细胞衰老和凋亡相关蛋白表达在宫颈鳞癌变中的意义

目的:许多细胞周期调控因子和衰老相关标志物如p14ARF、p15INK4b、p16INK4a和p53在G1细胞周期阻滞和癌基因诱导的衰老中意义重大。这些关键的调节蛋白在多种恶性肿瘤中经常发生突变或是缺失。在本研究中将探讨这些因子在宫颈癌发生中的意义。方法:在本研究中在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中,应用免疫组织化学方法检测p14ARF、p15INK4b、p16INK4a、Bcl-2、p53表达,并分析它们的表达与宫颈癌变的相关性。结果:p16INK4a在正常宫颈鳞状上皮10%(2/20)表达阴性,在大部分CIN和宫颈鳞癌中表达阳性,其中在85%(17/20)CIN和75%(15/20)鳞癌中呈弥漫性强阳性表达,CIN和宫颈鳞癌中的阳性表达率显著高于正常上皮(P0.01),CIN和宫颈鳞癌的间表达率无显著差异。p15INK4b在正常宫颈鳞状上皮中65%(13/20)表达弱阳性,在100%(20/20)CIN和95%(19/20)宫颈鳞癌中表达弥漫性阳性,各组之间阳性表达率无显著性差异(P0.05)。p14ARF在40%(8/20)正常宫颈上皮细胞中表达呈弱阳性(1+),在宫颈鳞癌中表达呈弥漫性强阳性90%(18/20),在45%(9/20)CIN中表达阳性,各组之间阳性表达率无显著性差异(P0.05)。Bcl-2在20%(4/20)正常宫颈上皮表达呈弱阳性,在18/20CIN中其表达强度和比率均增加,阳性表达率为90%(18/20),Bcl-2在鳞癌中700%(14/20)呈强阳性和弥漫阳性,CIN和宫颈鳞癌中的阳性表达率显著高于正常上皮(P0.01),CIN和宫颈鳞癌的间表达率无显著差异。P53免疫组化染色显示在正常宫颈上皮为表达为20%(4/20),在大多数CIN25%(5/20)和鳞癌中核阳性85%(17/20),在鳞癌中的阳性表达率显著高于正常宫颈上皮和CIN病变(P0.05)。结论:宫颈鳞癌变涉及包括细胞凋亡和细胞衰老在内的多种信号分子表达异常,这些分子可能在宫颈鳞癌发生发挥重要作用并在宫颈癌早期诊断中有重要意义。     

NF-κ B和HIF-1在宫颈上皮内瘤变和鳞癌中表达的意义

目的：初步探索NF-κB和HIF-1在宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达及临床病理学意义。方法：以宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌病例为研究对象,应用免疫组织化学方法检测NF-κB和HIF-1的表达情况并分析其表达在宫颈癌变中的意义。结果：NF-κB在正常宫颈上皮、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、鳞癌的阳性表达率分别为16%,36%,44%,68%,72%。总体比较存在显著性差异x2=21.636,p〈0.01。组间两两比较显示正常上皮与CINⅢ和鳞癌有显著性差异。HIF-1α在正常宫颈上皮、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、鳞癌的阳性表达率分别为12%,20%,40%,68%,76%。总体比较存在显著性差异x2=32.733,p〈0.01。组间两两比较显示正常上皮与CINⅢ（x2=16.333 p〈0.001）和鳞癌（x2=20.779 p〈0.001）有显著性差异。结论：NF-κB和HIF-1与宫颈鳞癌的发生有关,可能作为早期诊断的标志物。     

