血红素对一些黄酶的抑制作用

血红素对一些黄酶都具有强烈的抑制作用,并且血红素过老化以后对一些黄酶活力的抑制程度因受体不同而有显著差别。在相同的抑制剂浓度下,心肌制剂琥珀酸及NADH氧化酶系中以氧气、细胞色素c和PMS为受体时的活力没有影响,但对以正铁氰化钾、DGPIP和细胞色素b为受体时的活力则有明显抑制。对水溶性琥珀酸脱氢酶、黄递酶和NADH-细胞色素c还原酶以不同受体进行反应时的抑制情况也与上述结果相似,说明抑制作用点直接与琥珀酸脱氢酶及NADH脱氢酶有关。老化血红素对黄嘌呤氧化酶的抑制作用不同,它不影响DCPIP为受体时的活力而却抑制细胞色素c的还原。老化血红素对胆硷氧化酶系及α-甘油磷酸氧化酶系的抑制行为与NADH及琥珀酸氧化酶系相似,看来胆硷和α-甘油磷酸脱氢酶可能也都是黄酶。老化血红素对以上黄酶的抑制都是可逆的,并且从检查6个酶系的结果知道这些抑制皆属竞争性类型。     

琥珀酸脱氢酶与线粒体内膜的结合——泛醌的影响

猪心肌制剂经含水4%丙酮抽提除去泛醌(Q)及部分脂后,其琥珀酸细胞色素c 还原酶活力丧失,但在反应系统中添加Q 可恢复此活力。去Q 制剂再经碱处理除去琥珀酸脱氢酶后,与新鲜制备的水溶性琥珀酸脱氢酶重组,其重组活力,包括结合的琥珀酸脱氢酶和琥珀酸细胞色素还原酶活力,与正常重组(未去除Q 的)相比,结果相似,指出Q 对琥珀酸脱氢酶与膜的结合无明显的影响,脂环境也不是重要因素。     

琥珀酸脱氢酶与线粒体内膜的结合——泛醌的影响

猪心肌制剂经含水4%丙酮抽提除去泛醌(Q)及部分脂后,其琥珀酸细胞色素c还原酶活力丧失,但在反应系统中添加Q可恢复此活力。去Q制剂再经碱处理除去琥珀酸脱氢酶后,与新鲜制备的水溶性琥珀酸脱氢酶重组,其重组活力,包括结合的琥珀酸脱氢酶和琥珀酸细胞色素还原酶活力,与正常重组(未去除Q的)相比,结果相似,指出Q对琥珀酸脱氢酶与膜的结合无明显的影响,脂环境也不是重要因素。     

琥珀酸脱氢酶与线粒体内膜的结合

1.从正丁醇抽提琥珀酸脱氢酶的pH曲线说明它与内膜结合的pK值为8.7;正丁醇的浓度有一临界值在3℃时约为8%;从抽提的温度曲线说明琥珀酸脱氢酶与内膜通过离子键结合的解离活化热甚低而通过疏水键结合的解离活化热在11℃以上时为26,000卡左右;抽提量与醇碳链长短没有直接关系。2.盐类如氯化钾、氯化钠抑制水溶性琥珀酸脱氢酶与碱处理心肌制剂的重组,醇类及非离子型去污剂则促进重组达130%左右,除了促进重组外,它们还明显地激活重组后的琥珀酸脱氢酶把电子递给细胞色素c的能力。3.硫茂甲酰基三氟丙酮(以下简称TTFA)对心肌制剂琥珀酸-细胞色素c还原酶活力的抑制作用受pH的影响。根据抑制百分数的pH曲线求得的pK值在5～10℃时约为8.5。4.通过以上三方面的实验结果说明琥珀酸脱氢酶主要以离子键与线粒体内膜结合而疏水键則起着辅助的作用。     

琥珀酸脱氢酶的研究——琥珀酸脱氢酶还原细胞色素c的性质

新鲜制备之水溶性琥珀酸脱氢酶能还原细胞色素c,此还原细胞色素c 之能力与其重组琥珀酸氧化酶系的能力呈平行关系,二者均很快减弱,数小时之内即全部丧失。还原细胞色素c 之能力受金属螯合剂如邻二氮菲,硫茂甲酰基三氟丙酮及组氨酸等试剂的抑制,抗霉素A 对它则无影响。除了能还原细胞色素c 之外,其他如氮蓝四唑、2,6-二氯酚靛酚均可作为受体,并且亦很快失活。泛醌-5不能被还原,以其他受体测活力时,泛醌-5亦无激活作用。经分析,其异咯嗪、非血红素铁以及不稳定硫之比为1∶(8～10)∶10。     

