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| 利玛原甲藻中聚酮合酶基因克隆与分析 | |
| 引用本文： | 汤敬谦,李挺,杨维东,刘洁生,李宏业.利玛原甲藻中聚酮合酶基因克隆与分析[J].生态学报,2009,29(5):2383-2390. |
| 作者姓名： | 汤敬谦 李挺 杨维东 刘洁生 李宏业 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学生物工程学系,广州,510632 2. 广东省微生物研究所,广州,510070 3. 暨南大学生物工程学系,广州,510632;水体富营养化与赤潮防治广东省高等学校重点实验室,广州,510632 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金-广东省联合基金重点项目，广东省自然科学基金，广东省自然科学基金重点项目，国家重点基础研究发展规划(973计划) |
| 摘 要： | 为探讨聚酮合酶 (polyketide synthase, PKS)基因与藻毒素合成的关系,揭示PKS基因在赤潮毒素合成中的作用,采用兼并引物,通过PCR技术获得利玛原甲藻(Prorocentrum lima)可能存在的I型PKS基因;并对所获得PKS基因的同源性进行了分析,构建了基于PKS氨基酸序列的系统进化树;采用RT-PCR技术分析了PKS基因在利玛原甲藻中的表达状况;并通过多聚腺苷酸RNA的扩增、细菌的分离鉴定、限制性内切酶酶切、Southern blotting等技术对PKS基因进行了分析.结果表明,利玛原甲藻中PKS基因与海洋原甲藻聚为一支,在利玛原甲藻中有显著表达;以Oligo(T)引物进行RT-PCR扩增时,可出现18S rRNA和PKS基因相应条带;限制性内切酶酶切和Southern blotting结果显示,该基因中存在明显的甲基化;16S rRNA基因序列分析显示,从利玛原甲藻培养液中分离到的细菌与海洋放线菌假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)基因序列同源性达到99%,该菌株中并不存在PKS基因.结果显示,所获得的PKS基因是利玛原甲藻聚酮合酶基因,基因序列已提交GenBank (EF521601);PKS可能在腹泻性贝毒合成中起着关键作用. |
| 关 键 词： | 利玛原甲藻 聚酮合酶 基因克隆 分子杂交 |
| 修稿时间： | 2009/3/11 0:00:00 |
Cloning and analysis of PKS gene from Prorocentrum lima |
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| TANG Jing-Qian,LI Ting,YANG Wei-Dong,LIU Jie-Sheng,LI Hong-Ye.Cloning and analysis of PKS gene from Prorocentrum lima[J].Acta Ecologica Sinica,2009,29(5):2383-2390. | |
| Authors: | TANG Jing-Qian LI Ting YANG Wei-Dong LIU Jie-Sheng LI Hong-Ye |
| Abstract: | |
| Keywords: | Prorocentrum lima polyketide synthases clone |
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