蛋白激酶C的激活转位和它介导的信号通路

蛋白激酶Ｃ是一系列丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶家族,已发现了至少十二种同功酶。在静止细胞中,它主要以非活化形式存在于胞浆中,由受体－Ｇ蛋白耦联的ＰＬＣβ激活便裂细胞膜上的磷脂而释放ＤＡＧ;与ＰＫＣ的结合引起了ＰＫＣ的别构激活;而通过其它信号途径激活的ＰＬＤ水解胞膜的磷脂酰胆碱（ＰＣ）产生的磷脂酸经磷脂酸酯酶产生的ＤＡＧ可能是ＰＫＣ持续激活的必要条件。在体外实验中,ＰＫＣ的持续激活是一些细胞分化所必须的。蛋白激酶Ｃ的激活首先引起了它转位到膜,有时转位到核,并在转位后继续保持磷酸化活性,同时对它的下游底物进行磷酸化导致它们的活化。ＰＫＣ可活化ＲａｆＳｅｒ／Ｔｈｒ蛋白激酶及ＮＦ－ｋＢ,介导细胞对外界的反应,包括对核基因表达的调节,引起细胞生长或分化等。由于Ｒａｆ可与活化的Ｒａｓ—ＧＴＰ结合从而定位到胞膜,说明蛋白激酶Ｃ与Ｒａｓ介导的Ｒａｆ－１／ＭＥＫ／ＭＡＰＫ信号通路间存在着“对话”。     

丝裂素活化蛋白激酶参与内皮素刺激的兔主动脉平滑肌细胞增生

内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ,ＥＴ）是已知的体内活性最强的缩血管物质,其缩血管作用由Ｇ蛋白偶联受体所介导。但ＥＴ强大的促血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增生效应的机理尚未完全阐明。本研究选用培养的兔胸主动脉ＶＳＭＣ,探讨丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）在ＥＴ促细胞增生中的作用。结果表明：ＥＴ－１呈时间和浓度依赖性地促进细胞摄取￣３Ｈ－ＴｄＲ和激活ＭＡＰＫ,此作用可被蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ,ＰＫＣ）抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＰ）,Ｈ－７和ＥＴ＿Ａ受体拮抗剂ＢＱ１２３所抑制,但不被酪氨酸激酶抑制剂ＨｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ（Ｈｅｒｂ）所抑制,用ＰＫＣ激动剂ＰＭＡ（Ｐｈｏｒｂｏｌｍｙｒｉｓｔａｔｅａｃｅｔａｔｅ）预处理ＶＳＭＣ,使其ＰＫＣ活性下调,可显著减弱ＥＴ－１对ＭＡＰＫ的激活能力。本结果提示：（１）ＭＡＰＫ参与ＥＴ－１所致的ＶＳＭＣ增生;（２）ＥＴ－１促细胞增生与激活ＭＡＰＫ的作用是由ＥＴ＿Ａ受体和ＰＫＣ介导的。     

Ras蛋白与信号传导

Ｒａｓ介导的信号传导途径是近几年研究热点之一,这是因为许多细胞受体介导的信号通路和Ｒａｓ途径相关。Ｒａｓ蛋白广泛存在生物界,在信号传导途径中起着极为重要的开关作用。ＰＴＫ、Ｒａｓ、Ｒａｆ、ＭＡＰＫＫ和ＭＡＰＫ通过复杂的蛋白与蛋白之间的相互作用以及蛋白质磷酸化,将外界信号传入细胞中从而对细胞生长产生影响。本文对Ｒａｓ介导的信号传导途径的最新研究近展进行综述。     

溶血磷脂酸的信号转导途径

溶血磷脂酸（ＬＰＡ）是一种细胞间磷脂信使,它可通过Ｇ蛋白偶联受体引起多种生物学效应,如促进血小板聚集,诱导平滑肌收缩,刺激细胞增殖,抑制细胞分化等。最近研究发现Ｇ蛋白介导的ＬＰＡ信号转导途径至少有四种：（１）刺激磷胆酶Ｃ和磷脂酶Ｄ;（２）抑制腺苷酸环化酶;（３）激活Ｒａｓ及其下游的Ｒａｆ／ＭＡＰＫ途径;（４）Ｒｈｏ信号;粘着斑蛋白的酪氨酸磷酸化和肌动蛋白细胞骨架的重组。这些信号转导途径对细胞的增殖     