琥珀酸脱氢酶的研究——琥珀酸脱氢酶还原细胞色素c的性质

新鲜制备之水溶性琥珀酸脱氢酶能还原细胞色素c,此还原细胞色素c之能力与其重组琥珀酸氧化酶系的能力呈平行关系,二者均很快减弱,数小时之内即全部丧失。还原细胞色素c之能力受金属螯合剂如邻二氮菲,硫茂甲酰基三氟丙酮及组氨酸等试剂的抑制,抗霉素A对它则无影响。除了能还原细胞色素c之外,其他如氮蓝四唑、2,6-二氯酚靛酚均可作为受体,并且亦很快失活。泛醌-5不能被还原,以其他受体测活力时,泛醌-5亦无激活作用。经分析,其异咯嗪、非血红素铁以及不稳定硫之比为1:(8～10):10。     

水生动物和大鼠线粒体的呼吸链比较

用陆生哺乳动物线粒体呼吸链与水生动物线粒体呼吸链相比较的研究方法,探讨了呼吸链的功能与环境相适应的关系。研究了淡水中生活的草鱼肝丝线粒体,观察到琥珀酸脱氢酶的活性非常低,而ＮＡＤＨ脱氢酶和泛醌细胞色素Ｃ还原酶的活性较高。但海洋生物海绵的线粒体ＮＡＤＨ脱氢酶和琥垢酸脱氢酶的活性都非常低。     

急性低氧及急性缺血时狗心肌代谢的一些变化

成年雄性狗13条,低氧组8条,麻醉后开胸,暴露心脏,给于不同程度的低氧气体及纯氮气体,于不同时间取冠状动静脉血液及心肌活组织,测定血液氧分压,乳酸含量和心肌琥珀酸-细胞色素 C 还原酶、乳酸脱氢酶、三磷酸腺苷、磷酸肌酸、无机磷以及乳酸含量。对照组5条狗,不给于低氧气体,用主动脉放血代替吸入纯氮气体,其它操作均同低氧组。结果表明:(1)低氧组的乳酸脱氢酶活力升高,琥珀酸-细胞色素 C 还原酶无变化.对照组的这两种酶的活力均升高;(2)急性低氧性心力衰竭时三磷酸腺苷明显降低,磷酸肌酸不变。急性缺血性心力衰竭时三磷酸腺苷不变,磷酸肌酸显著降低;(3)冠状动静脉乳酸量的变化与心肌乳酸量的变化之间不呈现相关。     

糖尿病大鼠肋间肌酶组织化学研究

目的探讨糖尿病早期肋间肌酶组织化学变化。方法应用酶组织化学方法观察糖尿病2周和4周大鼠肋间肌组织脱氢酶、水解酶和氧化酶活性变化。结果糖尿病2周大鼠肋间肌组织琥珀酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶和辅酶Ⅰ黄递酶活性较对照组增强,乳酸脱氢酶活性较对照组减弱,苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酸性磷酸酶、酸性-α-萘酸性酯酶和细胞色素氧化酶无变化。糖尿病4周大鼠肋间肌组织琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、辅酶Ⅰ黄递酶、酸性磷酸酶和酸性-α-萘酸性酯酶活性较对照组增强,乳酸脱氢酶和细胞色素氧化酶活性较对照组减弱,异柠檬酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶无变化。结论糖尿病2周大鼠肋间肌组织有氧氧化代谢能力增强,糖酵解能力减弱。糖尿病4周大鼠肋间肌组织有氧氧化能力增强、糖酵解能力减弱及能量代谢紊乱。在糖尿病早期呼吸肌存在代谢异常。     

