不同因素诱导豚鼠肝中金属硫蛋白的研究

通过皮下注射的方法诱导豚鼠产生金属硫蛋白（ＭＴ）,研究了重金属元素（Ｃｄ）、微量元素（Ｃｕ,Ｚｎ）及有机试剂（ＣＣｌ４,在体内可产生自由基）等因素的诱导与豚鼠肝脏中ＭＴ不同亚型的含量及金属结合状态的变化关系．实验结果表明,微量元素及有机试剂的诱导可使豚鼠肝脏中ＭＴ１的产量明显高于ＭＴ２,说明在体内ＭＴ１在参与微量元素的储存及清除自由基功能方面比ＭＴ２强．在重金属元素诱导下体内ＭＴ１对重金属元素的结合量远远大于ＭＴ２．表明ＭＴ１的重金属解毒能力比ＭＴ２强．上述实验结果与对不同亚型ＭＴ生物学功能差异的体外研究结果相吻合．此外,无论采用上述何种因素诱导,所得ＭＴ中均结合有Ｃｕ．对Ｃｕ在ＭＴ形成过程中的作用也进行了初步探讨．     

脱金属硫蛋白与镉离子的络合作用及构象研究

用圆二色（ＣＤ）谱地研究兔肝脱金属硫属蛋白的两个亚型与Ｃｄ＾２＋的络合作用及对重组ＭＴ构象的影响。观测了ａｐｏ－ＭＴ垢巯基在空气和室温下的稳定性。在ＰＨ４．７１,镉重组ＭＴ１的ＣＤ谱特征峰在２５７ｎｍ（＋）,２３８ｎｍ（－）,２２６ｎｍ（＋）与镉诱导的天然ＭＴ１相同。在空气存在和ＰＨ７．９０的ＣＤ谱只有２４３ｎｍ（＋）一个峰。向两亚型分别加入７ｅｑＣｄ＾２＋测定ＣＤ谱随ＰＨ值的变化,发现在ＰＨ２．     

脱金属硫蛋白与二价汞离子的络合作用及构象研究

用圆二色谱研究兔肝锐金属硫蛋白的两个亚型ａｐｏ－ＭＴ１、ａｐｏ－ＭＴ２与Ｈｇ＾２＋在不同分子数比和ｐＨ值下的络合规律。发现：（１）在ｐＨ２下与Ｈｇ＾２＋重组ＭＴｓ的ＣＤ谱特征峰是３０４ｎｍ（＋）,２６０ｎｍ（－）,２５０ｎｍ（＋）。络合Ｈｇ＾２＋的数目ｎ远远超过７。任何ｐＨ值下过量Ｈｇ＾２＋的存在都将破坏ＭＴｓ的正常构象。ｐＨ值对形成和维持ＭＴｓ稳定构象的影响很大,当ｐＨ≥４．９时,ａｐｏ－ＭＴｓ     

孕酮对家猫肝金属硫蛋白的诱导

胰高血糖素、血管紧张素、糖皮质激素均可诱导鼠、兔肝肾等器官金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,ＭＴ）的合成。兔在怀孕早期ＭＴ对从母体转移Ｚｎ至兔胎儿起调节作用。孕酮是家猫妊娠过程中的主要激素,它是否对肝ＭＴ有诱导作用,研究这一课题有助于阐明孕激...     

镱和铕诱导金属硫蛋白生成的初步研究

本文研究了不同剂量的稀土元素镱和铕,通过皮下注射对兔肝中金属硫蛋白生成的影响。用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ５０柱对兔肝提取液进行分离,收集的组分用紫外分光光度法、原子吸收光谱法和ＥＬＩＳＡ法进行分析。实验结果表明,低剂量（１－３ｐｐｍ）的镱和铕不能明显地诱导兔肝内金属硫蛋白的合成,而高剂量（１０－４０ｐｐｍ）的镱和铕可以诱导兔肝金属硫蛋白合成。     