在子宫颈上皮内瘤变和鳞癌组织中CyclinE、Rb基因表达的研究

目的 探讨细胞周期素E（CyclinE）、视网膜母细胞瘤（Rb）基因与上皮内瘤变（CIN）和宫颈鳞癌的关系,及其在癌变过程中的意义。方法 应用免疫组化技术（S-P法）,检测CyclinE和Rb基因产物在各级别CIN77例和宫颈鳞癌40例中的表达状况,并以正常子宫颈鳞状上皮20例做对照。结果 在正常宫颈鳞状上皮、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈鳞癌中,CyclinE的阳性表达率呈逐渐增强趋势,分别为：0．0％、30．0％、75．0％、65．0％、60．0％。正常宫颈鳞状上皮与各级别CIN和宫颈鳞癌之间差异均有显著性（P〈0．01或〈0．005）,CINⅠ与CINⅡ、CINⅢ、宫颈鳞癌组间差异均有显著性（P〈0．005或〈0．01）;Rb基因蛋白的表达率逐渐下调,分别为：100．0％、55．0％、20．0%、24．3%、23．5％,在正常宫颈鳞状上皮与各级别CIN和宫颈鳞癌组间差异均有显著性（P〈0．005）;CINI与CINHI、宫颈鳞癌组间差异有显著性（P〈O．005）。结论CyclinE在正常子宫颈鳞状上皮表达阴性,随着发生CIN从轻到重至宫颈鳞癌,表达呈逐渐增强趋势;表明CyclinE在子宫颈癌变过程中起到重要作用,CyclinE参与CIN的进展及子宫颈癌癌变机制。Rb基因蛋白在正常子宫颈鳞状上皮100％阳性,随着发生CIN从轻到重至宫颈鳞癌,表达呈逐渐下调趋势,甚至消失;表明Rb基因可能主要通过功能性失活参与宫颈鳞癌的发生,并且其在癌变过程中起重要作用。发现CyclinE表达增强和RB基因表达下调或消失,有助于宫颈鳞癌发生的判断及CIN程度和级别的确定。     

高危型人乳头瘤病毒感染后TopoⅡα和p16INK4A蛋白的表达及诊断价值

目的 探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染后TopoⅡα和p16INK4A在宫颈组织中的表达及其对癌前病变的诊断价值.方法 选取在温州医学院附属二院行宫颈病变诊治的患者135例,包括各级宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈鳞癌(SCC)的患者.随机选取同期就诊的慢性宫颈炎患者30例作为对照.运用第二代杂交捕获法(HC2)检测高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的表达.活体提取组织,运用免疫组织化学法(SP法)检测宫颈组织中Topo Ⅱα和p16INK4A蛋白表达.结果 在HR-HPV阳性患者的宫颈组织中Topo Ⅱα和p16INK4A表达率高于HR-HPV阴性患者,差异有统计学意义.Topo Ⅱα和p16INK4A在正常宫颈上皮组织、各级CIN和SCC中的表达率逐渐增加,差异有统计学意义.p16INK4A用于筛查宫颈癌前病变(包括SCC)时阳性预测值99.3％.Topo Ⅱα用于筛查宫颈严重病变(CINⅢ和SCC)时阳性预测值67.9％.结论 HR-HPV感染后Topo Ⅱα和p16INK4A蛋白表达明显增高,并且Topo Ⅱα和p16INK4A蛋白表达率随着宫颈癌前病变的严重程度而上调,参与宫颈上皮的异常增殖和恶性转变.p16INK4A免疫组化检测提高了宫颈癌前病变筛查的特异性,Topo Ⅱα免疫组化检测提高了宫颈严重病变筛查的特异性,当Topo Ⅱα蛋白表达阳性,宫颈组织可能已发生不可逆性病变.     

NF-κB和HIF-1在宫颈上皮内瘤变和鳞癌中表达的意义

目的:初步探索NF-κB和HIF-1在宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达及临床病理学意义.方法:以宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌病例为研究对象,应用免疫组织化学方法检测NF-κB和HIF-1的表达情况并分析其表达在宫颈癌变中的意义.结果:NF-κB在正常宫颈上皮、CIN I、CINII、CINIII、鳞癌的阳性表达率分别为16%,36%,44%,68%,72%.总体比较存在显著性差异x2=21.636,p＜0.01.组间两两比较显示正常上皮与CINⅢ和鳞癌有显著性差异.HIF-1а在正常宫颈上皮、CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CINⅢ、鳞癌的阳性表达率分别为12%,20%,40%,68%,76%.总体比较存在显著性差异X2=32.733,p＜0.01.组间两两比较显示正常上皮与CINⅢ(x2=16.333 p＜0.001)和鳞癌(x2=20.779 p＜0.001)有显著性差异.结论:NF.K B和HIF-l与宫颈鳞癌的发生有关,可能作为早期诊断的标志物.     

