链霉菌M1033 D-木糖异构酶的分子克隆 |
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引用本文: | 朱学良,王玉珍,黄震,刘兢,崔涛,董婉治,牛立文,徐洵.链霉菌M1033 D-木糖异构酶的分子克隆[J].生物工程学报,1992,8(3). |
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作者姓名: | 朱学良 王玉珍 黄震 刘兢 崔涛 董婉治 牛立文 徐洵 |
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作者单位: | 中国科学技术大学生物系,合肥 |
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摘 要: | 链霉菌M1033染色体DNA经BamH Ⅰ酶解后电泳,Southern转移。根据自测的链霉菌M1033 D-木糖异构酶氨基酸序列设计合成寡聚核苷酸探针x-2、x-3,以x-2、x-3及Am-pullariella sp3876 D-木糖异构酶基因(1.17kb)为探针进行杂交,确定与上述探针杂交最强处在15kb左右。从胶上分离出g-20kb大小的片段,克隆到EMBL 3载体中,经杂交筛选后,得到0.6%的阳性噬斑,其插人大小为13kh。将插入DNA的saIⅠ酶解片段(2.5kb)进一步亚克隆于pucl8,得到重组质粒puB l,经酶解图谱、部分序列分析和互补实验确定puBl含有完整的M1033 D-木糖异构酶基因
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关 键 词: | 链霉菌M1033 克隆 D-木糖异构酶基因 |
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