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相似文献
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1.
以大豆( Glycine max L.) 下胚轴为材料, 采用二相法制得高纯度质膜微囊。实验发现,K+ 对质膜H+_ATPase水解活力和转运活力刺激差别显著,对转运活力刺激850% , 对水解活力仅刺激28 .2% 。动力学结果表明,有K+时ATP水解的Km 值为0.70 mmol/L,Vmax 为344 .8 nmol Pi·mg-1 protein·min-1 ; 无K+ 时ATP水解的Km 值为1 .14mmol/L, Vmax为285.7 nmol Pi·mg-1 protein·min-1 。K+ 对ATP水解的最适pH 值也有影响,有K+ 时为6 .5 ,无K+ 时降低到6.0 。进一步实验发现,K+ 对羟胺和钒酸钠的抑制作用影响较大,K+ 可以提高质膜H+_ATPase 对羟胺和钒酸钠的敏感性。结果表明,K+ 可以调节大豆下胚轴质膜H+_ATPase 水解与转运活力之间的偶联程度  相似文献   

2.
消炎痛作为一种可引起胃粘膜急性病变的药物,用分离提纯的猪胃H+/K+-ATPase证明,它可以显著的抑制此酶的活力,0.1mg/mL时即可抑制酶活力27%,0.5mg/mL时可抑制全部活力,其K(0.5)为0.18mg/mL。消炎痛对H+/K+-ATPase的抑制随30℃时预保温时间的延长而加剧,10min预保温可抑制总活力的50%。消炎痛并不影响H+/K+-TAPase的转换温度(39℃)以及最适pH(约pH7.5),但酸性条件下消炎痛对H+/K+-ATPase抑制比碱性条件下强烈。在我们的实验条件下,消炎痛对H+/K+-ATPase的抑制与H+/K+-ATPase量成正比,它不影响酶的Km值(0.11mmol/L),而是显著降低Vmax,因而它是此酶的可逆性非竞争性抑制剂,其Ki为0.32mmol/L。  相似文献   

3.
跨膜Ca~(2+)梯差对大豆下胚轴质膜H~+-ATPase活力的影响   总被引:8,自引:0,他引:8  
采用两相法得到高纯度封闭的大豆下胚轴质膜微囊,研究了跨膜Ca2+梯差对质膜H+-ATPase质子转运和ATP水解活力的影响。结果表明,在1000:0.1,1000:0.5,1000:1及1000:10(μmol/L:μmol/L)几种梯差下,随着跨膜钙梯差的减小,质膜H+-ATPase质子转运活力逐步降低。然而,上述几种梯差对H+-ATPase水解活力的影响却很小。进一步研究发现,1000:0.1及1000:1(μmol/L:μmol/L)两种梯差对Km值没有影响,但K+对H+-ATPase的激活作用在两种梯差下存在显著差别。MC540荧光、DPH荧光偏振结果表明,跨膜钙梯差影响着膜脂的聚集状态和流动性。本文对跨膜Ca2+梯差对于大豆下胚轴质膜H+-ATPase水解与质子转运活力影响的可能机制进行了讨论。  相似文献   

4.
小麦根质膜H^+—ATPase的部分纯化   总被引:2,自引:0,他引:2  
以小麦(TriticumaestivumL.)根为材料,采用不连续蔗糖密度梯度离心法制备高纯度质膜微囊。质膜经TritonX100和KCl处理后,再用Zwitergent314增溶H+ATPase,最后用硫酸铵沉淀得到部分纯化的质膜H+ATPase。SDSPAGE结果表明,经过上述步骤纯化,分子量为94kD的膜蛋白组分得到富集;与质膜相比,其含量提高15.7倍。部分纯化的质膜H+ATPase可以水解ATP,受K+刺激,并被N,N′dicyclohexylcarbodimide(DCCD)抑制;ATP水解活力被Na3VO4抑制95%,但不被NaN3、NaNO3和Na2MoO4抑制。  相似文献   

5.
盐胁迫降低无花果振荡培养细胞培养液PH添加质膜H^+-ATPase活性抑制剂Na3VO4则抑制盐诱导的培养液PH下降,表明盐诱导培养液H下降主要是细胞质膜H^+-ATPase活性增加的结果。NaCl处理提高活体细胞质膜H^+-ATPase活性,而降低膜微囊H^+-ATPase活性,培养液中添加Na3VO4 50μmol/L完全抑制盐胁迫下无花果细胞游离脯氨酸只累,但添加更高浓度Na3VO4,则提高  相似文献   

6.
玉米细胞质分子伴侣Hsp70的ATPase活性   总被引:1,自引:0,他引:1  
玉米胚乳细胞中纯化的细胞质Hsp70蛋白有低水平的ATPase活性,它在50℃、PH5.8、20mmol/L的KCl条件下活性最高,Ca^2+和Mg^2+抑制其活性。大肠杆菌DnaJ蛋白能将玉米细胞质Hsp70的ATPase活性提高6倍,而GrpE蛋白对其影响很小。8种不同的人工合成多肽均能刺激该蛋白折ATPase活性,增加幅度从2.5倍到10倍痫水性不同的氨基酸对Hsp70的ATPase活性影响  相似文献   