P16、P27和Ki67在宫颈病变中的表达及意义

目的探讨宫颈病变组织中P16、P27和Ki67蛋白的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测30例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、18例宫颈鳞癌组织和12例宫颈正常鳞状上皮组织中P16、P27和Ki67蛋白的表达,分析宫颈病变形成过程中P16、P27和Ki67蛋白表达的变化以及临床病理特征的关系。结果P16和Ki67在正常宫颈、CIN和宫颈鳞癌组织中的表达率分别为0(0/12)、70%(21/30)、100%(18/18)和30%(4/12)、90%(27/30)、100%(18/18),二者在CIN和宫颈鳞癌中阳性表达率明显高于正常宫颈组织的表达,差异有显著性(P0.05);P27蛋白在正常宫颈、CIN和宫颈鳞癌组织中的表达率分别为82.22%(10/12)、53.33%(16/30)和27.78%(5/18),其在CIN和宫颈鳞癌中阳性表达率明显低于正常宫颈组织的表达,差异有显著性(P0.05)。在CIN和宫颈鳞癌组织中,P16和Ki67表达呈正相关(P0.05);P27和P16、Ki67表达呈负相关(P0.05)。结论P16、P27和Ki67参与了CIN、宫颈癌的发生。P16、Ki67和P27联合检测可作为早期诊断宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的标记物,可提高宫颈癌的早期诊断率。     

NFAT1和TWEAK在宫颈鳞癌及上皮内瘤变中表达的意义

目的：通过观察NFAT1和TWEAK在正常宫颈鳞状上皮、宫颈鳞状上皮上皮内瘤变、宫颈鳞癌中表达,探讨NFAT1和TWEAK表达情况在宫颈鳞癌发生和临床发展中的意义。方法：研究组织病例为档案病理蜡块,应用免疫组织化学技术检测NFAT1和TWEAK的表达;对宫颈鳞癌进行临床分期,分析NFAT1和Tweak表达与临床分期的相关性。结果：免疫组化结果显示,NFAT1阳性表达率在正常宫颈鳞状上皮、cINI级、CINII级、cINIIl级、鳞癌中分别为24．4％,24．5％,29．2％,72．7％,78．4％,各纽总体阳性表达率存在显著性差异,cINIII级与宫颈鳞癌中NFAT1表达率较宫颈正常上皮,CINI级,CINII级与cINIII级显著增高。TWEAK阳性表达率在正常宫颈鳞状上皮、CINI级、CINII级、cINⅢ级、鳞癌中分别为73．4％,66％,73．1％20．4％,19．6％,各组总体阳性表达率存在显著性差异。宫颈正常,CINI级,CINII级与CINIIIN．较CINⅢ与宫颈鳞癌中TWEAK表达率显著增高。NFATI和TWEAK表达相关性具有统计学意义。结论：NFAT1和TWEAK在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌中的表达存在差异且两者间表达存在相关性,NFAT1表达增加与宫颈鳞癌发生和肿瘤进展有关而TWEAK表达与宫颈癌发生呈负相关。     

新疆维、汉P-gp、MRP1、GST-π与宫颈癌新辅助化疗疗效的相关性研究

目的：探讨新疆维吾尔族及汉族宫颈癌新辅助化疗前后P-gp、MRPI和GST-∏的表达及其与化疗疗效的关系。方法：运用S-P法检测分别检测维吾尔族妇女宫颈鳞癌组织22例和非宫颈鳞癌组织20例,汉族妇女宫颈鳞癌组织30例和非宫颈鳞癌组织30例,新辅助化疗前后P-gP、MRPI和GST-π的表达水平。结果：①新疆维吾尔族正常宫颈、初治宫颈癌组织中P-gp的阳性表达率分别为10%、72.7%;MRP1的阳性表达率分别为20%、40.9%;GST-π的阳性表达率分别为45%、90.9%。P-gp、和MRP1在各组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,GST-π差异无统计学意义（P〉0.05）。②新疆汉族正常宫颈、初治宫颈癌组织中P-gp的阳性表达率分别为10%、56.7%;GST-π的阳性表达率分别为20%、60%,MRP1的阳性表达率分别为40%、86.7%。P-gp、GST-π和MRP1在各组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。③在新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌组织中：NACT后宫颈癌组织中GST-π阳性表达显著上升（P〈0.05）,有统计学意义。NACT后宫颈癌组织中P-pg、MRP1阳性表达差异无统计学意义（P〉0.05）。④在新疆汉族妇女宫颈鳞癌组织中：NACT后宫颈癌组织中P-pg、GST-π阳性表达显著上升（P〈0.05）;有统计学意义。NACT后宫颈癌组织中MRP1阳性表达上升但差异无统计学意义（P〉0.05）。⑤新疆维吾尔族妇女化疗前宫颈鳞癌组织中MRP1及GST-π表达阴性和阳性患者NACT有效率无显著性差异（p〉0.05）,P-gp表达阴性患者NACT有效率显著高于P-gp表达阳性患者NACT有效率（p〈0.05）;⑥汉族化疗前宫颈鳞癌组织中P-gp、GST-π表达阴性患者NACT有效率显著高于P-gp、GST-π表达阳性患者NACT有效率（p〈0.05）;化疗前宫颈鳞癌MRP1表达阴性和阳性患者NACT有效率无显著性差异（p〉0.05）。结论：P-pg和GST-π可作为预测汉族宫颈鳞癌化疗敏感性指标。P-pg可作为预测维吾尔族宫颈鳞癌化疗敏感性指标。     