兔肝金属硫蛋白结合铅离子的圆二色性光谱研究

从锌诱导的家兔肝脏中分离纯化得到金属硫蛋白两种亚型：ＺｎＭＴ－Ⅰ和ＺｎＭＴ－Ⅱ．在酸性条件下脱金属,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５柱层析得到脱金属硫蛋白（ａｐｏＭＴｓ）．用圆二色性（ＣＤ）光谱法研究,发现两种亚型ａｐｏＭＴｓ 与Ｐｂ２＋ 的结合依赖于Ｐｂ２＋ 的加入比例及ｐＨ 值．ａｐｏＭＴ－Ⅰ在ｐＨ３～５之间,ａｐｏＭＴ－Ⅱ在ｐＨ４～６之间与Ｐｂ２＋ 结合形成特征簇合物Ｐｂ７ＭＴｓ,其ＣＤ谱图特征峰位于３１６ｎｍ （－ ）,２７０ ｎｍ （＋ ）,２４５ ｎｍ （＋ ）及２２５ ｎｍ （－ ）,提示解铅中毒的最佳条件应控制在弱酸性环境．不同亚型ａｐｏＭＴｓ 与Ｐｂ２＋ 的结合方式各不相同：Ｐｂ２＋ 与ａｐｏＭＴ－Ⅰ的结合采取平均分配的方式,而与ａｐｏＭＴ－Ⅱ则为选择性结合方式,表明这两种亚型在解铅毒功能上存在差异．     

镱和铕诱导金属硫蛋白生成的初步研究

本文研究了不同剂量的稀土元素镱和铕,通过皮下注射对兔肝中金属硫蛋白生成的影响。用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０柱对兔肝提取液进行分离,收集的组分用紫外分光光度法、原子吸收光谱法和ＥＬＩＳＡ法进行分析。实验结果表明,低剂量（１－３ｐｐｍ）的镱和铕不能明显地诱导兔肝内金属硫蛋白的合成,而高剂量（１０－４０ｐｐｍ）的镱和铕可以诱导兔肝金属硫蛋白合成。     

力竭性游泳对大鼠睾丸金属结合蛋白的诱导及其与睾酮和锌…

本研究通过观察大鼠力竭性游泳后睾丸金属结合蛋白（ＴＭＢＰ）、睾酮和锌含量的动态变化,探讨ＴＭＢＰ的被诱导性、诱导特点以及与睾酮合成和锌代谢的关系。结果显示：大鼠力竭性游泳后,ＴＭＢＰ呈一过性升高,峰值在游泳后６ｈ处,达安静时４ １６倍;游后１２ｈ已降回原有水平。这表明ＴＭＢＰ可被力竭性游泳所诱导,并减期不至６ｈ。ＴＭＢＰ诱导性的发现对认识ＴＭＢＰ的功能具有重要的意义。大鼠睾丸酮在力竭性游泳后即刻急     

乙型肝炎病毒包膜M蛋白在巴斯德毕德毕赤酵母中的表达

转化了乙肝病毒ｐｒｅＳ２－２基因的重组巴斯德毕赤酵母菌株经甘油培养基充分增殖,然后转移到甲醇培养基中进行诱导表达,破碎细胞并提胞内蛋白,经ＥＬＩＳＡ和ＷｅｓｔｅｎＢｌｏｔ检测证明有４株ＧＳ１１５／ＨＩ＾＋ＭＵＴ＾＋表达了ＨＢＶ Ｍ蛋白。     

金属诱导条件下刺猬各组织器官金属硫蛋白含量的比较分析

本文采用Ａｇ－Ｈｂ（血红蛋白）饱和法,Ｃｄ－Ｈｂ饱和法、Ｃｕ－Ｈｂ饱和法及酶联吸附免疫法定量分析刺猬各组织器官中金属硫蛋白含量。结果表明,肌肉注射三种金属盐均有明显的诱导金属硫蛋白合成的作用,诱导强度为Ｃｄ＾２＋＞Ｚｎ＾２＋＞Ｃｕ＾２＋,诱导后金属硫蛋白含量分布规律一致,即肝＞肾＞睾丸＞脾＞心、肺、胃、膀胱、胆汁、大肠、小肠、肌肉、血液,其中镉诱导肝的金属硫蛋白含量每克湿组织约１．８４ｍｇ,为肾的     

