大鼠黄体细胞酪氨酸含量及hCG,cAMP和孕酮对含量的影响

经PMSG-hCG处理的未成年雌性大鼠卵巢,用胶原酶-DNA酶溶液消化,制成黄体细胞悬浮液。预培育1h后,加入不同浓度的hCG、cAMP及孕酮;并在加入hCG(10mIU/ml)、cAMP(2.5mmol/L)或孕酮(1nmol/L)的同时分别加入苯丙氨酸或放线菌酮,再培育1.5h,取细胞悬浮液400μl,用薄层层析扫描技术测其酪氨酸含量。结果:黄体细胞内有一定量内源酪氨酸,hCG,cAMP和孕酮均可明显促进酪氨酸的释放(P<0.05).苯丙氨酸对酪氨酸的含量无影响。酪氨酸释放也不依赖蛋白质合成过程。     

细胞内外钙浓度变化不影响酪氨酸抗hCG致孕酮生成作用

实验取经ＰＭＳＧ－ｈＣＧ处理的未成年雌性大鼠卵巢,用胶原酶－ＤＮＡ酶消化,制得黄体细胞悬浮液,预孵育１ｈ后加入各种处理因素,继续孵育２ｈ,用放射免疫方法测孵育液中孕酮的量。结果：孵育液中含有高钙或高钾或加入Ａ２３１８７时均可增加黄体细胞基础及ｈＣＧ诱导的孕酮生成量。相反,减少钙的浓度或加入ＥＧＡＴ或戊脉胺,孕酮生成量则明显减少。酪氨酸抑制ｈＣＧ刺激的孕酮生成,但对高钙、高钾和Ａ２３１８７增加孕酮的作用没有影响,并对上述三者分别与ｈＣＧ同时作用所致孕酮生成增加也没有影响。提示：大鼠黄体细胞孕酮生成依赖于细胞内外的钙;细胞内外钙浓度的变化不影响酪氨酸抗ｈＣＧ致孕酮生成作用;钙与ｈＣＧ使孕酮增加的作用可能是通过不同机制。     

血小板活化因子对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子表达的作用

本文旨在研究血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)mRNA表达的作用.将未成年(25～28 d)Sprague-Dawley雌性大鼠颈部皮下注射50 IU孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG),48 h后注射25 IU人绒毛膜促性腺激素(human chorionicgonadotrophin.hCG)诱导卵泡发育和黄体生成,第6天(hCG注射日为第1天)收集卵巢黄体细胞,体外培养24 h后,不加或加入不同剂量(0.1 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL)PAF,37℃、5%CO2培养箱内培养24 h.用放射免疫方法测定培养液中孕酮的含量,流式细胞仪和RT-PCR方法检测黄体细胞凋亡以及VEGF mRNA的表达.结果显示,PAF促进黄体细胞孕酮分泌,1 μg/mL PAF作用最强(P<0.05);PAF促进黄体细胞凋亡无明显剂量依赖性,但10 μg/mL PAF显著促进大鼠黄体细胞凋亡(P<0.05):PAF刺激黄体细胞VEGF mRNA表达,1 μg/mL PAF效果最显著(P<0.01).结果提示,PAF可通过调节黄体细胞孕酮的分泌和VEGF mRNA的表达来促进黄体形成.     

c-erbB_2对大鼠黄体细胞hCG诱导的孕酮分泌的影响

采用离体细胞体外孵育法 ,研究反义c erbB2 寡脱氧核苷酸 (antisensec erbB2 ODN)对大鼠黄体细胞hCG诱导的孕酮分泌的影响 ,及其与外源性cAMP和Ca2 以及蛋白抑制剂放线菌酮 (CYX)之间的关系。结果表明 ,反义c erbB2 以剂量相关方式抑制黄体细胞hCG诱导的孕酮的产生 ,同时使c erbB2 蛋白染色阳性的黄体细胞百分数下降 ,无义tatODN没有相应的作用。10 -4 mol/L的二丁酰cAMP能明显反转反义c erbB2 ODN对孕酮产生和c erbB2 表达的抑制作用 ,钙离子通道阻断剂维拉帕米和蛋白抑制剂CYX对此抑制作用有协同效应。该实验说明c erbB2 参于hCG诱导黄体细胞生孕酮作用     

细胞渗透性神经酰胺可抑制大鼠离体黄体细胞甾体激素生成并诱导细胞凋亡

本文旨在观察神经酰胺对离体孵育的大鼠黄体细胞孕酮分泌及细胞凋亡的影响,以PMSG－hCG处理的雌性Wistar大鼠为模型,分离制备黄体细胞,将外源性细胞渗透性神经酰胺与黄体细胞共同孵育,分别用放免法和流式细胞仪分析神经酰胺对黄体细胞孕酮生成和凋亡的影响,同时还检测了一氧化氮合酶（NOS）活性和一氧化氮（NO）水平的变化,结果显示,神经酰胺可以剂量相关方式抑制hCG－诱导的孕酮分泌,而对基础孕酮没有显著影响,离体孵育12h的大鼠黄体细胞存在自发性凋亡,5umol/L神经酰胺能显著增加亡率（P＜0．05）,流式细胞仪分析可见增强的凋亡蜂,实验还发现,50umol/L神经酰胺能明显促进NOS活性（P＜0．01）和NO生成（P＜0．01）,结果提示,神经酰胺可能通过调节甾体激素生成和细胞凋亡而作为一种重要的信息分子参与黄体退化等卵巢的生理过程。     

