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链霉菌M1033 D-木糖异构酶的分子克隆
引用本文:朱学良,王玉珍,黄震,刘兢,崔涛,董婉治,牛立文,徐洵.链霉菌M1033 D-木糖异构酶的分子克隆[J].生物工程学报,1992,8(3).
作者姓名:朱学良  王玉珍  黄震  刘兢  崔涛  董婉治  牛立文  徐洵
作者单位:中国科学技术大学生物系,合肥
摘    要:链霉菌M1033染色体DNA经BamH Ⅰ酶解后电泳,Southern转移。根据自测的链霉菌M1033 D-木糖异构酶氨基酸序列设计合成寡聚核苷酸探针x-2、x-3,以x-2、x-3及Am-pullariella sp3876 D-木糖异构酶基因(1.17kb)为探针进行杂交,确定与上述探针杂交最强处在15kb左右。从胶上分离出g-20kb大小的片段,克隆到EMBL 3载体中,经杂交筛选后,得到0.6%的阳性噬斑,其插人大小为13kh。将插入DNA的saIⅠ酶解片段(2.5kb)进一步亚克隆于pucl8,得到重组质粒puB l,经酶解图谱、部分序列分析和互补实验确定puBl含有完整的M1033 D-木糖异构酶基因

关 键 词:链霉菌M1033  克隆    D-木糖异构酶基因
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