7.
在渗透势为-0.5和-1.0MPaPEG处理下,不抗旱的郑引一号小麦根PMH+-ATPase活性分别下降45%和65%,抗旱品种陕合六号则增加了11%和12%。小麦根组织H+分泌与PMH+-ATPase活性的变化趋势基本一致,即随着胁强增加,郑引一号H+分泌下降,陕合六号H+分泌是先升高后略降。Na3VO4和DCCD对H+分泌有不同程度的抑制,品种之间没有明显的差异。外源电子受体Fe(CN)63-的加入促进了小麦根H+分泌,陕合六号增加25%-39%,郑引一号增加21%-45%。与此同时,Na3VO4没有表现出对H+分泌的抑制作用。  相似文献   

8.
玉米胚乳细胞中纯化的细胞质Hsp70蛋白有低水平的ATPase 活性,它在50 ℃、pH5 .8 、20 mmol/L的KCl 条件下活性最高,Ca2+和Mg2+ 抑制其活性。大肠杆菌DnaJ蛋白能将玉米细胞质Hsp70 的ATPase 活性提高6倍,而GrpE 蛋白对其影响很小。8 种不同的人工合成多肽均能刺激该蛋白的ATPase 活性,增加幅度从2 .5 倍到10 倍不等。亲水性不同的氨基酸对Hsp70 的ATPase 活性影响不同。玉米细胞质Hsp70 是一个三磷酸核苷酸酶,除ATP 外,它还能催化UTP、GTP、CTP和ITP的水解  相似文献   

9.
耐低钾基因型水稻品种孕穗期剑叶生理及根系活力   总被引:5,自引:0,他引:5  
高耐低钾基因型水稻品种“湘早糯1号”比不耐低钾品种“双白-211-竹印”在缺钾和不缺钾营养液生长,孕穗期剑叶叶绿素及可溶性蛋白质含量高、光合速率、呼吸速率及NR酶活性高、根系活力强,而根导电率低、气孔阻力小.在缺钾([K+]3mg/L)营养液时,高耐低钾品种孕穗期剑叶的Mg,Fe,Ca,Na含量增加,[K+]含量稍小,但[K+]的下降比率相对较低,吸K功能仍强  相似文献   

10.
以亲水性两相分配法从发育菜豆子叶制备的质膜制剂经冻融循环操作,部分膜微囊可转变成密闭的翻转型。取冻融4次的质膜微囊用于H+-ATPase试验表明,ATPase活力为ABA和CaM显著地激活,但受IAA显著抑制;质子泵活力被ABA显著促进,但为CaM显著抑制,IAA对质子泵活力无显著效应。可以认为:ABA促进发育菜豆子叶吸收光合同化物可能是通过促进质膜H+-ATPase活力,从而促进质子/蔗糖同向运输而获得;IAA则可能对菜豆子叶的质膜H+-ATPase无显著效应。在激素信号传导途径中,CaM对质膜H+-ATPase活力可能无直接影响。  相似文献   

11.
三丁基锡(TBT)是人红细胞膜上Na~+,K~+-ATPase的一种抑制剂.该化合物对Na~+,K~+-ATPase有很强的抑制能力.在正常的反应体系中,TBT浓度仅为10μmol/L时,该酶的活性全部丧失;其抑制Na~+,K~+-ATPase的IC_(50)值为2.2μmol/L.K~+能增强TBT的这种抑制作用,TBT为K~+的反竞争性抑制剂.  相似文献   

12.
抗寒锻炼对冬小麦幼苗质膜Ca^2+—ATPase的稳定作用   总被引:14,自引:0,他引:14  
王红  卢存福 《Acta Botanica Sinica》1998,40(12):1098-1101
通过氯化铈(CeCl3)沉淀的电镜细胞化学方法,观察了抗寒锻炼对冬小麦(TriticumaestivumL.)幼苗质膜Ca2+ATPase的稳定作用,主要结果是:(1)正常温度(20℃)下生长的冬小麦幼苗(未经抗寒锻炼),其质膜上有很强的Ca2+ATPase活性反应;当经过-9℃3h的低温处理后,质膜的Ca2+ATPase活性明显降低;在处理12h后,质膜的Ca2+ATPase活性进一步降低;当处理时间延长到24h,质膜的Ca2+ATPase完全失活,同时细胞的超微结构受到破坏。(2)冬小麦幼苗在2℃低温下锻炼15d后,其质膜的Ca2+ATPase活性高于未经抗寒锻炼的小麦幼苗。抗寒锻炼后的小麦幼苗在-9℃处理3h后,质膜的Ca2+ATPase活性与低温处理前相比无明显降低;经低温处理12h,质膜仍保持较高的Ca2+ATPase活性,较同样低温处理(-9℃,12h)但未经抗寒锻炼的幼苗高;当-9℃低温处理24h后,质膜上仍可观察到Ca2+ATPase的活性反应,而且细胞的超微结构也未受到破坏。结果表明,抗寒锻炼可提高冬小麦幼苗质膜Ca2+ATPase在低温下的稳定性  相似文献   

