| E.coli木糖异构酶基因的克隆及表达条件的优化 |
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| 引用本文： | 许伟,严明,李永健,李艳,许琳.E.coli木糖异构酶基因的克隆及表达条件的优化[J].生物加工过程,2005,3(4):45-48. |
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| 作者姓名： | 许伟 严明 李永健 李艳 许琳 |
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| 作者单位： | 1. 南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009;盐城工学院,化学生物工程学院,盐城,224003
2. 南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009 |
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| 基金项目： | 国家“973”项目（编号为2003CB716000） |
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| 摘 要： | 采用PCR技术以大肠杆菌JM109基因组DNA为模板扩增得到木糖异构酶基因xylA,连接到载体pET-22b( ),得到重组质粒pET-22b( )-xylA。将此重组质粒转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,重组菌株经IPTG诱导后,通过半胱氨酸-咔唑法测得木糖异构酶活力。每mL发酵液中重组菌株显示出酶活力约为0.84 U。SDS-PAGE电泳结果显示出明显的5×104(相对分子质量)特异性蛋白质条带。
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| 关 键 词： | E．coli xylA基因 木糖异构酶 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1672-3678（2005）04-13045-04 |
| 收稿时间： | 2005-08-15 |
| 修稿时间： | 2005年8月15日 |
Cloning and expression of the E.coli D-xylose isomerase gene |
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| XU Wei,YAN Ming,LI Yong-jian,LI Yan,XU Lin.Cloning and expression of the E.coli D-xylose isomerase gene[J].Chinese Journal of Bioprocess Engineering,2005,3(4):45-48. |
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| Authors: | XU Wei YAN Ming LI Yong-jian LI Yan XU Lin |
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| Abstract: | The xylose isomerase gene of E.coli were successfully amplified by PCR reaction and were cloned in vector pET-22b( ).The recombinant vector pET-22b( )-xylA were transformed into E.coli BL21(DE3).After induction of IPTG the recombinant xylose isomerase activity was determined by the modified Cysteine-(arbazole) assay.The isomerase activity of broth given by the recombinant stain reached 0.84 U/mL.The specific protein band about 50 kD was showed in the SDS-PAGE gel. |
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| Keywords: | E coli xylA gene xylose isomerase clone expression |
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