细胞色素c与呼吸链多酶系统重组合的进一步研究

用缺c心肌制剂进行实验,在低磷酸浓度下,细胞色素c对琥珀酸氧化酶系及NADH氧化酶系的米氏常数都很小(K_m=0.4μM),比高磷酸浓度时低50倍左右,与测定条件下内源细胞色素c的浓度接近。血清白蛋白,组氨酸及某些金属螯合剂如:乙二胺四乙酸钠、8-羟基喹啉、邻二氮菲以及焦磷酸等均可以提高重组合琥珀酸氧化酶系在低磷酸测定系统中的活力,达到高磷酸浓度下细胞色素c饱和时的水平,但是并不影响细胞色素c与这二个酶系的结合能力。在适当条件下,外源细胞色素c可以重新掺入缺c的心肌制剂,并且重组合的心肌制剂似不再与氰化钾反应。     

α-羟酸脱氢酶催化机制及其应用前景

简述α-羟酸脱氢酶家族中的乙醇酸氧化酶、乳酸单加氧酶、乳酸氧化酶、细胞色素氧化酶b2和扁桃酸脱氢酶等几种酶的蛋白质分子结构和催化机理,对该类酶的催化机制进行了比较,揭示α-羟酸脱氢酶蛋白质分子结构与功能之间的关系,为其在食品、医疗检测、重要的医药化工中间体的合成等方面的应用提供理论指导。     

琥珀酸脱氢酶的研究——Ⅳ.若干螯合剂对重组合的作用

(一)观察了若干金属螫合剂对于SD与AHMP重组成琥珀酸氧化酶系的影响,发现它们都有明显的抑制作用。(二)粗氨酸与OP能抑制SD与AHMP的结合,而氰化钾不抑制它们的结合,但影响组成的琥珀酸细胞色素c还原酶系的电子传递。(三)从螯合剂对重组合的抑制作用可看出SD的铁在重组合中是有功用的。(四)SD与AHMP结合后,以正铁氰化钾为受体测出的琥珀酸脱氢酶活力较之结合前增加3—5倍。关于这有趣现象的原因曾加以讨论,但肯定的解释尚有待于进一步的研究。     

植物呼吸及代谢的研究 Ⅷ.水稻幼苗线粒体电子传递的多条途径

由差异光谱的测定结果表明,水稻幼苗的线粒体呼吸链存在细胞色素系统的所有电子载体:黄素蛋白、细胞色素 b、细胞色素 c、细胞色素 a 和细胞色素 a_3。用氧电极测定及铁氰化物还原的结果表明,在水稻线粒体中至少存在四条电子传递途径:第一条定位于线粒体内膜内侧,对鱼藤酮、抗霉素 A 及氰化物敏感;第二条也定位于线粒体内膜内侧,但对鱼藤酮不敏感;第三条能氧化外源的 NADH,对鱼藤酮不敏感,而受抗霉素 A抑制,其 NADH 脱氢酶定位于线粒体内膜外侧;第四条途径在氧化外源 NADH 时,如有外源细胞色素 c 存在,可通过外膜上对抗霉素 A 不敏感的 NADH 脱氢酶进行电子传递。由此可以得出结论,高等植物以水稻为代表,其线粒体中的电子传递途径也是多条的。     

琥珀酸脱氢酶的研究 Ⅱ.酶与辅基性质的进一步观察

(一)用结晶胰蛋白酶及结晶胰凝乳蛋白酶处理净化的水溶性琥珀酸脱氢酶,经过对甲酚抽提,硫酸汞沉淀,硫化氢分解及纸电泳纸层析等方法净化得到四种带有不同肽链的腺嘌呤异咯嗪核苷酸。从它们的组成成份的分析以及它们的性质的观察,我们认为它们与已知的腺嘌呤异咯嗪二核苷酸略有不同。肽链是连接在异咯嗪上,其连接方式异于一般异咯嗪蛋白。肽链部份的氨基酸组成的分析结果,证明它们都含有半胱氨酸。(二)琥珀酸脱氢酶中的铁处于还原状态。铁与酶朊紧密结合,它与酶活力有密切关系。(三)无机磷可增加琥珀酸脱氢酶的活力,但琥珀酸脱氰酶的活力并不是必需依靠无机磷的存在,乙二胺四乙酸与丙氨酸也有类似无机磷的作用。     

