| 登革2型病毒E蛋白在酵母菌中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 魏惠永,江丽芳,薛耀华,郭辉玉.登革2型病毒E蛋白在酵母菌中的分泌表达[J].中国病毒学,2002,17(3):198-201. |
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| 作者姓名： | 魏惠永 江丽芳 薛耀华 郭辉玉 |
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| 作者单位： | 1. 广东省人民医院老年医学研究所,广东,广州,510080;中山医科大学微生物学教研室,广东,广州,510089
2. 中山医科大学微生物学教研室,广东,广州,510089 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅自然科学基金资助课题(201036) |
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| 摘 要： | 以pPICZ α B为载体,应用RT-PCR从感染D2V的C6/36病变细胞中克隆全长E基因,电转 化法将重组质粒整合入巴斯德毕赤氏酵母菌,经抗生素筛选、表型鉴定和PCR分析得到Mut+型的多拷贝整合菌,经甲醇诱导培养可产生69kD的融合蛋白,与含组氨酸尾的D2V包膜糖 蛋白分子量理论值相符;免疫印迹证实该表达产物可与D2V E特异性单抗和D2V多抗进行反应; 表达产物经金属螯合亲和层析可获得纯化的含组氨酸尾的E融合蛋白并保留其免疫反应性. 研究显示克隆的全长D2V E基因可在毕赤氏酵母菌中高效分泌表达,E融合蛋白最大表达量0.1g/L.
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| 关 键 词： | 登革病毒 E蛋白 分泌表达 毕赤氏酵母菌 |
| 文章编号： | 1003-5125(2002)03-0198-04 |
| 修稿时间： | 2001年11月7日 |
Secreted Expression of D2V Envelope Glycoprotein in Pichia pastoris |
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