PCR-特异探针杂交检测肿瘤组织 Ki-ras 基因点突变 |
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引用本文: | 范慕贞,许开明,曹淑兰,吴翚.PCR-特异探针杂交检测肿瘤组织 Ki-ras 基因点突变[J].生物化学与生物物理进展,1993,20(3):225-230. |
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作者姓名: | 范慕贞 许开明 曹淑兰 吴翚 |
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作者单位: | 中日友好临床医学所生化室;中日友好临床医学所生化室;中日友好临床医学所生化室;中日友好临床医学所生化室 |
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摘 要: | 用福尔马林固定-石腊包埋的人肿瘤组织切片,经脱腊处理直接用 PCR(poly-merase chain reaction)技术扩增 Ki-ras 癌基因序列中包括12,13位密码子的 DNA片段,并分别以5种含特异突变点的寡核苷酸探针代替3′端引物,经 PCR 扩增的产物作为点突变的阳性对照.用上述五种探针进行选择性斑点杂交,检测了人肺癌及结直肠癌组织的 Ki-ras 基因12及13位点突变.为了封闭杂交时的非特异结合,采用野生型冷探针与标记的含突变点的探针同时进行杂交的方法,有效地消除了杂交过程中可能产生的假阳性,而不影响真阳性反应的出现.因而增加了检测的可靠性.
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关 键 词: | PCR DNA 杂交 Ki-ras 点突变 |
收稿时间: | 1/8/1992 12:00:00 AM |
修稿时间: | 1992/3/20 0:00:00 |
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