Bcl-2和COX-2在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的：观察Bcl-2和COX-2在正常宫颈和宫颈鳞癌中的表达情况,并探讨其与宫颈鳞癌发生发展的关系。方法：应用免疫组织化学s-P法检测40例宫颈鳞癌组织、10例正常宫颈组织中Bcl-2和COX-2的表达情况。结果：（1）Bcl-2在正常宫颈组织和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为30．0％、72．5％（P〈0．05）,而COX-2在正常宫颈组织和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为0．0％、60．0％（P〈0．05）。（2）在宫颈鳞癌中,Bcl-2的表达与宫颈鳞癌的病理分级、临床分期以及淋巴结转移无关（P〉0．05）,而COX-2的表达与宫颈鳞癌的病理分级及淋巴转移有关（P〈0．05）,与临床分期无关（P〉0．05）。（3）Spearman等级相关性分析显示宫颈鳞癌组织中Bcl-2和COX-2的表达呈正相关（r=0．517,P〈0．01）。结论：Bcl-2和COX-2在宫颈鳞癌中的表达升高并呈显著正相关,且COX-2的表达与宫颈鳞癌的淋巴转移有关,二者在宫颈癌的发生发展中可能起重要作用,有可能作为评估宫颈鳞癌淋巴结转移的参考指标。     

宫颈癌组织中MCM5和P16~(INK4A) mRNA的表达及其临床意义

目的:检测宫颈癌组织中微小染色体维持蛋白-5(minichromosome maintenance protein 5,MCM5)与P16INK4AmRNA的表达,并探讨其在宫颈癌中的临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测40例宫颈鳞状细胞癌、15例低度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)、20例高度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ-Ⅲ)中MCM5和P16INK4AmRNA的相对表达量,并以20例正常宫颈组织作为对照,分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果:(1)随着宫颈病变程度的加重,MCM5和P16INK4AmRNA的表达量逐渐增高。宫颈癌组织中MCM5和P16INK4AmRNA的表达量分别是正常宫颈组织的(3.026±1.210)倍和(2.540±0.718)倍,差异具有统计学意义(P0.05)。宫颈癌组织中MCM5 mRNA的表达量明显高于CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ(P0.05),CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ中MCM5 mRNA的表达量均显著高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P0.05),而CINⅠ与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义(P0.05);宫颈癌组织中P16INK4AmRNA的表达量为正常宫颈组织的(2.54±0.86)倍,差异有统计学意义(P0.05),亦显著高于CINⅠ,差异具有统计学意义(P0.05),但与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)在宫颈癌组织中,MCM5 mRNA的表达量与肿瘤的临床期别、分化程度显著相关(P0.01),但与患者的年龄无关(P0.05);P16INK4AmRNA的表达量与肿瘤的临床期别、年龄均无关(P0.05),但与肿瘤的分化程度相关(P0.01)。结论:MCM5、P16INK4A的高表达可能在宫颈癌的发展中起重要作用。MCM5基因检测有助于区分癌前病变和宫颈癌,有望成为宫颈癌肿瘤增生的新标志物。P16INK4A的检测在宫颈病变筛查中具有重要意义,有助于CIN的分级并预测转归,从而提高宫颈癌筛查率。     

