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青霉素酰化酶基因的克隆与表达I.青霉素酰化酶基因的克隆
引用本文:
杨胜利,吴汝平,姜增莲,冯一民,杨莉娟,张继宝,李美英,王镜新.青霉素酰化酶基因的克隆与表达I.青霉素酰化酶基因的克隆[J].生物工程学报,1985,1(1).
作者姓名:
杨胜利
吴汝平
姜增莲
冯一民
杨莉娟
张继宝
李美英
王镜新
作者单位:
中国科学院上海药物研究所,上海
摘 要:
用EcoR I—Pst I双酶解的pBR322作为克隆载体,从大肠杆菌D816染色体克隆了青霉素酰化酶基因,这个基陶位于9.1Kb EcoRI片段上。所得克隆株整体细胞酶学特性与大肠杆菌D816一致,酶反应最适温度为55℃,最适pH为7.8—8.0。以青霉素G作为底物时Km为10.3mM,转化产物为6一氨基青霉烷酸。克隆株大肠杆菌c600(pPAl)合成青霉索酰化酶仍需苯乙酸诱导并被葡萄糖阻遏,细胞青霉素酰化酶的活性比大肠杆菌c P1(高2—4倍。
关 键 词:
鸟枪法
基因克隆
青霉素酰化酶
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