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《生物技术通报》1992,(9)
923283贯组人降钙素在大肠杆菌中的高浓度合成:融合蛋白的胶原酶裂解和肚基甘氨酸的a一酸胺化〔英〕/Tajima,M.…了J.Ferment.Bioeng一1991,72(5)一562~367〔译自DBA,1992,11 (5),92一02581〕 将编码甘氨酸伸长的人降钙素(h CT一G行)的合成基因插入tac启动子与lacZ墓因之间。把具有胶原酶识别位点的合成DNA置于hCT一Gly基因下游。培养物在181培养基(1%葡萄糖、1%酵母膏、i%Baeto PePtone、0.2%硫酸钱、0。2%磷酸二氢钾、1,8%磷酸二钠和。。01%硫酸镁,pH7.0)、32℃下通过IPTG诱导培养5小时,使携带质粒pZT2232(含hCT基因和lacZ序… 相似文献
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三得利公司确立了一种基因重组法,可大量生产酰胺化的人降钙素(hCT),结果在4月东京召开的日本农艺化学会上发表.使用基因重组生产的α酰胺化酶作用于用基因重组大量生产的目的蛋白,获得活性蛋白.用20升培养物能制造4～5克酰胺化活性型hCT.用这项技术还能大量生产由于酰胺化而产生活性的其它蛋白.三得利公司最近打算向厚生省申请批准生产hCT. hCT的生产程序如下:首先用基因重组大肠杆菌生产与融合有β半乳糖苷酶片段的蛋白,然后用蛋白酶V8切出hCTGKKR(hCT-Gly-Lys-Lys-Arg),用羧肽酶B将其变换成 相似文献
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《生物技术通报》1993,(5)
951652约码一藤素一口一1人工基因的合成及其与人肿■坏死因子的融合蛋白在大肠杆菌中的衰达亡俄]/Ko—robko,V.G.…/Bioorg.Khim..1992。lg(5).一646～659E译自DBA,1992,11(23),92一120703 构建的编码具免疫活性的胸腺素一d—l和人肿瘤坏死因子(hTNF)为具有N一末端的人工融合蛋白基因。在C一末端融合蛋白中,hTNF和胸腺素一口-1通过甲硫氨酸残基连接,便于融合蛋白用澳化氰切削,在N一末端融合蛋白,胸腺素-口一1和hTNF问的接头为酸不稳定的二肽Asp—Pro。N一末端融合蛋白分泌到周质内,而C一末端融合蛋白,由千形成不溶的凝块而留在细… 相似文献
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924034生产并回收大肠杆菌融合蛋白形式的贡组人胰高血糖案仁英〕/Ishizaki,J.…厂ApPI.Miero-b 101.Bioteehnol一1992,36(4)一453~理8已[译自DBA,1992,11(10),92一05567〕 用14个寡核普酸构建了编码人胰高血糖素的人工基因,并连在GAA下游,形成102bP.具Pstl-BamHI末端的DNA片段。将此基因与编码4个氨基酸(Pro一Phe一Arg一Cys)的Sall一Pstl接头相连,并与较大的BamH工一Sall片段(来自质粒pAT一Trp huIFN一y/PSTI)连接。质粒pAT-T印五uIFN一州PSTI编码人卜干扰素末端135个氨基酸和5个接口氨基酸Lys一Se卜Leu一Val一AsP… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(4)
821276大肠杆菌户葡枪普酸酶甚因作为鉴定酵母菌株的标记〔英〕/petering,J……了Am.J。Enol.Vitie一1991,42(i)一6一11〔译自DBA,1991,10(18),91一10239二 大肠杆菌介葡糖普酸酶(GUS)uidA基因(分离自质粒pKLG4的HindIH片段)经改造,即在其编码序列上连接酿酒酵母乙醇脱氢酶启动子和终止子序列,构成pAW220新质粒,用于在酵母中的表达。pAW220在转化酿酒酵母3A时,可整合至第13染色体的ILVZ基因中。筛选抗性除草剂甲基化Sulfometuron(10产g/ml)的转化株。用Southern杂交法筛选转化株中在ILVZ基因内含有GUS者(3 AM)。3 AM培养于1… 相似文献
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人修饰型降钙素和鼠酰胺化酶基因在昆虫细胞中的偶联表达 总被引：2，自引：0，他引：2
人降钙素 (hCT)是 32氨基酸的多肽激素 ,C-端为α脯氨酰胺结构 ,具有调节体内钙、磷代谢等许多重要生理功能。用重组昆虫杆状病毒表达系统 ,偶联表达合成的人修饰型降钙素 (hmCT)基因与GST融合基因和大鼠酰胺化酶 (PAM)基因 ,再用抗hmCT或抗PAM抗体 ,既检测到由昆虫细胞表达的GSThmCT产物也检测到PAM产物。经GSH 琼脂糖凝胶亲和层析 ,分离纯化GSThmCT融合蛋白。这种蛋白修饰酶与底物在真核细胞偶联表达也将适用于其他生物活性肽的体外表达 相似文献
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《生物技术通讯》1996,(3)
