蓖麻毒蛋白研究及应用进展(综述)

蓖麻毒蛋白(ricin)是一种核糖体失活蛋白,它由分子量分别为32KD和34KD的A、B两条链组成,具有很强的细胞毒性。本文综述蓖麻毒蛋白的结构和物理性质、毒性作用机理、制备及在医疗和生物农药方面的应用前景。     

名刊封面

<正>《自然—生物技术》2010.9蓖麻子基因组蓖麻子是一种油料经济作物,同橡胶、木薯、巴豆一样,属于大戟科。因为脂肪酸和蓖麻油酸的含量比较高,所以蓖麻子主要用来生产高质量的润     

用琼脂糖亲和层析一步纯化蓖麻毒蛋白

本文报道了一种单用琼脂糖(Sepharose4B)来纯化蓖麻毒蛋白的快速简便的方法。我们发现在pH5的条件下,蓖麻毒蛋白和与其密切相关的蓖麻凝集素对琼脂糖的结合能力有很大的差别。在有0.2mol/LD-半乳糖存在下可将蓖麻毒蛋白从Sepharose上洗下,同样条件下蓖麻凝集素仍牢固地结合在柱上。从而经一步柱层析便可得到电泳纯的蓖麻毒蛋白。此法不需另行合成亲和胶,适合于蓖麻毒蛋白的大规模纯化。     

蓖麻籽饼粕的加工利用

蓖麻籽饼粕过去一直被当作肥料使用,而不能作为饲料蛋白使用,因为它含有三种毒性物质:蓖麻子白蛋白,这是一种有毒的蛋白,蓖麻碱,一种有毒的生物碱,以及CB—1A过敏素。蓖麻子白蛋白很容易通过加热法摧毁,并且,在用溶剂提取之后,进行脱溶剂处理     

蓖麻提取物的杀虫作用研究进展

随着食品安全和发展低碳农业的需要,植物源农药的研究受到了空前的关注。在众多植物源杀虫剂中,蓖麻(Ricinus communis L.)由于其价廉易得、杀虫谱广、杀虫效果好、使用简单方便等优点,逐渐引起人们的高度重视。本文主要从蓖麻毒素粗提物、蓖麻毒蛋白和蓖麻碱的生物效应进行综述,并对其应用发展前景、使用过程中存在的问题与相应的解决办法进行了讨论。     

蓖麻提取物对鼠抗生育作用的实验研究

利用蓖麻提取物对昆明种小鼠进行了短期与长期的抗生育实验,研究发现蓖麻提取物（蓖麻油和蓖麻蛋白）对小鼠有明显的抗生育作用。蓖麻蚩白及其与蓖麻油的混合物在抗早孕方面的效果均可达到100％,蓖麻油抗着床的效果也可达到100％。蓖麻油长期抗鼠生育效果明显,在210d（正常小鼠的妊娠期是21～23d）内有效降低小鼠生育代数与产仔数,生育抑制率达80％以上。蓖麻提取物对离体小鼠子宫的影响也非常显著,通过增强小鼠子宫内部收缩有效减少着床机率。在中止妊娠的实验中发现,服用了蓖麻蛋白及其与蓖麻油的混合物的小鼠子宫内没有着床位点。     

“单臂”的治癌抗体

理想的杀死癌细胞的药物,应能识别癌细胞,并有效地杀死它而又不危害正常细胞。当科学家们找到一种制作能识别癌细胞表面上特异标志的蛋白质的方法时,这种理想药物似乎会很快地研制出来,这种高度特异的蛋白质称为单克隆抗体。下一步是使这种抗体与一种名叫蓖麻蛋白的毒素相结合。问题是这种蓖麻蛋白很毒,它只能作为治疗这种不治之癌的一种最后手段。     

蓖麻毒蛋白A链基因RNAi转化研究

通过基因沉默技术调控蓖麻毒蛋白A链基因的表达,以期获得低毒蓖麻新材料.利用基因克隆技术获得蓖麻毒蛋白A链基因762 bp片段,命名为RTA基因.进一步利用该基因构建了植物RNAi表达载体pBI-RTA-S-AS,通过农杆菌介导法转化蓖麻子叶节,用卡那抗性筛选转化再生植株,PCR进一步鉴定转基因植株.结果表明:克隆得到目的基因长762 bp,与预期结果一致;卡那抗性筛选和PCR鉴定结果显示,获得了3株转基因阳性植株.     

