| 诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 邱波,刘功振,王晓伟,王峰,陈洪博,成子强.诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[J].病毒学报,2011,27(2):151-157. |
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| 作者姓名： | 邱波 刘功振 王晓伟 王峰 陈洪博 成子强 |
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| 作者单位： | 山东农业大学,动物科技学院,山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室,泰安,271018;山东省医药工业研究所,济南,250033;山东农业大学,动物科技学院,山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室,泰安,271018 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30871856); 教育部高等学校科技创新工程重点项目; 山东省自然科学基金(Y2007D46) |
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| 摘 要： | 2007年7月至11月,中国开产前后的商品海兰褐蛋鸡群大面积暴发血管瘤,造成巨大经济损失。将病料接种DF1细胞,通过PCR和间接免疫荧光(IFA)确定此次暴发的血管瘤为J亚群白血病病毒(ALV-J)感染引起。从患病鸡群中分离到5株ALV-J(前4株已经报道),将第5株病毒命名为WS0705。为研究该毒株抗原性的特点,用PCR方法扩增出gp85基因,并克隆进pMD18-T载体进行测序。氨基酸系统进化树分析显示WS0705与英国ALV-J原型毒株HPRS-103同源性最高。从已构建的质粒pMD18-T-WS0705gp85中酶切回收gp85基因,构建重组转移载体pFastBacH Tb-WS0705gp85。利用Bac-to-Bac表达系统获得了重组杆状病毒rBac-WS0705gp85。间接免疫荧光和Western blot检测WS0705gp85基因的表达产物。间接免疫荧光显示,构建的重组杆状病毒感染的Sf9细胞呈现明显的强阳性反应;Western blot分析,重组病毒感染的Sf9细胞蛋白显示出约35kD的阳性条带。结果表明,WS0705gp85基因在Sf9细胞中得到良好的表达,并且其编码产物完全可以被外源性ALV-J的特异性单抗JE9识别,进一步证明本次暴发血管瘤的病原为ALV-J,并为进一步开发ALV-J相关诊断产品奠定了基础。
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| 关 键 词： | 血管瘤 J亚群禽自血病病毒 gp85基因 克隆 表达 |
Cloning and Expression of gp85 Gene of Subgroup J Avian Leukosis Virus Isolated from Hemangiomas |
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| QIU Bo,LIU Gong-zhen,WANG Xiao-wei,WANG Feng,CHEN Hong-bo,CHENG Zi-qiang.Cloning and Expression of gp85 Gene of Subgroup J Avian Leukosis Virus Isolated from Hemangiomas[J].Chinese Journal of Virology,2011,27(2):151-157. |
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| Authors: | QIU Bo LIU Gong-zhen WANG Xiao-wei WANG Feng CHEN Hong-bo CHENG Zi-qiang |
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| Institution: | QIU Bo1,2,LIU Gong-zhen1,WANG Xiao-wei1,WANG Feng1,CHEN Hong-bo1,CHENG Zi-qiang1*(1.Shandong Provintial Key Laboratory Amimal Biotechnology and Disease Control and Prevention,College of Animal Science and Veterinary Medicine Shandong Agricultural University,Tai'an 271018,China,2.Shandong Institute of Pharmaceutical Industry,Jinan 250033,China) |
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| Abstract: | During July to November in 2007,several outbreaks of Hemangiomas in Hy-line Brown laying hens were observed in China.The virus that infected these flocks was identified in cultured DF-1 cells by PCR and indirect fluorescent assay(IFA) with ALV-J specific monoclonal antibody JE-9.The gp85 gene of one strain named WS0705 of ALV-J was cloned and expressed.Phylogenetic analysis showed that gp85 amino sequences of WS0705 strain had the highest homology with that of the prototype HPRS-103.The gp85 gene from a con... |
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| Keywords: | hemangioma avian leukosis subgroup J gp85 gene clone expression |
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