不同温度及时间对液状保存血液质量的影响

目的：研究不同温度对血液液状保存时保存损害机制的影响,并探讨相应的防范措施。方法：取10名健康献血员静脉血,置于CP2D－A保存液中,于0℃和4℃环境条件下,分别于设定的时间（第1周末、第3周和第6周末）内取样检测GSH－Px、LPO、TSH、红细胞膜收缩蛋白、膜脂流动性等指标。结果：固定温度条件下随时间的延长血液过氧化反应增强,保存损害作用增加;同一时期内保存损害作用随温度的降低而减轻,以4℃组血液老化明显。结论：血液过氧化反应随保存期的延长而增加,随保存温度的降低而改善,0℃组保存血液的质量优于4℃组。     

保存介质和温度对西伯利亚鲟卵子短期保存的影响

研究了不同保存介质(体腔液CF、Hepes液、RMS液)、温度(4℃、16℃)和保存时间(4 h、8 h、16 h、24 h)对西伯利亚鲟卵子短期保存的影响.结果显示:保存介质、温度和时间对卵子受精率、孵化率和初孵仔鱼畸形率有显著性影响(P<0.05),受精率、孵化率均随保存时间的延长而下降,畸形率上升.16℃条件下保存卵子受精率、孵化率和畸形率均高于4℃,但4℃下卵子的保存时间较16℃下长.研究表明,采用根据西伯利亚鲟体腔液生化成分配制的Hepes液作为保存介质,于16℃下保存4 h为西伯利亚鲟卵子的最佳保存条件,此时受精率、孵化率和畸形率分别为86.36%、94.74%和0.     

符合大肠癌早期无创分子诊断要求的粪便DNA样本贮存条件考察

目的:考察在不同温度下储存时间和反复冻融对粪便中人基因组DNA含量的影响。方法:1.将粪便样本在室温、4℃、-40℃和-70℃条件下分别放置不同时间和-40℃条件下保存并反复冻融后,使用QIAamp DNA Stool Mini Kit试剂盒提取得到粪便DNA,通过实时荧光定量PCR体系对人KRAS基因定量确定人基因组DNA含量,评价粪便样本不同冻存条件对其中人基因组DNA含量的影响。2.将粪便DNA样本在4℃和-40℃条件下分别放置不同时间和-40℃条件下保存并反复冻融后,评价粪便DNA样本不同冻存条件下对其中人基因组DNA含量的影响。结果:1).粪便样本常温放置2小时,其中人基因组DNA即发生明显降解(P0.01),4℃可保存3天左右,-40℃可保存4周,-70℃可保存3个月以上,粪便反复冻融第3次,其中人基因组DNA降解具有统计学意义(P0.05)。2).粪便DNA 4℃可保存3天,-40℃可保存4周,粪便DNA反复冻融第4次,其中人基因组DNA降解具有统计学意义(P0.05)。结论:符合大肠癌早期无创分子诊断要求的粪便DNA贮存条件:粪便样本室温收集后尽快保存;短期可处理的粪便样本存放在4℃条件下(3天内);暂无法处理则存于-40℃(1个月内);粪便样本长期保存在-70℃条件下,可保存3个月。     