TLR4在宫颈癌与不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达及意义

目的 探讨TLR4在正常宫颈组织、宫颈上皮不典型增生、宫颈癌组织以及不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达与意义.方法 采用SP免疫组织化（IHC）检测TLR4在12例正常宫颈组织、30例宫颈轻度不典型增生（cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ,CINⅠ）、30例宫颈中-重度不典型增生（cervical intraepithelial neoplasiaⅡ-Ⅲ,CIN Ⅱ-Ⅲ）以及49例宫颈癌（invasive cervical carcinoma,ICC）组织中的表达;应用细胞免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TLR4在不同HPV亚型宫颈癌细胞株HPV18（＋）HeLa、HPV16（＋）Siha以及HPV（-）C33a宫颈癌细胞株上的表达.结果 TLR4的表达随着宫颈病变程度的增高逐渐增强,在正常宫颈组织、CINⅠ、CIN Ⅱ～Ⅲ、ICC中阳性表达率分别为8.33 %（1/12）、20.00 %（6/30）、26.67 %（8/30）和55.10 %（27/49）,ICC与正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ之间均有显著性差异（P＜0.01）.TLR4表达与HPV感染有关,在HPV阳性宫颈癌细胞株上表达强于HPV阴性细胞株.结论 TLR4可能参与宫颈癌起始、发展,TLR4的表达与功能与HPV感染有关.     

宫颈癌组织中MCM5和P16^INK4A mRNA的表达及其临床意义

目的：检测宫颈癌组织中微小染色体维持蛋白-5（minichromosome maintenance protein 5,MCM5）与P16^INK4AmRNA的表达,并探讨其在宫颈癌中的临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测40例宫颈鳞状细胞癌、15例低度宫颈上皮内瘤变（CINⅠ）、20例高度宫颈上皮内瘤变（CINⅡ-Ⅲ）中MCM5和P16^INK4AmRNA的相对表达量,并以20例正常宫颈组织作为对照,分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果：（1）随着宫颈病变程度的加重,MCM5和P16^INK4AmRNA的表达量逐渐增高。宫颈癌组织中MCM5和P16^INK4AmRNA的表达量分别是正常宫颈组织的（3.026±1.210）倍和（2.540±0.718）倍,差异具有统计学意义（P〈0.05）。宫颈癌组织中MCM5 mRNA的表达量明显高于CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ（P〈0.05）,CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ中MCM5 mRNA的表达量均显著高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而CINⅠ与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义（P〉0.05）;宫颈癌组织中P16^INK4AmRNA的表达量为正常宫颈组织的（2.54±0.86）倍,差异有统计学意义（P〈0.05）,亦显著高于CINⅠ,差异具有统计学意义（P〈0.05）,但与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）在宫颈癌组织中,MCM5 mRNA的表达量与肿瘤的临床期别、分化程度显著相关（P〈0.01）,但与患者的年龄无关（P〉0.05）;P16^INK4AmRNA的表达量与肿瘤的临床期别、年龄均无关（P〉0.05）,但与肿瘤的分化程度相关（P〈0.01）。结论：MCM5、P16^INK4A的高表达可能在宫颈癌的发展中起重要作用。MCM5基因检测有助于区分癌前病变和宫颈癌,有望成为宫颈癌肿瘤增生的新标志物。P16^INK4A的检测在宫颈病变筛查中具有重要意义,有助于CIN的分级并预测转归,从而提高宫颈癌筛查率。     

Expression of vascular endothelial growth factor in the progression of cervical neoplasia and its relation to angiogenesis and p53 status

OBJECTIVE: To evaluate vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in the successive steps of cervical neoplasia and to determine its correlation with angiogenesis and p53 status. STUDY DESIGN: Immunohistochemical staining with a VEGF monoclonal antibody was performed on a total of 161 cervical specimens representing 12 normal epithelium, 33 cervical intraepithelial neoplasia (CIN) 1, 30 CIN 3 and 86 squamous cell carcinomas. Microvessels were immunohistochemically labeled with an antibody to CD34. Computerized image analysis was used to evaluate microvessel density (MVD). p53 Status was determined by immunohistochemistry and direct sequencing of exons 5-8 of the p53 gene. RESULTS: VEGF expression progressively increased along the continuum from normal epithelium to squamous cell carcinoma (P < .05). MVD increased significantly with cervical neoplasia progression, from normal epithelium, through CIN, to squamous cell carcinoma (P < .001). A strong correlation was observed between VEGF expression and MVD (P < .001). p53 Protein expression was not detected in the normal epithelium or in CIN 1, while 3 (10%) of 30 CIN 3 and 28 (33%) of 86 squamous cell carcinomas were positive for p53. VEGF expression correlated statistically with p53 protein expression (P < .001). In double VEGF- and p53-stained sections, the 2 markers were generally expressed in the same tumor cells. Of the 4 p53 gene mutations, 3 exhibited strong VEGF expression, and 1 exhibited moderate VEGF expression. VEGF expression did not correlate significantly with outcome variables in patients with squamous cell carcinoma. CONCLUSION: Our results suggest that VEGF expression is involved in the promotion of angiogenesis in cervical neoplasia and that p53 is likely to be involved in the regulation of VEGF expression.     

