冠状动脉粥样硬化患者肠道菌群 与嘌呤碱基分解代谢的相关性

摘要：目的 研究冠状动脉粥样硬化患者肠道菌群结构与嘌呤碱基分解代谢的相关性。方法 选取2016年12月至2019年4月我院收治的92例冠状动脉粥样硬化患者为研究对象,测定患者嘌呤碱基代谢物含量并按照不同嘌呤碱基代谢物水平分为I组（22例,代谢物水平≤430 μmol/L）、II组（24例,代谢物水平431~480 μmol/L）、III组（22例,代谢物水平481~530 μmol/L）、IV组（24例,代谢物水平＞530 μmol/L）。选取同期到我院体检的30例健康者为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组对象肠道菌群数量,采用OTU聚类分析肠道菌群多样性。肠道菌群结构与嘌呤碱基分解代谢的相关性分析采用Pearson分析。结果 I~IV组患者嘌呤碱基代谢物水平、肠道菌群总量依次升高,差异有统计学意义（均P＜0.05）,同时各组冠状动脉脉粥样硬化患者嘌呤碱基代谢物水平、肠道菌群总量均高于对照组,差异有统计学意义（均P＜0.05）。IV组患者肠道大肠埃希菌数量高于I组、II组、III组及对照组（均P＜0.05）。IV组患者肠道幽门螺杆菌、产气杆菌数量高于I组、II组及对照组,而肠道乳杆菌、双歧杆菌数量低于I组、II组及对照组（均P＜0.05）。III组患者肠道幽门螺杆菌、产气杆菌数量高于I组,而乳杆菌、双歧杆菌数量低于I组（均P＜0.05）。III组患者肠道幽门螺杆菌、乳杆菌、双歧杆菌数量均低于对照组（均P＜0.05）。II组患者肠道产气芽胞杆菌数量高于对照组,而乳杆菌、双歧杆菌数量低于对照组（均P＜0.05）。IV组、III组患者肠道菌群OTU指数均高于对照组、I组和II组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,说明IV组、III组患者肠道菌群丰富度指数较高,菌群种类较多。Pearson分析显示嘌呤碱基水平与大肠埃希菌、幽门螺杆菌、产气芽胞杆菌、乳杆菌和双歧杆菌呈现正相关性（P＜0.05）。结论 冠状动脉粥样硬化患者嘌呤碱基水平可能影响肠道菌群结构。     

大豆多糖对双歧杆菌及人肠道菌群生长的影响

目的研究大豆多糖对双歧杆菌及肠道菌群生长的影响。方法替换Bs培养基中的碳源,分为不加糖、加葡萄糖2％、加大豆多糖2％、加大豆多糖5％、加低聚果糖2％五组,加3种双歧杆菌（长双歧、青春双歧、两歧双歧）菌液1％,测其24h后的活菌数,比较大豆多糖对双歧杆菌生长的影响;替换Bs培养基中的碳源,分为不加糖、加葡萄糖2％、加大豆多糖2％,加低聚果糖2％四组,加人体粪便菌液1％,模拟人体肠道环境厌氧培养24h后,用选择性培养基测其肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌的活菌数,观察大豆多糖对人体肠道菌群的影响。结果大豆多糖添加量为5％时对长双歧的促进作用明显优于不加糖组（P〈0．05）;大豆多糖对人体肠道各菌群的生长促进作用与低聚果糖差异无显著性（P〉0．05）。结论大豆多糖对长双歧杆菌的体外促进作用较明显;以粪菌群发酵糖试验表明,大豆多糖对乳杆菌和双歧杆菌均有促进作用,和低聚果糖作用效果相比差异无显著性（P〉0．05）,具有益生元的特性。     

双歧杆菌完整肽聚糖对小鼠骨髓来源树突状细胞分泌IL-12的影响

目的探讨相同剂量双歧杆菌完整肽聚糖（WPG）在不同时间对小鼠骨髓来源树突状细胞分泌IL-12的影响。方法将双歧杆菌WPG与小鼠骨髓来源树突状细胞共培养,分别在加入WPG后0、12、24、36、48和60h收集培养上清液,用ELISA法测定不同时间点上清液中IL-12的量。结果双歧杆菌WPG与树突状细胞共培养后,上清液中IL-12的量在24h内逐渐升高,至24h达高峰,24h后呈下降趋势;同0h组比较,12、24和36h组IL-12分泌量明显增加（P〈0.05）,而48、60h组同0h组比较差异无显著性（P〉0.05）。结论双歧杆菌WPG能够刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞分泌IL-12;双歧杆菌WPG对树突状细胞的免疫刺激存在时间效应关系。     