公开号专利号申请日}发明人名称年卷期页(、NI(一22写()l(‘21吕61()0726.3(、8(玉()1艺9吉尔·威尔施制造尤细小病毒疫苗的方法94.:飞.2 70(Nl气)7吕t‘)I八93(2理09M·C·罗森布拉姆抗与表面抗原相关的CT)33的免疫毒素9」..玉.2.70C\[ 1 .78476A930414} 八·S·维迪尼等C一反应性蛋白质片断的部分改性的和逆转化的四肤类似物94.3 2 70(’丫1 07冬〕2之SA93(14()lH.勒舍等一肿瘤坏死因子突变蛋白94.3.2,7‘)〔N 10792止6A920828关肠光会等从人尿中制备生物活性蛋白新方法94.3.之71CN 107849艺八921120J·G·美茨等脂酞辅酶A:脂肪… 相似文献
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《生物技术通报》1994,(2)
940738小南瓜花叶病毒外壳蛋白基因:克隆序列分析及其在烟草原生质体中1的表达〔英万Hu,J.S…了Areh.Virol一。1993,130(i一2)一17~31仁译白DBA,1993,12(19),93一11036〕 克隆了南瓜花叶就豆花叶病毒(SqMV)香瓜株系中间部分RNA的互补DNA。分离出SqMVmRNA,通过蔗糖梯度离心分级分离双链cDNA、用E。。Rl DNA一甲基化酶使之甲基化并将EcoRI-亲和性接头连到两侧末端。用EcoRI消化后,将。DNA克隆到质粒pUC18的EcoRI位点上。转化并筛选大肠杆菌DHS感受态细胞。设计了4种寡核普酸引物,用以在SqMV寡核昔酸序列和预测的多聚蛋白… 相似文献
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《生物技术通报》1989,(3)
890948培养条件对铜绿假单胞杆菌产生外毒素A的影响〔会,英〕/Blumentals,1.1.…厂1\ 110.N.丫’.八ead.Sei一1987,506一663一668〔译自DBA,1988,7(26),88一07947二 测定了影响铜绿假单胞杆菌(尸:eudo-,:o:。:。e::夕i。05。)(PA一103)产生外毒素入(一利‘可能的类毒素疫苗)1’肉因子。将细胞培养于含lmM人侄g十一升和1.l‘Mf,’。的限定培养基中直至达静止期为止。收集和水洗细JJIs后重忿于含o.11llMMg一丫肉些助倪培养甚中,]]l一l入jlnMMn;十和C。一J青外毒素产量比不加金属的降低50%。加25即MC扩语’使外毒素产量降低66%。s00lt… 相似文献
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《生物技术通报》1990,(5)
兜132,编杯马:一氮节青尽素一抗性的巴西固氮螺菌Sp7基因在大肠杆菌中的克隆与表达喋】/Verreth,C.…11 Appl.Environ.MICrobiol一1989,55,(8)一056一2060[译自DBA,1989,8(19),89一11391] 在大肠杆菌(Es动erie人必。o价HB 101中克隆和表达了巴西固氮螺菌(Azospiril加,brasileoe)ATCC 29145的编码口一内酸胺酶基因.用嵌合质粒pLAFRI作载体在大肠杆菌中构建了基因库.对基因库进行,氮节青霉素一抗性筛选并分离了一阳性克隆.。氮节青霉素抗性基因在其自身启动子调控下表达分子量30 000的蛋白.该蛋白抗高水平的口一内酸胺抗体.用插人子… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(9)
92引47抗杀稻疽菌素一S的大肠杆菌TK121的杀稻瘟菌素一S一脱氨酶N末端氨基酸序列以及bsr基因的核普酸序列〔英〕/Kobayashi,K.…了Agrie.Biol.Chem一1991,55(12)。一3155~3157〔译自DBA,1992,11(5),92一02402〕 分离到抗杀稻瘟菌素一S(BS)的蜡状芽抱杆菌K55一51菌株,并分离到BS脱氢酶(BSD)。构建了含有BSD基因(bsr)的质粒pBSRs(10.5kb)。将其再克隆到枯草杆菌及大肠杆菌TK121中,已将bsr基因定位于pTK17中的一个1。5 kbEcoRI一BamHI片段上(内含一个单一的Bglll位点)。用M13链终止法测定DNA序列,在测定的Nde工一Hincn片段中… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
、舀巧‘,‘...Jf护.口.曰口,今.二‘J舀函~....阅.侧尸‘J月..‘.924315用寡核普酸杂交检测非邻接短序列〔英〕/Borghesi一N ieoletti,C.…了BioTeehniques一1092-12(4)一凌74一475〔译自DBA,1992,11(11),92一06022〕 模型系统采用的寡核普酸互补于免疫球蛋白可变区基因3产侧翼保守性七聚体和九聚体序列的各区。单独的短核普酸(7 bp或gbP)不能作为杂交探针,但含有由电桥相连的两个保守序列的构建物能够杂交。通过降解碱基和保留七聚体与九聚体间的起始间隔物形成桥。这种桥连寡核普酸探针可用于Southern印迹和细菌基因文库筛选的杂交… 相似文献