11种灭活型样本保存液对病毒核酸保护效果的比较

收集11种不同厂家的灭活型样本保存液,将甲型流感病毒加入保存液和生理盐水中,在4℃、25℃和37℃条件下保存0 h、2 h、4 h、6 h和24 h后,分别提取各组的病毒核酸,并通过逆转录实时荧光PCR检测病毒载量变化,以探究不同样本保存液对病毒核酸保护效果是否存在差异。结果发现不同样本保存液中的病毒载量随保存时间和温度变化存在显著差异。据此可将11种灭活型样本保存液的保存效果分为四类：(1)优秀产品：在任一温度（4℃、25℃、37℃）条件下,即使保存24h时病毒核酸都未发生明显降解,占比27.2%(3/11);(2)良好产品：低温（4℃）和室温（25℃）情况下核酸未出现降解,但在高温（37℃）条件下6 h后保存效果明显下降,占比27.2%(3/11);(3)合格产品：低温（4℃）条件下对病毒核酸具有较好的保护效果,但在室温（25℃）和高温（37℃）情况下随保存时间延长其保护效果显著下降,占比18.1%(2/11);(4)不合格产品：任一保存条件下对病毒核酸的保护效果都较差,甚至加入病毒后立即导致病毒核酸发生快速降解,占比27.2%(3/11)。以上结果说明不同厂家样本保存液对病毒核酸...     

唐菖蒲花粉低温保存过程中的生理生化特征

以唐菖蒲切花栽培品种嫦娥粉花粉为实验材料,比较其花粉各项生理生化指标在-80℃和4℃贮藏过程中(360 d)的变化,以探讨2种保存条件下花粉保存效果出现显著性差异的生理生化原因.结果表明:唐菖蒲花粉在2种保存温度条件下,随保存时间的延长,各项生理生化指标表现出显著差异.与4℃保存处理相比,-80℃保存处理抑制了花粉中MDA的积累,增强了超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性,减轻了花粉膜质过氧化和膜系统受伤害程度,同时提高了花粉可溶性蛋白质和可溶性糖的含量,增强了花粉的抗冻能力,从而使低温保存花粉活力维持在相对较高水平,这或许是-80℃条件下花粉保存效果较好的部分生理生化原因.     

SOD对4℃保存人红细胞损伤的防护作用研究

目的：探讨SOD对延时保存红细胞损伤防护作用的机理。方法：取义务献血人员静脉血,置4℃冰箱保存。保存前后不同时期用标准方法分别检查各项指标,用生物荧光素标记红细胞,测定24h活存率。实验分3组：ACD和／或GMA、抗氧化剂（SOD）组。结果：SOD组保存75d,无氧糖酵解率维持在保存前的86．2％,ATP为56．4％,PK为64．3％,明显高于GMA或ACD组。保存75d整体回输后24h活存率为86．1％,与GMA保存42d(89.1%)结果接近。结论：用抗氧化剂保养液在4℃条件下保存人血红细胞从42d延长到75d,红细胞无氧糖酵解率、ATP、PK和整体回输后24h活存率等均与42d保存方相符,为红细胞的活存提供了理论根据。     

保存方法和保存时间对竹子核DNA含量 （2C-值） 检测的影响

竹子核DNA含量（2C 值）的检测对竹资源的科学研究具有重要意义,而大部分野外采集的样本,通过不同方法保存后,均使用流式细胞仪技术进行核DNA含量检测。本文选取麻竹（Dendrocalamus latiflorus）、筇竹（Chimonobambusa tumidissinoda）和毛花酸竹（Acidosasa purpurea）三种竹子样本,使用硅胶保存法和Sample protector试剂保存法分别保存4d、8d、12d、16d后,采用流式细胞术检测样品2C 值。CV值可以用来反映数据检测结果质量,是对检测结果准确性以及精确性的评价标准,我们通过样品CV值的大小和2C 值的变异率来评价保存方法和保存时间对竹子2C 值检测的影响。方差分析显示,保存时间对CV值具有显著性影响（P < 0001）,随着保存时间增大,CV值增大;保存方法对2C 值变异率有显著性影响(P < 0001)。硅胶保存法保存后的样品,测量值比新鲜材料大;Sample protector试剂保存法保存后,测量值比新鲜材料小。因此,随着保存时间的增加,样品CV值增大,引起检测结果质量降低。研究发现,硅胶保存法和Sample protector试剂保存法会影响竹子样本2C 值大小,但2C 值大小的变化小于10%。     