HLA-I表达与维吾尔族妇女宫颈癌前病变及HPV16感染的关系研究

目的：观察人白细胞相关抗原I（human leukocyte antigen class I,HLA-I）表达与维吾尔族妇女宫颈癌前病变进程及高危型HPV16的关系。方法：收集维吾尔族妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）和宫颈鳞癌患者的石蜡包埋组织标本共148例,提取组织DNA,应用PCR的方法检测HPV阳性及HPV16型别;同时采用免疫组织化学SP法检测HLA-I蛋白表达水平。结果：（1）在维吾尔族妇女中HLA-I抗原在宫颈炎、CINI-II、CINIII、SCC组中阳性表达逐渐减少,差异有统计学意义（P〈0.001）。（2）HLA-I的阳性表达下降趋势与宫颈癌临床分期、组织分化程度和淋巴结转移密切相关。（3）HPV在宫颈炎、CINI-II、CINIII、宫颈癌中的感染率分别为13%、46%、82%、95%,差异有统计学（P〈0.001）。（4）HPV16在宫颈炎、CINI-II、CINIII、宫颈癌中的感染率分别为4%、30%、68%、85%,差异有统计学（P〈0.001）。（5）在HPV16阳性标本中,存在HLA-I表达缺失的占71%（58/82）,HPV16感染与HLA-I表达呈负相关（r=-0.625,P〈0.001）。结论：（1）HLA-I表达缺陷可能是宫颈病变进展的重要标志,对宫颈癌的预测预警提供依据。（2）HPV16感染在宫颈病变的发展过程中起到了极大的促进作用,是一个很强的致癌因素。（3）HPV16感染与HLA-I表达之间的关系对揭示宫颈癌发病机制提供了客观依据。     

宫颈鳞癌演进过程P16INK4a及Hh-Gli信号通路相关蛋白表达及其相关性研究

探讨P16^INK4a及Sonic hedgehog(Hh-Gli)信号通路蛋白在宫颈癌及癌前病变(CIN)中的表达相关性及其意义．采用Western-blot方法检测HPV16阳性及HPV18阳性宫颈癌细胞系P16^INK4a及Hh-Gli信号通路蛋白Smo、Ptch及Gli表达．免疫组化检测组织芯片P16^INK4a、Shh、Smo、Ptch及Gli表达,包括20例正常宫颈、18例癌旁组织、54例CIN及28例宫颈鳞癌组织．分析P16^INK4a与Hh-Gli信号通路蛋白间表达相关性及与临床病理因素的关系．结果显示P16^INK4a、Smo、Ptch及Gli蛋白在HPV16及HPV18阳性宫颈癌细胞系中表达无显著差异(P>0.05)．P16^INK4a、Shh、Smo、Ptch及Gli蛋白在宫颈癌中表达强度显著高于癌旁及正常组织(P<0.05),在CINⅠ与正常组织间差异不显著(P>0.05)．P16^INK4a、Shh、Smo及Gli蛋白,在CINⅠ、CINⅡ与CINⅢ之间均有显著性差异(P<0.05)．相关分析显示,CINⅡ-CINⅢ中P16^INK4a与Shh和Smo蛋白表达正相关,浸润癌中P16^INK4a与Shh、Smo和Gli蛋白正相关．结论认为,P16^INK4a及Hh-Gli信号通路异常激活与宫颈癌发生及演进密切相关,且二者间具有相关性．Hh-Gli信号通路的激活可能是Shh配体增高调控Smo高表达而上调Gli蛋白所致．     

