心磷脂对重建Fo的质子转运高活性是必需的

从猪心线粒体纯化了F_oF₁-ATPase的膜部分质子通道F_o,SDS-PAGE表明纯度约85%,且不含F₁-ATPase的各亚基.将纯化的F_o在含不同纯磷脂组分的脂质体上重建,分别测定心磷脂(CL)、磷脂酸(PA)、磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰丝氨酸(PS)等酸性磷脂对重建F_o质子转运活性的影响,结果表明,它们促进重建F_o质子转运活性的强弱顺序是CL＞PA＞＞ PI,而PS却完全抑制重建F_o的质子转运.阿霉素(ADM)显著抑制含CL的重建F_o的质子转运活性,提示CL明显促进F_o的质子转运可能与其具有强烈的形成非双层脂结构的倾向性相关.测定磷脂酰乙醇胺(PE)及二顺油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二反油酰磷脂酰乙醇胺(DEPE)对重建F_o质子转运活性的影响表明,有形成非双层脂结构倾向性的PE,DOPE明显促进重建F_o的质子转运.荧光猝灭剂HB对重建F_o的内源荧光猝灭及专一性标记蛋白质巯基的荧光探剂acrylodan的荧光光谱分析进一步表明,适当浓度的CL可能使重建F_o具有适合的构象,并表现高的质子转运活性.