不同亚型ZnMT使脱金属碳酸酐酶复活的比较研究

通过荧光探针、酶的活力测定及对金属硫蛋白（ＭＴ）分子中金属与巯基配位键的特征吸收检测,比较研究了锌诱导兔肾不同亚型ＺｎＭＴ使脱金属碳酸酐酶（ＡｐｏＣＡ）复活的能力大小。结果表明,不同亚型ＺｎＭＴ对ＡｐｏＣＡ具有不同的反应活性,ＭＴ１比ＭＴ_２对于ＡｎｏＣＡ的复活具有更强的反应活性,此结论与我们在研究不同亚型ＭＴ清除自由基时的结果相一致。这两种亚型ＭＴ在反应活性上的差异,很可能与其在生物体内功能上的分化密切相关。     

幽门螺杆菌热休克蛋白70基因的克隆与表达

从幽门螺杆菌染色体ＤＮＡ,用ＰＣＲ方法扩增得到了热休克蛋白７０基因。序列分析表明,我国Ｈｐ临床分离株Ｙ２的热休克蛋白７０基因与经全基因组序列测定的两株幽门螺杆菌２６６９５和ｊ９９有高度同源性。将该基因克性到融合分泌表达载体ｐＭＡＬ－ｐ２中,转化大肠杆菌,在ＩＰＴＧ诱导下表达出与预期大小相符的１１３ｋＤ的融合表达蛋白。该蛋白质３０℃诱导表达５ｈ后,可达到细菌周质总蛋白质的１９．４％。用免疫印迹分析表     

FT-Raman光谱研究金属硫蛋白的折叠过程

为探索金属硫蛋白（ ＭＴ） 的折叠过程,寻找含硫蛋白折叠的动力,采用调节溶液ｐＨ 值的方法,使ＭＴ 处于不同的折叠状态。 测定了在ｐＨ１ ．０ － ７ ．５ 时溶液的Ｒａｍａｎ 谱, 进而得出ＭＴ 结构的变化。实验数据表明,在ｐＨ＝ ４ 时蛋白质的二级结构出现了两个转折点,提示ＭＴ 折叠过程中有两个中间态存在。根据实验结果,对ＭＴ 主链折叠的动力进行了讨论。     

金属硫蛋白的研究进展及应用前景

金属硫蛋白（Ｍｃｔａｌｌｏｔｈｅｏｎｅｉｎ,简称ＭＴ）是一类广泛存在于生物体内的低分子量、富含ＣｙＳ、能被金属诱导的金属结合蛋白．自从１９５７年ｈｏｏｓｈｅｓ等人ｔ‘］在马肾脏中首次发现ＭＴ以来,人们对不同来源的ＭＴ进行了较系统的研究．鉴于ＭＴ具有广泛的应用前景,现将有关ＭＴ的研究进展作简要综述．！ＭＴ的分类和命名１．ＩＭＴ的分类根据ＭＴ的结构差异,一般将其分成３类Ｉ’］第１类：ＭＴ的氨基酸序列中的半就氨酸位置与最先从马肾中分离的ＭＴ的氨基酸序列中的半脱氨酸位置紧密相关的多肽．所有哺乳动物的ＭＴ…     

铜硫蛋白在铜抑瘤中的作用

由铜配以牛黄、麝香等中药组成的铜复方对肝癌等恶性肿瘤具有明显的疗效。但是,细胞内过量的铜会带来毒性,金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,ＭＴ）可以与铜紧密结合形成Ｃｕ（Ｉ）－Ｓ簇,ＭＴ被认为在控制细胞内钢的代谢上有重要的作用。铜和中药复方都可以诱导金属硫蛋白的合成,其中铜的诱导能力更为明显。而且,ＭＴ具有特殊的化学结构,其中的巯基具有亲核性,使得ＭＴ易与某些自由基相互作用．在生物体内ＭＴ能抗辐射损伤,清除ＯＨ自由基,防止脂质过氧化等．因此,铜硫蛋白可能在铜的抑瘤过程中起着重要的作用。     