天花粉同工凝集素－1双链的拆分和鉴定

天花粉同工凝集素－１经巯基乙醇还原,碘代乙酰胺保护,其链间二硫键被打开,但仍非共价结合在一起。我们利用尿素变性的Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层忻分离了此凝集素的两条链。氨基酸组成测定与其他３种肽链作一比较,它们都含有较多的酸性和羟基氨基酸。蛋白质印迹显示ＴＫＬ的抗血清不仅能与ＴＫＬ－１的两条链分别反应,也能与天花粉毒蛋白及蓖麻毒蛋白的Ａ链起作用。溴化氰裂解的ＳＤＳ－ＰＡＧＥＲ肽谱表明天花粉凝集素的两条链与天花粉毒蛋白含有类似的裂解片段,在分子量１６ｋｄ左右有相同的电泳条带。ＴＫＬ－１两亚基的Ｎ末端序列已经测定,同源性比较发现其３３ｋｄ亚基的Ｎ末端序列与天花粉毒蛋白、蓖麻毒蛋白的一些肽段类似。迄今已有的证据表明ＴＫＬ与ＴＣＳ等是一些非常相关的蛋白质。     

蓖麻的应用价值

蓖麻(Ricinus communis)为大戟科一年生或多年生草本,原产非洲,属热带性植物,喜高温,不耐霜,但耐碱、耐酸,对环境有很强的适应性,在我国各地区都有栽培。 蓖麻一身都是宝。蓖麻叶大,互生,掌状分裂,可用来饲养蓖麻蚕。蓖麻蚕是一种很好的绢纺原料。蓖麻的茎圆形,中空,其韧皮纤维可制绳索,也可用于造纸。蓖麻的果实为蒴果,有刺或     

美Cetus公司用蓖麻蛋白-单克隆抗体结合体实施用导弹疗法的临床试验

Cetus公司决定使用开发成功的蓖麻蛋白-单克隆抗体复合物,对20名不治之症的乳癌患者进行导弹疗法,将在Fox Chase癌中心实施。 一种对细胞毒力最强的蓖麻蛋白由两个肽链组成。B链具有与细胞结合的作用;A链起抑制核蛋白体的作用,可杀死细胞。     

蓖麻RcTUBβ1基因的克隆和原核表达

微管蛋白基因(Tubulin)具有高度的保守性,常作为目标基因相对表达量研究时的内参基因.本研究旨在通过构建蓖麻(Ricinus communis L.)RcTUBβ1基因的原核表达载体pET32a(+)-RcTUBβ1并优化表达工艺以表达融合蛋白His-RcTUBβ1.以蓖麻雌花为材料,通过RT-PCR技术,扩增得到含酶切位点BamHⅠ和Xho Ⅰ 的 RcTUBβ1 基因(GenBank Accession number:XM_002509734.3)的ORF 序列,经双酶切构建原核表达载体pET32a(+)-RcTUBβ1,将pET32a(+)-RRcTUBβ1转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中诱导表达,并考察诱导时间、诱导温度、诱导IPTG浓度对表达的影响.结果表明,所获得的蓖麻RcTTUBβ1 ORF序列与GenBank中的序列一致,长度为1 341 bp,未发生移码突变.IPTG可诱导产生分子量约为68kDa的融合蛋白,最优表达条件为诱导温度28℃、诱导时间7 h和IPTG 0.5 mmol/L,融合蛋白主要以包涵体的形式存在.这为纯化融合蛋白以制备其抗体,用以研究RcTUBβ1的免疫组织化学分布及时空表达模式提供了基础.     

变链菌葡聚糖结合植物血凝素的研究

植物血凝素(1ectin)一词,起源于拉丁语Legere,它是非免起源的,能与糖类结合的一类蛋白质,具有使细胞凝集和多糖沉淀的性质。一般而言,植物凝集素是由二至四个亚单位的寡聚蛋白,个别植物凝集素分子的亚单位可达十八个,通常每个亚单位有一个能与糖结合的位点,这样使植物血凝素能凝能植物和动物的细胞,在含糖的微分子之间起连接作用,其连接方式主要是疏水键和氢键。不同的植物血凝素在分子量大小,氨基酸组成,对金属的需求及三维结构方面都不相同。最早的凝集素是1888在植物中发现的,所以命名为植物凝集素。当时,Stillmark在蓖麻子中发现了一种蛋白酶细胞凝集因子。至今,已分离了几百种凝集素,发现其不光存在于植物中,亦存在于动物和微生物中,几乎见于各种生活的有机体,并不限于特殊的器官和组织。     