保存方法和保存时间对竹子核DNA含量（2C-值）检测的影响

竹子核DNA含量（2C-值）的检测对竹资源的科学研究具有重要意义,而大部分野外采集的样本,通过不同方法保存后,均使用流式细胞仪技术进行核DNA含量检测。本文选取麻竹（Dendrocalamuslati—florus）、筇竹（Chimonobambusatumidissinoda）和毛花酸竹（Acidosasapurpurea）三种竹子样本,使用硅胶保存法和Sampleprotector试剂保存法分别保存4d、8d、12d、16d后,采用流式细胞术检测样品2c．值。CV值可以用来反映数据检测结果质量,是对检测结果准确性以及精确性的评价标准,我们通过样品CV值的大小和2c-值的变异率来评价保存方法和保存时间对竹子2c-值检测的影响。方差分析显示,保存时间对CV值具有显著性影响（P〈0．001）,随着保存时间增大,CV值增大;保存方法对2c-值变异率有显著性影响（P〈0．001）。硅胶保存法保存后的样品,测量值比新鲜材料大;Sampleprotector试剂保存法保存后,测量值比新鲜材料小。因此,随着保存时间的增加,样品CV值增大,引起检测结果质量降低。研究发现,硅胶保存法和Sampleprotector试剂保存法会影响竹子样本2c．值大小,但2c-值大小的变化小于10％。     

保存温度和时间对狂犬病疫苗效力稳定性的影响

对人用精制狂犬病疫苗和浓缩狂犬疫苗分析在－33℃,2－8℃,25℃,37℃保存0－6个月进行效力的稳定性观察,结果表明随存放时间及温度增加,两者的生物活性均有不同程度的降低。在2－8℃条件下疫苗的效力明显比其它温度稳定（P＜0．02）;精制疫苗与浓缩疫苗比较,其效力有更稳定的趋势。     

不同条件下木兰科植物种子的保质期研究

在室温下测定10种木兰科植物种子的储藏时间及在室温、4 ℃、-18 ℃三种温度下测定其中5种木兰科植物种子的储藏时间。结果表明,10种木兰科植物种子在室温条件下的发芽率、发芽势和保存时间均差异较大。5种木兰科植物种子在4 ℃贮藏条件下发芽率最高,发芽率降低最慢,保存时间最长;其次是-18 ℃储藏,室温储藏最差;随着贮藏时间的延长,种子发芽率下降,但发芽所需天数减少,出土整齐度提高,表明其种子具有休眠现象。美丽紫玉兰和深山含笑均在4 ℃下发芽势最高,在室温下次之,在-18 ℃下最差;14 d是5种木兰科植物种子出土萌发最旺盛的时间,不同的温度对种子达到此时间的影响不大,因此,4 ℃低温贮藏和保证高发芽率是提高种子发芽势的有效途径。木兰科植物种子以随采随播的发芽率最高;其萌发前所需休眠时间因种类不同而不同;在不同保存条件下,种子保存时间差别较大。     

微生物菌种保藏方法及关键技术

菌种是国家的重要生物资源,也是生产、教学和科学研究的基本材料。为确保菌种的质量和活力,需要正确的菌种保藏方法。阐述了菌种保藏的重要性、菌种保藏常见方法及其存在的问题,探讨了常用菌种的保藏技术及关键点,好的保藏方法可延长菌种的保存时间,又可防止菌种退化。     

新鲜天麻贮藏保鲜的影响因素和相关技术研究进展

鲜天麻是一种营养丰富、功效显著的药食同源药材,但是鲜天麻组织脆嫩、富含微生物,在贮藏和运输过程中极易受到机械损伤和微生物侵害而腐败变质,严重影响其食用和商品价值,因此研究鲜天麻的高效保鲜技术延长其货架期是亟待解决的产业瓶颈问题。综述分析鲜天麻的物理损伤、酶促褐变和内源微生物等腐败机制,并重点阐述了现有物理保鲜技术（臭氧、低温、气调、包装、超高压、⁶⁰Go-γ辐照处理）、化学保鲜技术（化学保鲜剂、涂膜技术）以及生物保鲜技术（生物保鲜剂、组培技术）的作用原理、方式、保鲜效果、技术缺陷等,旨在为新鲜天麻保鲜技术研究提供参考,促进鲜天麻资源发展。     