阿莫西林干预对婴儿优势菌在无菌小鼠体内定植的影响

目的考察阿莫西林干预对婴儿优势菌双歧杆菌及乳杆菌在无菌小鼠体内定植的影响。方法 1日龄Balb/c无菌乳鼠接种婴儿粪便悬液。饲养至7~21日龄灌胃阿莫西林(100mg/kg),对照组在同日龄给予等体积的生理盐水。利用qRT-PCR检测小鼠粪便中双歧杆菌、乳杆菌的含量。结果阿莫西林处理可显著降低乳杆菌(P0.05)、双歧杆菌(P0.05)在无菌小鼠体内定植数量,但停药后饲养至成年(53日龄)二者定植数量与对照组小鼠比较差异无统计学意义(P0.05)。结论哺乳期阿莫西林干预会导致乳杆菌、双歧杆菌在小鼠体内定植量下降,但停药后小鼠饲养至成年二者可达到正常定植量,婴儿菌群定植小鼠模型可以模拟与现有动物模型一致的阿莫西林对双歧杆菌、乳杆菌定植的影响规律。     

玉米紫色植株花色苷色素对小鼠肠道菌群的影响

目的了解玉米紫色植株花色苷色素对小鼠肠道菌群的影响。方法按中华人民共和国卫生部《保健食品检验与评价技术规范》中的动物实验调节肠道菌群功能的检验方法,观察玉米紫色植株色素对小鼠肠道中肠杆菌、乳杆菌、双歧杆菌数量的影响。结果灌服后小鼠肠道乳杆菌、双歧杆菌数量变化差异均无显著性,低剂量组肠扦菌数量明显低于灌服前（P〈0．05）,其他组肠杆菌数量变化差异无显著性。结论玉米紫色植株色素对小鼠肠道菌群可能有影响。     

加替沙星对小鼠肠道菌群的影响

目的 了解加替沙星正常剂量用药和非正常剂量用药方式对小鼠肠道菌群的影响.方法 24只昆明小鼠随机分为3组,每组8只,对照组只灌胃生理盐水,另外2组分别按正常剂量和正常剂量的一半给小鼠灌胃加替沙星溶液,7 d后无菌采取小鼠粪便,观察各组小鼠粪便中双歧杆菌、类杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌及肠球菌数量.结果 加替沙星灌胃7 d后,与给药前相比,肠杆菌和肠球菌药敏结果无明显变化.灌胃前后肠杆菌对CIP、LEV、GAT、AM、CRO、AMK、NOR均敏感,肠球菌对AM、LEV、VA、GAT均敏感,对NOR、CIP、CRO敏感性不同.2种用药方式可导致大肠埃希菌数量显著减少(P＜0.05),肠球菌数量稍有增加(P＞0.05).而双歧杆菌、乳酸杆菌和类杆菌数量无明显变化(P＞0.05).结论 加替沙星2种用药方式短时期对肠道菌群影响不大(肠杆菌除外),不易产生耐药性.其杀灭肠杆菌的作用远大于对厌氧菌的作用.     

大豆低聚糖对肠道双歧杆菌和肠杆菌的促生长作用

目的:观察大豆低聚糖和所含糖对肠道菌群中双歧杆菌、肠杆菌体外促生长作用。方法:按1％大豆低聚糖、0．36％水苏糖、0．52％蔗糖、0．11％棉子糖含量配制培养液,分别接种各试验菌株,在0、12、24小时测定各培养液吸光度A值(分光光度计．550nm)和pH值。结果:经24小时培养,加大豆低聚糖的双歧杆菌标准株和临床分离株培养液A值分别为>1．5和1．307,大于肠杆菌标准株和临床分离株的1．1和1．173,而其pH值小于肠杆菌;加水苏糖的双歧杆菌培养液A值为1．47,大于蔗糖的1．4和棉子糖的0．53。结论:大豆低聚糖促双歧杆菌生长作用大于促肠杆菌生长,水苏糖是促双歧杆菌增殖生长的主要成分。     

一株植物乳杆菌Lp3对高脂模型大鼠的益生作用

【目的】本研究通过构建大鼠高脂结构模型来探究一株植物乳杆菌Lp3的益生作用。【方法】植物乳杆菌Lp3筛选自青藏高原地区传统发酵的牦牛酸奶,初步认定Lp3是一株具有良好耐受力的降胆固醇菌株,且体外益生特性突出,本研究通过建立高脂SD大鼠模型,在饲喂试验动物高脂饲料的同时灌胃植物乳杆菌Lp3,来确定该菌株对试验动物血脂的影响效果,并同时研究其对大鼠肠道菌群、粪便水分、粪便中胆固醇和胆汁酸含量的影响,以及对肝脏组织中的胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的影响。【结果】结果表明,植物乳杆菌Lp3对大鼠没有任何明显的毒副作用,对高脂模型大鼠具有良好的降血脂效果。饲喂高脂饲料并灌喂乳酸菌Lp3组大鼠(HL)的血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量较饲喂高脂饲料组(HC)显著减少(P0.05),但是高密度脂蛋白胆固醇的含量变化并不明显。HC组大鼠与HL组及饲喂普通日粮组(对照组)大鼠相比较,HC组大鼠粪便中大肠杆菌数量明显增加,双歧杆菌、乳杆菌数量明显减少。但是灌胃乳酸菌的HL组大鼠的粪便中乳杆菌数略高于对照组,大肠杆菌和双歧杆菌数量和对照组大鼠的基本一致。表明植物乳杆菌Lp3具有维持肠道菌群平衡的作用。此外灌胃乳酸菌后HL组大鼠粪便含水量比HC组要高6.44%。HC组大鼠肝脏组织中胆固醇和甘油三酯要显著高于HL组(P0.05),说明Lp3可以减少脂类物质在肝脏组织中的沉积。从肝脏组织切片来看,也可以得出上述结论。【结论】结果表明本研究所筛选的植物乳杆菌Lp3对高脂大鼠具有值得深入研究的益生作用。     