蓖麻坡天牛的生物学研究

蓖麻坡天牛是我国近年发现为害蓖麻的一种钻蛀性害虫。本文较详细地研究了该虫的为害、形态特征、生物学特性和防治方法。     

天花粉同工凝集素—1双链的拆分和鉴定

天花粉同工凝集素－１经巯基乙醇还原,碘代乙酰胺保护,其链间二硫键被打开,但仍非共价结合在一起。我们利用尿素变性的Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析分离了此凝集素的两条链。氨基酸组成测定与其他３种肽链作一比较,它们都含有较多的酸性和羟基氨基酸。蛋白质印迹显示ＴＫＬ的抗血清不仅能与ＴＫＬ－１的两条链分别分应,也能与天花粉毒蛋白及蓖麻毒蛋白的Ａ链起作用。溴化氰裂解的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ肽谱表明天花粉凝集素的     

蓖麻碱的提取、纯化、改性及其杀虫活性研究

蓖麻饼中含有生物碱等毒性物质,主要杀虫活性物质为蓖麻毒蛋白和蓖麻碱,蓖麻碱是蓖麻中的主要毒素之一,具有一定的生物活性。本文研究了蓖麻碱的提取、纯化,以及将所得蓖麻碱再进一步进行改性,探讨改性方法。采用红外光谱方法对蓖麻碱改性前后变化进行对比;并对提取、纯化以及改性过程中的各个环节的物质进行杀虫实验,对实验结果进行观察。结果表明,蓖麻碱的主要杀虫活性基团为氰基。     

蓖麻生物工程研究进展

蓖麻是一种高蓄能植物和工业原料植物,具有很大的开发利用价值。本文从组织培养和遗传转化两个方面并结合本实验室的工作综述了蓖麻生物工程研究的最新进展。在蓖麻组织培养方面,不同的外植体中以成熟种子的胚轴最适宜,而在不同激素中以TDZ诱导丛生芽的效率最高,并以此为基础建立了蓖麻离体再生体系。在遗传转化方面,不同的转化方法中以农杆菌介导法最适合蓖麻转化。蓖麻胚轴对卡那霉素不敏感,潮霉素是蓖麻转化的适宜筛选剂。文中指出了蓖麻生物工程研究中存在的问题,并对应用生物技术培育蓖麻新品种和促进蓖麻生产的可能性进行了讨论。     

我国优势油脂类生物柴油植物蓖麻的种质资源发掘和生物柴油利用

发展可再生生物质能源是解决人类能源危机和环境污染的重要途径。利用边际土地发展油脂类生物质能是生物质能的重要组成部分。蓖麻因为适应性强和油脂成份独特被誉为"理想的生物柴油植物"。蓖麻是我国优势油脂类能源植物,利用边际土地,发展蓖麻产业为我国生物柴油产业化提供原料,是我国现阶段生物柴油产业化发展的相对理想而又现实的选择,而且具有重要的发展前景和巨大的发掘潜力。立足我国现阶段生物柴油产业化的瓶颈问题,着重阐述了蓖麻种质资源发掘的现状、优良品种培育的途径和发展前景,以及利用蓖麻种子油生产商业化生物柴油的现状,以期推动我国利用边际土地发展蓖麻产业以及生物柴油商业化生产。     

土壤中蓖麻碱降解菌的分离及脱毒效果的初步研究

以蓖麻碱为底物,从蓖麻种植地土壤中筛选出脱毒能力强、生长旺盛的菌株6-6t,经初步鉴定为假单胞菌,其最适生长温度为30℃,最适pH为7.0。经脱毒实验,6-6t菌降解蓖麻碱的脱除率达到71.63%,且该菌并不降解蓖麻饼粕中的蛋白质。     

蓖麻的开发利用

蓖麻的开发利用尹秀玲徐兴友孟宪东张凤娟（河北农业技术师范学院,昌黎０６６６００）蓖麻（ＲｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓＬ）,别名大麻子,是大戟科的一年生灌木状草本,原产非洲,我国各地均有栽培。蓖麻全身是宝,种仁含油高达７０％,为优良的滑油,还可制肥皂,...