木犀草素改善低温下离体大鼠心脏保存效果的研究

目的:研究木犀草素是否能改善心脏停搏保存液(UW液)对离体大鼠心脏的低温保存效果。方法:将40只成年SD大鼠随机分成4组(n=10):对照组(UW组)、7.5μmol/L木犀草素小剂量组,15μmol/L木犀草素中剂量组及30μmol/L木犀草素大剂量组。利用Langendorff离体心脏灌流法,观察心脏在4℃含或不含木犀草素的UW液中保存12 h复灌60 min后心脏功能及超微结构变化,比较心脏冠脉流量(CF)、心肌含水量及冠脉流出液中磷酸肌酸激酶(CK)的释放量。结果:与对照组比较,添加木犀草素后,复灌期心脏的收缩功能(LVPSP,+dp/dtmax)与心脏舒张功能(-dp/dtmax)、冠脉流量在多个复灌时间点均优于对照组,心率在复灌60 min时也显著优于对照组;复灌过程中磷酸肌酸激酶的漏出量及低温保存后心脏超微结构的损伤也均明显低于对照组;随灌注时间延长木犀草素组心脏结构和功能的改善有剂量依赖性趋势;木犀草素对心肌含水量没有影响。结论:木犀草素能显著改善UW液对离体大鼠心脏的低温保存效果,对心脏有明显的保护作用,以30μmol/L的木犀草素大剂量组作用最显著。     

硝酸纤维膜和丙酮沉淀尿蛋白质保存方法的比较

硝酸纤维膜法是一种简单、快速、经济的尿液蛋白质保存方法,但其与传统尿液蛋白质丙酮沉淀方法的差异有待进一步研究。相同尿液分别经硝酸纤维膜法和丙酮沉淀法制备尿蛋白质,经液相串联质谱分析鉴定蛋白质,采用谱图数定量,研究两种不同方法的差别。结果显示硝酸纤维膜法和丙酮沉淀法鉴定蛋白质数目几乎相同,鉴定蛋白质在谱图数的分布上几乎相同,鉴定蛋白质在蛋白质变异系数的分布上也几乎相同。因此,硝酸纤维膜法处理尿蛋白质与丙酮沉淀法基本一致,可以应用于大规模临床尿液样本的保存。     

外泌体提取及保存技术研究进展

外泌体是多种活细胞经过"内吞–融合–外排"等一系列过程主动向胞外分泌的纳米级双层膜结构小囊泡,广泛存在于血液和尿液等生物体液中。因其携带着多种蛋白质、核酸和脂质等生物活性分子,所以外泌体不仅在细胞间物质交换和信息传递中发挥重要作用,而且对疾病诊断、预后预测和治疗管理等均具有提示意义。外泌体的高效提取、分离和完整保存是研究其在机体内生物学作用和功能的重要前提,也是制约基于外泌体的临床检测技术和治疗载体技术的关键。该综述将针对目前国内外外泌体提取和保存领域的最新研究进展加以综述,并对其特点进行对比和分析,以促进外泌体研究方法的标准化,以及相关技术的研发和应用拓展。     

Characteristics of fresh and cryopreserved Siberian tiger (Panthera tigris altaica) semen and its seminal plasma chemical constituents