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《生物技术通报》1993,(4)
931310资白工程:作为血液代用品的改良血红蛋白〔英〕/Jessen,T.H.…1 Angew.Chem.Int.Ed。Engl一2902,31(7)。一545~549[译自DBA,1992,11(21),92一11833〕 在大肠杆菌、酿酒酵母及转基因的小鼠和猪中完成了全功能人血红蛋白的表达。这些重组的血红蛋白在未修饰的情况下不能作为血液代用品,因为在缺乏2,8一二确酸甘油酸时该蛋白具太高的氧亲和性,并分裂为二聚体。上述向题已通过蛋白工程解决了。通过甘氨酸残基将2个a链中的1个的C一末端与另一个相连接,这个C一末端的3一维结构与其它a蛋白链的N一末端相近。该融合子不能使血红蛋白的亲… 相似文献
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《生物技术通报》1989,(4)
891弓05氯化钙对千扰素生产与细胞大分子生物合成的影响[俄】/人s!、:、,kl飞。(一:一飞:,。、,入。·\.…//人1,t 11010之.1又11;mi。:er‘-1 988,33(6)一431一433[译自DBA,]988,7(18),88一08892] 卞达研究了氯化钙对诱产1三干扰素和巧苍核汗酸合成的影响在形成单层细胞后用氯化钙处理姨蛋臼酶化的鸡胚成纤维细胞和可移植的小鼠毛一。29培养物。在有10~30mM氯化钙存在仆i‘,用案肌胞I:C诱导上述细鲍诱异飞,1、时后除去诱导剂。洗涤细胞,37℃J言养细胞于NO199培养华内18一20小时。低i农度诱生剂(2御,g/mj)诱导时,干扰素产呈低,或完全不… 相似文献
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《植物生理学通讯》1993,(2)
植物材料、外植{本山浩((‘阴加咧、)培养爷《,,:gL)l乍三吝《叮t{、毛)(1)MT+BA(2)MS+BAI)(:飞)MS+BA亡)(}.5十LH 11川:十〔;、1) .5;2+IB入t).5j]五珠接种至I]少音养钱(})七.峨玉珠内的幼弓砂挂宁李牡性生}之.少汗养只【,;,,;么勺IJE长J奄达一(、;1:n:将长大的弓〔转至培养毯(:考)l几.培荞阴‘}长出i午乞自色的叨训弋体.将弓〔状f本转至IJ士合养从(3)L.少音养山‘!),‘开始长出仃恨和类的小掖株咭泛桂琴妇1用’l三卓韦德袋‘河南耳只峨}:宇芝冲之.,炸i范学院园艺一卜.辉具!5:飞八(以l)t}父搞一冬川二巴(){几‘12知母(1lt,、117… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(2)
920410可在蓝燕株系PCC7120中分析启动子的载体〔英〕/Tang,J.D.…了J.Baeteriol一1901,i了3 (s)一2729~2731〔译自DBA,1991,10(12),91一06654〕 构建了启动子探测载体pJL3,它含有一个多克隆位点、cat基因(不带启动子)以及转录终止子。经接合将其从大肠杆菌转移至Aoaba‘。a“P.PCC7iZo中。新质粒的成分来源于:质粒pRL25C (含大肠杆菌和兰藻复制子)、新霉素杭性标记、bom接合转移区、质粒pDUI(从丝态兰细菌分离到)以及pBR322的序列。描述了该载体质粒的详细构建过程。Aoaba。:a psbB基因编码光合系统n中的一种分子量47000的叶绿… 相似文献
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由37个氨基酸组成的新肽,降钙素基因相关肽(CGRP)是降钙素基因原始RNA 转录的产物之一。通过降钙素基因密码序列的分析,得到了大鼠CGRP 的一级结构,并已人工合成。人CGRP 亦被分离和鉴定,其组成亦为37个氨基酸,有四个和大鼠CGRP 不同。CGRP C 末端免疫活性已在大鼠中枢和外周神经系统中测得,大鼠主动脉提取物也含有免疫活性CGRP(20pmol/g)。离体大鼠三叉神经节能释放免疫活性CGRP,高K~ 浓度使之释放增加。有证据表明,CGRP 是中枢和外周神经系统递质,对心脏有强烈作用,脑 相似文献
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降钙素(calcitonin ,CT)、胰淀粉样多肽(amylin)、两种降钙素基因相关肽(calcitonin generelatedpeptide ,CGRP ,CGRPα、CGRPβ)和肾上腺髓质素(adrenomedullin ,ADM)均属于降钙素基因相关肽家族。CT主要参与体内的钙代谢;amylin位于胰腺的β细胞;ADM的生物学作用与CGRP相似,对心血管和呼吸系统功能调节有非常重要的作用。垂体中叶素(intermedin ,IMD)是在低等脊椎动物的垂体中间部产生的一种肽类激素,人类垂体中间部退化,只留有痕迹,产生IMD的细胞分散于腺垂体远侧部。IMD主要作用于黑素细胞,生成黑色素。最近,RohJ等(2 0 … 相似文献