HIF-2α、VEGF在子宫颈鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的检测宫颈鳞癌组织及正常宫颈组织中HIF-2α、VEGF基因与蛋白的表达情况,探讨其在子宫颈鳞癌的临床意义。方法随机选取64例子宫颈鳞癌组织和22例正常宫颈组织,收集年龄、FIGO分期和淋巴结转移等临床相关指标,采用实时荧光定量PCR法及免疫组织化学法(Elivision法)检测各组织中HIF-2α、VEGF的表达。结果实时荧光定量PCR分析结果表明HIF-2α、VEGF mRNA表达较正常宫颈组织显著增加,差异有统计学意义(P0.05),且二者mRNA水平呈正相关(r=0.778,P0.001)。免疫组织化学法结果表明HIF-2α、VEGF蛋白在宫颈组织中的阳性表达率分别为宫颈鳞癌组93.8%、正常宫颈组18.2%,两组比较差异有统计学意义,且HIF-2α与VEGF呈显著相关(r=0.514,P0.05)。HIF-2α、VEGF的mRNA表达均与年龄无关,但与FIGO分期、淋巴结转移关系密切(P0.05),FIGO分期高、有淋巴结转移的子宫颈癌组织HIF-2α、VEGFmRNA表达水平均相应对照组升高。结论与正常宫颈组织相比,HIF-2α、VEGF mRNA和蛋白在宫颈鳞癌中均呈高表达。     

宫颈癌中端粒酶的表达和高危型人乳头瘤病毒感染

目的：研究不同程度子宫颈病变中高危型人乳头瘤病毒HR-HPV感染和端粒酶活性的表达,以探讨两者在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的作用及相关性。方法：采用第二代杂交捕获技术检测宫颈脱落细胞HPV．DNA含量,并用免疫组织化学EnVision二步法检测宫颈组织标本中端粒酶的表达。结果：（1）端粒酶阳性表达率在对照组、C1NI、CINII、CINⅢ和宫颈癌组分别为10．00％、16．67％、40．00％、70．00％、95．00％,宫颈癌组高于cINⅢ,CINⅢ高于C1NⅡ,C1NII高于CINI,差异均有统计学意5C（X^2=-4．329,P=0．037;xⅫ．327,P=0．038;X^2=4．022,P=0．045）。（2）随着宫颈病变级别的增加,高危型HPV的阳性率和病毒负荷量均增高。高危型HPV的阳性率在宫颈癌和CINⅢ组明显高于对照组、CINI及CINⅡ（X^2=29．501-7．414,P〈0．01）。高危型HPV的病毒负荷量在对照组与其他4组比较,差异均有统计学意K（P〈0．05）;C1NI组分别与CINⅡ、C1NⅢ及宫颈癌组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）随着宫颈病变级别的增加,高危型HPV的阳性率和端粒酶阳性表达率依次递增,两者有明显的相关性（r=0．943,P〈0．01）。结论：高危型HPV感染和端粒酶活性均与宫颈癌前病变及宫颈癌的发生发展密切相关,有望作为子宫颈癌前病变和宫颈癌筛查的监测指标。     

PDGF—D和VEGF在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的：检测宫颈鳞癌组织中血小板源性生长因子D（PDGF—D）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,探讨二者在宫颈癌变过程中的作用及意义,为探讨宫颈鳞癌的发病机制和宫颈鳞癌的早期治疗提供理论依据。方法：采用免疫组织化学（sP法）检测40例宫颈鳞癌和10例正常宫颈组织中PDGF—D和VEGF蛋白的表达,分析两者之间的相关性及其与临床病理特征之间的关系。结果：宫颈鳞癌组织中PDGF—D和VEGF蛋白的表达显著高于正常宫颈组织（P〈0．05）;PDGF—D和VEGF的表达与宫颈鳞癌的分化程度及淋巴结转移有关（P〈0．05）;与年龄及临床分期无关（P〉0．05）。Spearman相关分析发现PDGF—D与VEGF表达程度呈正相关（r=0．346,P〈0．05）。结论：1．PDGF—D和VEGF在宫颈鳞癌组织中特异性高表达,可能在宫颈鳞癌的发生、发展与转移中起着重要作用。2．PDGF-D和VEGF表达与宫颈鳞癌的分化程度及淋巴结转移有关,与年龄及临床分期无关,提示它们可能在宫颈鳞癌的浸润和转移及预后方面有重要的监测意义。3．PDGF-D和VEGF在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关,提示两者起着相互促进的作用,对PDGF—D和VEGF的联合检查,为临床实际应用提供了参考。