双歧杆菌对中国对虾原肌球蛋白致敏小鼠的免疫调控作用

【目的】比较研究婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis 13.085)对中国对虾原肌球蛋白致敏BALB/c小鼠预防与治疗过敏反应的差异,探究其对致敏小鼠Treg/Th17细胞平衡及相关细胞因子的影响。【方法】采用硫酸铵盐析及等电点沉淀法纯化中国对虾原肌球蛋白(TM),将中国对虾TM和弗氏佐剂混合液腹腔注射诱发BALB/c小鼠致敏,建立动物过敏模型。将实验小鼠随机分为正常对照组、治疗对照组、双歧杆菌治疗组、预防对照组和双歧杆菌预防组。观察分析小鼠过敏症状(腹泻、肺组织HE染色比较、称重法测定小鼠体重和脾脏脏器系数变化),采用ELISA测定小鼠血清中特异性IgE、IgG2a和组胺的含量,采用流式细胞术测定脾脏T淋巴细胞亚群(Treg、Th17)数量,采用荧光定量PCR测定脾脏中Treg型和Th17型细胞因子和转录因子的表达量。【结果】纯化得到中国对虾原肌球蛋白纯度为84.93%,得率为60.88%。体内试验表明,双歧杆菌治疗组和预防组相比于对照组,腹泻和过敏症状均有明显的缓解;不同时期的双歧杆菌干预均对过敏小鼠肺组织症状有明显的改善作用,且可降低过敏小鼠的脾脏脏器系数。第56天实验周期结束后发现,相比预防对照组和治疗对照组,双歧杆菌预防组和治疗组小鼠血清中特异性IgE和组胺含量显著降低(P0.05),脾脏Treg/Th17比值显著升高(P0.05),Th17型细胞因子IL-17A mRNA表达水平显著降低(P0.01);双歧杆菌治疗组相对于治疗对照组,Treg型细胞因子CD25mRNA表达水平显著升高(P0.01)。此外,双歧杆菌治疗组血清特异性IgE及IL-17A mRNA转录水平显著低于双歧杆菌预防组(P0.05),而Treg/Th17比值及CD25 mRNA转录水平显著高于预防组(P0.05)。【结论】双歧杆菌13.085能有效缓解小鼠过敏症状,且治疗免疫调控效果优于预防效果,其作用可能通过平衡Treg/Th17细胞亚群数量,促进Treg型细胞因子表达而抑制Th17型细胞因子分泌,从而阻断炎性抗体及组胺释放。     

中药"神曲"对肠易激综合征患者肠道菌群的调节和临床疗效的研究

目的探讨中药"神曲"对肠易激综合征(IBS)病人肠道微生态环境的调节及临床治疗作用.方法(1)健康人17例,IBS(以腹泻为主型)患者34例(按ROMEⅡ诊断标准),取粪便做双歧杆菌、类杆菌、乳杆菌、肠球菌及肠杆菌的培养,对比2组菌数量的差别;(2)随机将34例患者分为3组,分别给予思密达、思密达加丽珠肠乐及思密达加神曲水煎液口服,治疗2周后,复查粪便菌培养,对比各组治疗前后的细菌数量变化,并观察临床疗效;(3)菌群的定性定量检测,采用厌氧菌及需氧菌培养法;(4)统计学处理,用SPSS 11.0软件,一般情况的比较用t检验;各菌群数量的比较用F检验;治疗有效率的比较用x2检验.结果(1)健康人组与治疗前患者组各菌群的对比IBS患者粪便中类杆菌、双歧杆菌与乳杆菌数量较健康人组增加(P＜0.05),肠球菌、肠杆菌数量较正常人组下降(P＜0.05).(2)治疗后思密达组患者粪便中厌氧菌种有所增加,需氧菌种有所减少,但差异无显著性(P＞0.05).(3)神曲组患者经治疗后,粪便中乳杆菌明显增多(P＜0.01),双歧杆菌增加(P＜0.05),肠杆菌减少(P＜0.05);与丽珠肠乐组治疗后乳杆菌、双歧杆菌及肠杆菌菌群数量比较,差异无显著性(P＞0.05);与治疗后思密达组各菌群比较,差异有显著性(P＜0.05).(4)神曲组与丽珠肠乐组,临床治疗总有效率明显高于思密达组(P＜0.05).结论中药"神曲"有调节IBS患者肠道菌群的作用,能增加肠道有益菌的数量,改善临床症状.     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.