13.
水分胁迫下棉花根和下胚轴质膜H^+-ATPase和Ca^2+-ATPase活力,表现Km值以及Vmax降低。-0.3MPa和-1.1MPa胁迫下质膜AT-Pase活力随时间延长分别呈“V”字形变化和下降趋势。钙螯合剂、CaM抑制剂对棉花根和下胚轴质膜ATPase活性有明显的抑制效应,抑制程度为-1.1MPa大于-0.3MPa大于对照。  相似文献   

14.
花生幼苗下胚轴质膜Ca2+-ATP酶及其对低温胁迫的反应   总被引:1,自引:0,他引:1  
经6%-12%DextranT70密度梯度离心,获得了纯度较高的7d龄花生幼苗下胚轴质膜制剂,质膜Ca^2+-ATPase在反应系统不存在Mg^2+时,可正常表现水解ATP的活性,但此活性明显低于Mg^2+激活的ATPase,Ca^2+-ATPase不受Na3VO4抑制,不被K^+激活,而被Cl^-抑制,Ca^2+-ATPase的最适,pH不同于Mg^2+激活的ATPase,低温胁迫显著提高质膜C  相似文献   

15.
水分胁迫对小麦根质膜H^+—ATPase活性与H^+分泌的影响   总被引:7,自引:1,他引:6  
在渗透势为-0.5和-1.0MPa PEG处理下,不抗旱的郑引一号小麦根PMH^+--ATPase活性分别为下降45%和65%,抗旱品种陕合六号则增加了11%和12%。小麦根组织H^+分泌与PMH^+-ATPase活性的变化趋势基本一致,即随着胁强增加,郑引一号H^+分泌下降,陕合六号H^+分泌是先升高后略降。Na3VO4和DCCD对H^+分泌有不同程度的抑制,品种之间没有明显的差异。外源电子受体  相似文献   

16.
 质膜H+┐ATPase磷酸化对其活性的调节*凌启阆向左云刘华尚克进(南开大学生物化学及分子生物学系,天津300071)RegulationofPMH+┐ATPaseActivitybyItsPhosphorylationLingQi-LangXian...  相似文献   

17.
经6%-12%Dextran T70密度梯度离心,获得了纯度较高的7d龄花生幼苗下胚轴质膜和液泡膜制剂。150mmol/L NaCl或10℃低温处理花生幼苗24h,其下胚轴质膜上的Mg^2+激活的ATPase活性分别提高了37.6%和17.2%;Ca^2+-ATPase活性分别提高45.8%和33.6%。上述盐或低温处理也提高了液泡膜上Mg^2+激活的ATPase活性,分别为对照的141.2%和1  相似文献   

18.
磷饥饿条件下番茄幼苗的H^+分泌速率明显提高,质膜质子泵专一性抑制剂钒酸盐能显著抑制番茄幼苗的H^+分泌,也能显著抑制其Pi吸收。此结果表明,磷饥饿时番茄幼苗Pi吸收速率的变化与H^+分泌速率的变化之间可能具有一定的相关性,并进一步暗示质膜H^+-ATPase可能参与其中,本文结果还表明,Pi/H^+的准量关系约为1:1。  相似文献   

19.
大豆液泡膜V型H^+-ATPase是ATPases中的一种,它在植物细胞的生长发育中有重要的作用。利用竹红菌乙素(HB)和KI这两种分别猝灭蛋白质疏水区域内源荧光和亲水区域内源荧光的荧光猝灭剂,在不同pH值、温度条件下对纯化的大豆液泡膜V型ATPase进行荧光猝灭实验,初步探讨了V型H^+-ATPase的水解活性同其蛋白质折叠状态间的关系。研究表明,通过比较不同pH值、温度条件下蛋白质疏水区域和亲  相似文献   

20.
杜氏盐藻细胞质膜氧化还原系统与K^+吸收   总被引:3,自引:0,他引:3  
杜氏盐藻(Dunaliella salina)细胞表面存在氧化NADH 与还原Fe(CN)3-6 的氧化还原系统(redoxsystem )。该系统在氧化NADH 时,抑制K+ 的吸收,在还原Fe(CN)3-6 时, 促进K+ 的吸收,当NADH 同时存在时, 促进效应最显著, 高达735% 。外源NADH 促进藻细胞的氧吸收达165% ,而使胞质pH 下降; 当NADH 存在时, Fe(CN)3-6 被快速地还原, 同时藻细胞膜外酸化程度增加。质膜H+ -ATPase和氧化还原系统的典型抑制剂都不同程度地抑制K+ 吸收; 并且钒酸盐对K+ 吸收的抑制可以被加入NADH 和Fe(CN)3-6 而部分恢复, 表明质膜H+ -ATPase和氧化还原系统共同参与了细胞K+ 的吸收过程  相似文献   

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