酪氨酸对表面灌流系统中大鼠离体大,小黄体细胞孕酮生成的影响

参照我室Ｗａｎｇ Ｘｉａｏ－Ｎｉｎｇ的黄体细胞制备方法，制成大鼠黄体细胞悬浮液，经蔗糖密度梯度离心分离大，小黄体细胞，经６０ｍｉｎ预培灌后，每１０ｍｉｎ收集一次培灌液，用ＲＩＡ测定其中孕酮含量，实验结果表明，在培灌系统中，大黄体细胞的基础孕酮分泌量明显高于小黄体细胞，但小黄体地ｈＣＧ的敏感性强于大黄体细胞，不同剂量的酪氨酸对ｈＣＧ致大，小黄体细胞孕酮生成有不同程度的抑制，对小黄体细胞的抑制作用较为     

Na~+、K~+离子通道阻滞剂对离体大鼠黄体细胞孕酮生成的影响

本工作用二种离子通道阻断剂四乙胺(TEA)和河豚毒素(TTX)来研究 Na~+、K~+通道的改变对大鼠黄体细胞孕酮生成的影响。10~(-3)mol/L 的 TEA 或 TTX 均使孕酮分泌量显著增加,而这种促进效应可被酪氨酸(Tyr)完全阻断。Tyr 对 TEA 或 TTX 与 hCG 联合所引起的孕酮分泌也有抑制作用。上述实验说明跨黄体细胞内外的 K~+和 Na~+浓度差与孕酮分泌有关。     

酪氨酸对大鼠离体颗粒细胞孕酮、雌激素和cAMP生成的影响

本实验应用培养细胞悬浮液的方法,研究了酪氨酸对经 PMSG 处理的未成熟大鼠颗粒细胞孕酮、雌激素和 cAMP 生成的影响。给30天龄未成熟雌鼠皮下注射 PMSG 100单位/只48小时后,取出卵巢,分离出排卵前卵泡中的颗粒细胞,制成细胞悬浮液。按实验要求,在细胞悬浮液中加入(1)培养液空白,(2)hCG(101U),(3)酪氨酸(20μg)和(4)α-MT(20μg)。培养45分钟后,取出一部分样品用蛋白竞争结合法测各管 cAMP 含量。培养4小时后,用放射免疫分析法测各管孕酮和雌激素含量。结果表明,hCG 和酪氨酸均可促进颗粒细胞孕酮、雌激素和 cAMP 的生成,当两者共同作用时,孕酮、雌激素和 cAMP 的生成量进一步增加。α-MT 与酪氨酸的作用相同,在α-MT 与酪氨酸共同作用时,不但未阻断酪氨酸的作用,而且α-MT 本身也表现酪氨酸样的作用,使孕酮、雌激素和 cAMP 的生成量进一步增加。本实验结果提示,酪氨酸而非其衍生物,可促进大鼠离体排卵前卵泡的颗粒细胞生成孕酮和雌激素。酪氨酸的这一作用可能是通过 cAMP 完成的。     

阿片肽类物质对大鼠黄体细胞孕酮生成的影响

本文观察了外源性阿片肽对大鼠离体黄体细胞孕酮生成的影响,结果表明:β-内啡肽以剂量-反应依赖方式促进黄体细胞孕酮生成,有效浓度范围是10~(-8)-10~(-6) mol/L;强啡肽仅在浓度为10~(-6)mol/L时才显示刺激孕酮生成的作用;而甲硫-脑啡肽无明显作用。μ-阿片受体激动剂DAGO和乙基吗啡也能明显促进孕酮的生成。纳洛酮可完全阻断β-内啡肽,DAGO和乙基吗啡的作用。由于大鼠血液中β-内啡肽含量较低,而卵巢局部具有较高浓度的β-内啡肽。因此,我们认为,β-内啡肽可能在卵巢局部参与黄体细胞孕酮生成的调节,是卵巢内促黄体因子之一,这种作用可能是由μ-型阿片受体介导的。     

人工合成寡肽对大鼠黄体细胞孕酮生成的调节及其可能作用机制

本实验比较了合成寡肽抗孕酮生成作用,并进行了相应机制探讨。发现当ＰＨ７．３－７．５时,能较强抑制孕酮分泌的寡肽其结构有共同特点;活性寡肽可对ＰＬＣ信使传递系统产生抑制作用。也可能通过调节黄体细胞内钙离子浓度降低了ｈＣＧ致孕酮的生成作用,甘－丝－赖还升高黄体细胞中ＰＫＣ活性,而降低了ＰＫＡ。可见人工合成寡肽的抗孕酮作用分子机制十分复杂,有待于深入探讨。     

