依据。     

链脲佐菌素诱导糖尿病肺纤维化小鼠模型的建立与评价

目的 探究链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导糖尿病肺纤维化(diabetic pulmonary fibrosis, DPF)小鼠模型的建立方法,为临床研究提供稳定的DPF动物模型。方法 将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组：正常对照组(NG,n=20)、糖尿病肺纤维化1组(DPF1,n=20)、糖尿病肺纤维化2组(DPF2,n=20)。隔夜禁食不禁水后测定小鼠空腹血糖和体重,随后DPF1组一次性腹腔注射大剂量STZ(150 mg/kg),DPF2组连续5 d每天腹腔注射小剂量STZ(50 mg/kg),NG组腹腔注射等量无菌柠檬酸盐缓冲液。注射完毕后,每天观察小鼠的一般情况,每周测定小鼠体重和随机血糖(random blood glucose, RBG),正常喂养16周,每4周每组随机选取5只小鼠处死取材,行病理和分子生物学检测,评估小鼠肺纤维化的程度。结果 STZ诱导后,DPF1组和DPF2组均出现“多饮、多尿、多食、体重减轻(三多一少)”的典型糖尿病症状。DPF1组和DPF2组诱导后体重增加均显著低于NG组,并于第8周后缓慢减轻(P<0.05);...     

2型糖尿病大鼠心肌损伤时心肌组织中硫氧还蛋白系统的变化

本研究旨在观察2型糖尿病大鼠心肌损伤时硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)系统在心肌组织中的活性变化,并探讨其机制。成年Sprague Dawley大鼠随机分为2组:糖尿病组给予高糖、高脂饮食,并且腹腔注射链唑霉素(streptozocin,STZ)造成大鼠2型糖尿病模型;对照组普通饲料喂养,腹腔注射柠檬酸缓冲液。在注射STZ后不同时间点,测定大鼠血糖浓度和血清胰岛素、肌酸激酶同工酶(creatine kinase MB,CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)浓度,测定心肌Trx活性、Trx还原酶(thioredoxin reductase,TR)活性和caspase-3活性,用real time PCR和Western blot测定心肌Trx1、Trx2、TR1、TR2和Trx相关蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)的mRNA和蛋白表达。结果显示,注射STZ后第1周,2型糖尿病大鼠模型建立成功;注射STZ后第2周即可诱发心肌损伤,第4周上调caspase-3活性。糖尿病组大鼠心肌Trx和TR活性在注射STZ后第2周显著降低,并随病程呈进行性下降;糖尿病组大鼠心肌Trx1、Trx2、TR1、TR2的mRNA水平均在注射STZ后第4周显著下降,而在第12周时则明显升高;Western blot结果显示糖尿病组大鼠心肌Trx、TR、TXNIP蛋白表达在注射STZ后第12周时均显著升高。以上结果表明,2型糖尿病大鼠心肌损伤时Trx和TR活性受抑,而Trx、TR的mRNA表达受到抑制后,代偿性增多,TXNIP的表达明显上调,Trx系统蛋白表达均明显上调,提示Trx系统活性下降的主要原因可能是抑制性蛋白表达升高和化学修饰。     

肌肉注射可调控胰岛素基因对糖尿病小鼠降糖作用

为研究四环素调控的胰岛素表达载体肌肉直接注射后对实验性糖尿病小鼠的降糖作用,构建了质粒prTA-tet4-rhINS.以链脲佐菌素(STZ)诱导Balb/C小鼠成糖尿病模型,300 μg质粒注射至小鼠的股部肌肉,并同时在饮水中加入不同浓度强力霉素（Dox）,监测小鼠末梢血糖、体重,测定血清人胰岛素、C肽水平.用RT-PCR检测小鼠肌肉注射部位组织中人胰岛素原mRNA水平的表达情况.结果表明：质粒prTA-tet4-rhINS注射后,给予Dox可显著降低糖尿病小鼠的血糖,血清人胰岛素、C肽水平相应升高,体重增加.效果持续大约二周.小鼠肌肉组织中有人胰岛素原mRNA表达.降糖效果和基因表达程度随Dox浓度增加而增强.质粒prTA-tet4-rhINS对STZ诱导的糖尿病小鼠高血糖起到明显的降低作用.在糖尿病小鼠肌肉组织能很好地表达,并受Dox调控.