镉诱导威廉环毛蚓（Pheretima guillelmi）金属硫蛋白的分离纯化及特性研究

蚯蚓威廉环毛（ｐｈｅｒｅｔｉｍａ　ｇｕｉｌｌｅｌｍｉ）经皮下注射ＣｄＣｌ２溶液诱导后,整体匀浆,再经热沉淀、乙醇沉淀后,经凝胶过滤Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－５０柱层析,得两个镉结合蛋白峰,分子量依次为４３ｋＤ及１９ｋＤ。这两个组份再分别经ＤＥＡＥ　Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　Ｆａｓｔ　Ｆｌｏｗ柱层析,各得三个镉结合蛋白峰。根据光谱学特征、巯基含量及氨基酸组成等分析,表明凝胶过滤第二峰为金属硫蛋白（ＭＴ）,其经ＤＥＡＥ柱层析所得三个峰为ＭＴ三个亚型,Ｎ末端分别为Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ａｌａ。     

镉诱导威廉环毛蚓（Pheretima guillelmi）金属硫蛋白的分离纯化…

蚯蚓威廉环毛（Ｐｈｅｒｅｔｉｍａ ｇｕｉｌｌｅｌｍｉ）经皮下注射ＣｄＣｌ２溶液诱导后,整体匀浆,再经热沉淀、乙醇沉淀后,经凝胶过滤ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析,得两个镉结合蛋白峰,分子量依次为４３ｋＤ及１９ｋＤ。这两个组份再分别经ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ柱层析,各得三个镉结合蛋白峰。根据光谱学特征、疏基含量及氨基酸组成等分析,表明凝胶过滤第二峰为金属硫蛋白（ＭＴ）,其经ＤＥ     

力竭性游泳对大鼠睾丸金属结合蛋白的诱导及其与睾酮和锌的关系

本研究通过观察大鼠力竭性游泳后睾丸金属结合蛋白（ＴＭＢＰ）、睾酮和锌含量的动态变化,探讨ＴＭＢＰ的被诱导性、诱导特点以及与睾酮合成和锌代谢的关系。结果显示：大鼠力竭性游泳后,ＴＭＢＰ呈一过性升高,峰值在游泳后６ｈ处,达安静时的１６倍;游后１２ｈ已降回原有水平。这表明ＴＭＢＰ可被力竭性游泳所诱导,半减期不到６ｈ。ＴＭＢＰ诱导性的发现对认识ＴＭＢＰ的功能具有重要的意义。大鼠睾丸睾酮在力竭性游泳后即刻急剧下降,以后逐渐恢复。此恢复过程伴有ＴＭＢＰ的升高。考虑睾酮合成中对锌的高度依赖性以及ＴＭＢＰ结合锌的功能,ＴＭＢＰ很可能在睾酮的合成中参与锌的摄取、转运和供给过程。大鼠ＴＭＢＰ在力竭性游泳后６ｈ处于高峰时,血清锌却处在低谷,这说明ＴＭＢＰ很可能从血清中摄取锌离子,参与应激后锌的再分配活动。     

人骨形成蛋白－2AcDNA基因工程产物诱骨活性的形态学证明

人骨形成蛋白２Ａ（ｈｕｍａｎｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ２Ａ,ｈＢＭＰ２Ａ）ｃＤＮＡ３′端５６７个核苷酸插入表达载体ＰＳＧ４Ｔ－２中,在大肠杆菌中获得１５％的表达,表达产物为２１ＫＤ的蛋白质,经包涵体洗涤,尿素变性和复性后,取１ｉｎｇ表达产物,植入小鼠股四头肌中,２１天后取植入区进行组织切片观察,证实这种基因工程产物具有良好的异位骨诱导活性。     

雪松聚球藻金属硫蛋白的纯化及其性质的研究

在雪松聚球藻的培养基中逐渐增加氯化镉的浓度以诱导藻细胞内金属硫蛋白的合成,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０,ＤＥＡＥ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５柱层析,获得的ＭＴ没有亚型,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析是高度均一的。每个蛋白分子约含５个Ｃｄ原子,１０个巯基,分子量约为７．６ＫＤ,等电位ｐＨ４．５左右,半胱氨酸含量约占总氨基酸量的１５．５％,还含有少量的芳香族氨基酸,ＭＴ的最大紫外吸收在２５