Semen was collected by electroejaculation from four Siberian tigers. The cells were separated from the seminal plasma by centrifugation, extended in TEST-yolk buffer with 4% glycerol and frozen for a Sephadex filtration assay. The seminal plasma was analyzed for chemical constituents and characteristics. There were significant differences between tigers for volume, cell concentration, pre- and post-thaw motility, total cells, percent live/normal cells, pH, specific gravity, albumin, alkaline phosphate, alanine transaminase, aspartate transaminase, total protein, urea nitrogen, potassium, chloride, carbon dioxide and glucose. There were no differences between tigers for total live cells, osmotic pressure, acid phosphatase, sodium, phosphorus, calcium, or creatinine. There were significant differences between months only for pre-freeze motility, albumin, chloride, carbon dioxide, and calcium. The differences in seminal plasma chemistry may be useful for semen quality evaluation after successful breeding techniques have been developed. As the data base of information concerning the reproductive physiology of tigers increases, application of advanced technologies may become a reality.     

The first report of epipunctae in non-plaesiomyid brachiopods from the lowest Silurian of southeastern China

Epipunctae are microscopic perforations that do not penetrate the shell but are confined to the outer layers of the shell. They have been known previously only in the orthidine family Plaesiomyidae. The striated walls of epipunctae are considered unique to brachiopods and thus of significance for the study of stem-group brachiopod. In this study, we report the first occurrence of epipunctae in a non-plaesiomyid brachiopod based on a well-preserved external mould of Cathaysiorthis yushanensis from the lower Silurian Shiyang Formation of Jiangxi, southeastern China. The species belongs to the Family Cathaysiorthidae which differs from the Family Plaesiomyidae in many aspects especially in dorsal internal structures. The new data imply that epipunctae may be more widespread in orthide brachiopods than previously thought, strengthening the notion that this is a plesiomorphic character of the brachiopod shell. The discovery of epipunctae, however, depends on excellent preservation of the outer surface of the shells as well as careful cleaning and observation.     

鲜切花的衰老与保鲜(综述)

本文概述鲜切花在瓶插过程中水分代谢、物质代谢、植物激素,细胞膜变化与切花衰老之间的关系,以及鲜切花保鲜技术的研究进展。     

Isolation and characterization of phages infecting Bacillus cereus

Aim: To isolate and characterize bacteriophages (phages) that infect the foodborne pathogen Bacillus cereus. Methods and Results: Two phages were isolated from soil based on their ability to form plaques on four indicator hosts including Bacillus thuringiensis subsp. israelensis, and three isolates of B. cereus. The purified phages were characterized by morphology, host range, single‐step growth curves and restriction enzyme digestion profiles. The phages appeared to be of the Myoviridae family based on their structure in electron micrographs. The phages lysed bacteria of several species, produced average burst sizes of 322 and 300 phages per infected cell, and both had genomes over 90 kb. The phages were chloroform‐resistant and stable at 4°C. They reduced the concentration of B. cereus in mashed potatoes by >6 log₁₀ CFU ml^?1 within 24 h at room temperature, when applied at a high concentration. Conclusions: The relatively narrow host range within B. cereus might mean that these phages need to be used as part of a ‘cocktail’ of phages for biocontrol, but their efficacy for the control of their host in food was demonstrated. Significance and Impact of the Study: This is the first report of biocontrol by phages of B. cereus in food.     

Hypothermic perfusion preservation: the future of organ preservation revisited?

Hypothermic perfusion preservation (HPP) was an integral step in the development of early clinical transplantation programmes, and considerable progress was made in understanding the basic principles underlying the technique. In subsequent years, the development of better preservation solutions for cold hypoxic storage, along with pragmatic choices made on grounds of costs and logistics, saw a fall in the application of HPP. More recently, the acute shortage of suitable organ donors and the inevitable pressure to use organs from sub-optimal (or expanded criteria) donors, has forced a re-evaluation of HPP, and the development of a new generation of HPP machines and associated perfusion solutions. This review sets out the historical development of HPP across the range of organs in which the method was originally investigated, describes the biological benefits and drawbacks associated with HPP, and sets out the most recent literature on the topic (including comments on the interest in use of higher temperatures in organ perfusion).