沙门菌CWDMs脂代谢检测

采用毛地黄皂苷敏感试验和菌细胞胆固醇、甘油三脂及胆碱酯酶定性与定量分析法,检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌经L 型变异后形成的细胞壁缺陷突变株(CW DM )的脂类代谢活性,了解这些CW DM 变异的性质和探讨细菌细胞壁缺陷突变与细菌演变的关系。结果表明,沙门菌CW DM s 具有显著的胆固醇和甘油三脂代谢活性、对毛地黄皂苷高度敏感并且还具有与白色念珠菌相似的胆固醇和甘油三脂的含量,但未能检出胆碱酯酶活性。CW DM s返祖菌丧失了脂类代谢酶类和胞浆膜不含胆固醇,恢复了与其亲代细菌型相似的代谢特征。提示在沙门菌天然即存在有与脂类及胆固醇代谢相关的基因,细胞壁的缺陷导致这些脂类及胆固醇代谢基因活化,以致 CW DM s 能够表达固醇和甘油三脂代谢活性和胞浆膜含有胆固醇     

沙门菌CWDMs乳酸脱氢酶同功酶的观察

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的ＣＷＤＭｓ及其宁代细菌型和伤寒杆菌粗糙型的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同功酶,以了解沙门菌ＣＷＤＭｓ生物氧化的特点和机制,探讨ＣＷＤＭｓ变异的性质。结果表明,伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的细菌型及伤寒杆粗糙型在聚丙烯酰胺凝胶电泳后显示出相同的４种具有不同泳动速率的ＬＤＨ同功酶,但ＣＷＤＭｓ仅显示２种ＬＤＨ。ＣＷＤＭｓ的２种ＬＤＨ同功酶与其亲代细菌型及伤寒杆     

沙门菌CWDMs氨基酸代谢的检测

采用氨基氨利用生长试验和谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、谷草转酶（ＧＯＴ）、乳酸脱氨酶（ＬＤＨ）、肌酸激酶（ＣＫ）、α－闳丁酸脱氢酶（α－ＨＢＤ）、γ－谷志肽酶（γ－ＧＴ）,酸性磷酸酶（ＡＣＰ）定性与定量分析法,检测伤ＣＷＤＭｓ变异的特点及其机制,探讨ＣＷＤＭｓ变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌ＣＷＤＭｓ变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌ＣＷＤＭｓ在仅含蛋氨酸或脯氨     

光照对蕨类植物配子体假根向重力性的影响

对８种蕨类植物配子体假根向重力性反应的研究结果表明,除卷柏Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ Ｓｐｒｉｎｇ配子体假根无向重力性反应并且其生长方向与光照方向无关外,其它７种的配子体假根均有向重力性反应,并且假根的向重力性反应在配子体发育初期,因光照的方向不同而异,表现为负向光性。随着配子体发育至片状体阶段,光对其向重力性反应的影响逐渐减弱,而重力的影响增强。在蕨类植物配子体发育初期,光对     

中国鳐类脑颅的研究

作者解剖观察了33种,隶于4目、7亚目、15科、19属的中国鳐类脑颅的形态。研究结果认为:锯鳐目和鳐目是原始类群,它们均具吻软骨,其中圆犂头鳐科和团扇鳐科是特化类群。电鳐目亦具吻软骨,它们是特化和退化类群。在较高等的鲼目则无吻软骨。依据鳐类不同的分类阶元,其脑颅亦各具有不同的式型。     

两种蚤的幼虫形态

关于蚤类幼虫形态的研究,进展比较缓慢,我国王敦清1956年首次描述7种蚤的幼虫形态以后,由柳支英,虞以新(1957),孙昌秀(1965),叶瑞玉(1982,1986),费荣中(1986)等学者先后共描述过约29种蚤的幼虫形态。到目前为止,我国已知蚤类幼虫形态约36种,隶属6科19属。本文描述未见报道的无棘鬃额蚤Frontopsylla aspiniformis Liu etWu(1960)和青海双蚤Amphipsylla qinghaiensis Ren et Ji(1979)两种蚤山幼虫形态。     

省沽油科叶解剖结构的分类学意义

本文对国产省沽油科 Staphyleaceae 4属植物叶的解剖结构进行了详细的比较研究。结果表明, 叶解剖结构特征在属间的区别较明显, 特别是瘿椒树属 Tapiscia 有着几乎与其他三属截然不同的独特性状。根据已有的孢粉学, 花、节及木材的解剖等方面的资料, 我们支持Тахтаджян(1987)将瘿椒树亚科分出而建立瘿椒树科 Tapisciaceae 的观点。瘿椒树属为我国特有属, 根据我们对采自不同产地的材料观察, 居群间的差异很小, 其可能仍为一单种属。