蛋白激酶C对鼻咽癌细胞P21~(ras)表达的影响

使用蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂与抗Ｐ２１Ｈ－ｒａｓ单抗,通过免疫细胞化学,双参数流式细胞仪等方法,探讨鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ中ＰＫＣ与Ｈ－ｒａｓ表达的关系。结果：１）Ｐ２１ｒａｓ蛋白在ＣＮＥ－２Ｚ细胞主要在胞膜（２７％）与胞浆（９３．７％）表达。作用于ＰＫＣ调节区的抑制剂ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）（２×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）与作用于催化区的ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）（２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）在明显抑制细胞生长的浓度使Ｐ２１ｒａｓ表达程度均减弱,胞膜阳性率明显降低,分别为５．６％与１．６％。２）蛋白质－ＤＮＡ双参数流式细胞法测定发现在Ｇ１期细胞群Ｒａｓ蛋白表达差异较大,提示Ｒａｓ蛋白主要在Ｇ１期合成逐渐增多;经ＰＫＣ抑制剂ＳＳ与ＳＴ处理后,Ｇ１期细胞表达的差异减小,说明ＰＫＣ抑制剂抑制了Ｇ１期Ｒａｓ蛋白合成。本研究结果提示：ＰＫＣ对Ｒａｓ蛋白向发挥作用的部位胞膜的转移具有一定的调控作用。Ｒａｓ蛋白的表达可能与ＣＮＥ－２Ｚ细胞Ｇ１／Ｓ期的过渡有关。     

C5a受体的作用位点及信号传导

Ｃ５ａＲ（ＣＤ８８）属Ｇ蛋白偶联／ＳＴＲ超家族超成员,它至少具两个配体结合位蹼：一个位于Ｎ末端,另一个可能为第二细胞外环上的Ｇｌｕ＾１９９。Ｃ末端和第三胞浆内环与Ｇ蛋白偶联。与Ｃ５ａＲ偶联的Ｇ蛋白有Ｇｉα２、Ｇｉα３、Ｇ１６和Ｇｚ,已知涉及的信号传导通路为ＰＩ－ＰＬＣ、Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＡＰＫ、ｃＡＭＰ。Ｃ５ａＲ分子及基因结构已阐明,各功能位点,信号传导还有待深入研究。     

巨噬细胞免疫调变信号：Raf—1,MAPKp44,MAPKp42和p38MAPK的研究

为了了解巨噬细胞免疫调变机理,我们应用ＬＰＳ和ＰＭＡ处理小鼠抑制性巨噬细胞,观察到Ｒａｓ下游信号分子ＡＦ－１,分裂原激活蛋白激酶ＭＡＰＫｐ４４,ＭＡＰＫｐ４２和ｐ３８ＭＡＰＫ均被活化,发现ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ能增强ｐ３８ＭＡＰＫ的活性,进一步提示ＰＫＣ和ＰＡＫ途径增强了ｐ３８ＭＡＰＫ的磷酸化效应,为我们了解ＬＰＳ如何激活ｐ３８ＭＡＰＫ信号通路提供了一个新的机会／     

参与细胞凋亡的丝裂原活化蛋白激酶及其作用机制

丝裂原活化蛋白激酶家族（ＭＡＰＫｓ）参与细胞调亡的信号转导过程。在多数细胞中,ＪＮＫ／ＳＡＰＫｓ和ｐ３８诱导细胞调亡,ＥＲＫ促进细胞增殖;但在另一些细胞中则情况相反。ＭＡＰＫｓ途径与死亡受体途径之间存在一定的联系,它们间的交互作用尚待一步研究。     

G蛋白偶联受体的细胞增殖信息传递途径

本文主要综述Ｇ蛋白各α亚基、βγ二聚体,Ｇ蛋白偶联受体和丝裂原激活的蛋白激酶在细胞增殖和肿瘤发生过程中的作用;以及从ＧＰＣＲｓ到ＭＡＰＫ的信号传导途径和途径中的一些癌基因产物;最后说明从ＧＰＣＲｓ至ＪＮＫ的一种新的细胞增殖信号传导途径。     

5-HT和NA增强大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸门控Cl~-通道电流由蛋白激酶介导

用制霉菌素穿孔膜片钳方法研究５－ＨＴ和ＮＡ对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸门控氯离子通道电流（ＩＧｌｙ）的调控作用及其胞内机制。发现：（１）５－ＨＴ激活与非胰岛激活蛋白（ＩＡＰ）敏感型Ｇ蛋白偶联的５－ＨＴ２受体亚型,激活磷脂酶Ｃ（ＰＬＣ）,增加甘油二酯（ＤＡＧ）的生成。ＤＡＧ增强不依赖Ｃａ２＋的新型ＰＫＣ（ｎＰＫＣ）的活性,从而增强ＩＧｌｙ;（２）ＮＡ激活与ＩＡＰ敏感型Ｇ蛋白偶联的α２受体,抑制腺苷酸环化酶（ＡＣ）,减少ｃＡＭＰ的生成,使ＰＫＡ活性降低,从而增强ＩＧｌｙ。