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藏羊肖氏隐孢子虫的分离鉴定
引用本文:王方园,刘学涵,彭广能,钟志军,邓家波,周潇潇,陈维刚,廖飞,石锦江,陈英,杨平,李兵.藏羊肖氏隐孢子虫的分离鉴定[J].四川动物,2014(3):425-429.
作者姓名:王方园  刘学涵  彭广能  钟志军  邓家波  周潇潇  陈维刚  廖飞  石锦江  陈英  杨平  李兵
作者单位:四川农业大学;动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室;四川农业大学动;物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室;成都动物园;雅安市名山区农业局;
基金项目:成都大熊猫繁育研究基金会项目(CPF申2012-01);教育部“长江学者和创新团队发展规划”创新团队项目(IRT0848);2013年四川省学术带头人培养项目(83120220
摘    要:为了解隐孢子虫在藏羊中的感染情况,采用饱和蔗糖漂浮法检查34份藏羊新鲜粪便。通过巢式PCR扩增阳性分离株的18S rRNA、HSP70和CpA135位点基因,并采用限制性内切酶Ssp I和Vsp I对18S rRNA产物进行酶切分析。同时构建系统发育树,分析藏羊感染隐孢子虫类别。结果显示仅1只藏羊感染隐孢子虫,18S rRNA与Cryptosporidium xiaoi山羊分离株(GU553016)相似率为99.9%;HSP70与C.xiaoi绵羊分离株(FJ896041)相似率为98.7%;CpA135与C.ubiquitum人源分离株(HM358023)相似率为99.3%。18S rRNA产物经Ssp I酶切后获得3条条带493 bp、262 bp和103 bp,经Vsp I酶切后获得3条条带508 bp、181 bp和104 bp,与C.bovis酶切条带相似。基于18S rRNA和HSP70的系统发育分析显示,该分离株与C.xiaoi亲缘性最近。这是首次在藏羊体内发现肖氏隐孢子虫。

关 键 词:隐孢子虫  藏羊  Cryptosporidium  xiaoi  18S  rRNA  HSP70  PCR-RFLP  种系发育

Isolation and Identification of Cryptosporidium xiaoi from Tibetan Sheep
Abstract:
Keywords:
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