重症急性胰腺炎大鼠血浆NO、ET、TNF-α含量与亚细胞器某些指标的变化

目的：探讨一氧化氮(NO)、内毒素(ET)、TNF-α在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用机制。方法：采用1.5％去氧胆酸钠逆行胆胰管内注射建立SAP模型,观察血中NO、ET、TNF-α水平以及线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性、溶酶体酸性磷酸酶(ACP)释放率、微粒体细胞色素P450的变化,并进行相关分析。结果：与对照组比较,模型组NO、ET、TNF-α和ACP释放率明显升高,SDH活性和细胞色素P450则显著降低;相关分析显示NO、ET、TNF-α与ACP释放率、SDH、细胞色素P450具有相关性。结论：NO、ET、TNF-α可直接破坏胰腺细胞亚细胞器结构,引起胰腺损伤。     

大鼠硫酸腺嘌呤预处理心肌酶活性及SDH的电镜细胞化学观察

本实验用硫酸腺嘌呤预处理方法与经典缺血预处理方法对比分析大鼠心肌酶活性及SDH的电镜细胞化学结构。雄性SD大鼠24只,分4组,即Ⅰ组:正常对照组,Ⅱ组：缺血再灌注组;Ⅲ组：经典缺血预处理组;Ⅳ组：硫酸腺嘌呤预处理组。检测肌酸激酶（CK)、细胞色素氧化酶（CCO）及琥珀酸脱氢酶（SDH）的活性。结果显示：与Ⅱ组比,Ⅲ组、Ⅳ组CK漏出减少,CCO、SDH活性增强,细胞超微结构保存良好。结果表明：硫酸腺嘌呤预处理方法具有类似经典缺血预处理效应。     

纸片法检测大肠菌群结果判定的实验研究

纸片法检测大肠菌群是用灭菌滤纸吸收选择性培养基,细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定生长繁殖,大肠菌群在生长发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC（氯化三苯四氮唑）还原成不可逆的甲替产生红色色素,即大肠菌群在纸片上呈红色菌落,菌落周围产生黄圈是大肠菌群分解乳糖产酸使指示剂变色所致。纸片法以它经济、方便、快捷等优点给现场监测带来了极大便利,不但节省了大量人力、物力,     

[α]甘油磷酸氧化酶系的組成部份

(一) 在經徹底冲洗的兔骨骼肌製劑中,[L-α]甘油磷酸和琥珀酸的氧化彼此干涉。琥珀酸對[L-α]甘油磷酸氧化的抑制作用能因加入抑制琥珀酸脫氫酶的焦磷酸而解除。 (二) 當用細胞色素c作受體時[L-α]甘油磷酸,還原輔酶I和琥珀酸三者同時氧化時總氧化速度僅相當其中氧化速度最高者即還原輔酶I單獨氧化的速度。[L-α]甘油磷酸氧化酶系也因[2,3]二氫硫基丙醇的處理而失效。 (三) 當用[2,6]二氯酚靛酚作受體時[L-α]甘油磷酸和琥珀酸同時氧化時速度完全等於二底料單獨氧化時速度的和。[L-α]甘油磷酸的氧化不受苯代氨甲酸乙酯的影響。 (四) 本文結果說明[L-α]甘油磷酸的氧化不通過細胞色素b而通過中間因子和細胞色素c連接。     

甲基磺酸乙酯(EMS)对水稻离体幼穗影响的初步研究

用不同浓度的EMS处理水稻离体幼穗,测定培养初期的呼吸强度、细胞色素氧化酶活性和同工酶以及苹果酸脱氢酶同工酶,发现低浓度的EMS对细胞呼吸强度以及细胞色素氧化酶活性有刺激作用,而高浓度的EMS则表现为抑制效应。呼吸强度和酶活性与幼穗培养力之间具有平行关系。研究结果表明,EMS的原初生理效应是影响幼穗细胞的代谢过程,幼穗体细胞诱导频率的改变是幼穗培养初期供能系统受到影响的结果。     

转BADH基因烟草的光系统Ⅱ和呼吸酶活性变化

测定了导入甜菜碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ） 基因烟草（ Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ Ｌ．） 植株的叶绿素荧光诱导瞬变特性、呼吸酶和光呼吸酶的活性,并与亲本植株比较。结果表明,转基因植株的Ｆｖ／Ｆｏ 、Ｆｖ／Ｆｍ 和Ｆｄ／Ｆｓ 没有明显的变化;三羧酸循环中的苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶活性略有增加;末端氧化的细胞色素氧化酶活性明显提高;光呼吸途径中的羟基丙酮酸还原酶、乙醇酸氧化酶和过氧化氢酶活性明显提高。对这些变化的可能意义进行了讨论。