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半夏凝集素基因(pta)导入水稻及其表达的初步研究
引用本文:张红宇,吴先军,唐克轩,汪旭东,孙小芬,周开达.半夏凝集素基因(pta)导入水稻及其表达的初步研究[J].遗传学报,2003,30(11):1013-1019.
作者姓名:张红宇  吴先军  唐克轩  汪旭东  孙小芬  周开达
作者单位:1. 四川农业大学水稻研究所,温江,611130;复旦大学遗传所,上海,200433
2. 四川农业大学水稻研究所,温江,611130
3. 复旦大学遗传所,上海,200433
基金项目:四川省水稻育种攻关项目,国家转基因植物和商业化后补计划 (项目编号 :J99 A 0 0 7)项目资助~~
摘    要:半夏凝集素基因是一种有重要价值的抗虫基因。利用RACE—PCR技术克隆出半夏凝集素(pta)基因,并将它构建到载体pCAMBIA1305中形成双元载体(含pta基因和hpt基因)。利用农杆菌介导法将pta基因转入粳稻品种鄂宜105、中花12和籼稻品种E优532成熟胚诱导的愈伤组织中。通过PCR检测,从117株To代再生植株中筛选出36株(其中鄂宜105、中花12、E优532分别为19株、7株、10株)转基因植株。对这些转基因后代植株进行Southern blot分析和RT—PCR分析表明:pta基因已经整合到受体细胞基因组中,并在转录水平上得到了有效表达。通过对转基因后代的遗传分析,成功地从T1代表现为1:2:1盂德尔分离的分离群体中筛选出7个独立转基因水稻纯系(其中包括4个鄂宜105、1个中花12和2个E优532转基因纯系)。对这7个独立转基因水稻E代纯系进行褐飞虱生物抗性鉴定和田间隔离喂养实验,结果显示,这些转基因纯系对褐飞虱的存活率和发育进度均有显著的抑制作用。同时,实验结果还表明2~5mg/L的2,4—D是愈伤组织诱导和生长的必需条件,而且受体的基因型对愈伤组织诱导率和转化频率均有显著影响,在同等条件下,粳稻品种的愈伤组织诱导率和转化频率均高于籼稻种。

关 键 词:半夏凝集素基因  抗虫  转基因水稻  Southern  blot  RT-PCR
文章编号:0379-4172(2003)11-1013-07
修稿时间:2003年1月13日

A Primary Study of Transferring the Pinellia Tenata Agglutinin (pta) Gene into Rice and Expression
Abstract:
Keywords:Pinellia tenata  agglutinin (  pta  ) gene  pest  resistance  transgenic rice  Southern blot  RT  PCR
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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