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短小芽孢杆菌木聚糖酶基因在毕赤酶母中的分泌表达及酶学性质研究
引用本文:汪正兵,宋慧婷,等.短小芽孢杆菌木聚糖酶基因在毕赤酶母中的分泌表达及酶学性质研究[J].生物工程学报,2003,19(1):50-55.
作者姓名:汪正兵  宋慧婷
作者单位:[1]湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程研究室,武汉430062 [2]湖北大学化学与材料科学学院,武汉430062
基金项目:国家自然科学基金 (No.3 990 0 0 0 3 ),湖北省科技厅重点攻关项目 (No .992P0 3 2 0 ),武汉市科技局科技攻关项目 (No .992 0 0 2 0 5 4G) 资助~~
摘    要:将短小芽孢杆菌HB030的内切-1,4-木聚糖酶基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K,得到重组质粒pH-BM220,将pHBM220经酶切后分别转化三株毕赤酵母KM71、GS115、SMD1168,该木聚糖酶基因在三株毕赤酵母中均实现了分泌表达,将重组毕赤酵母KM71(pHBM220),GS115(pHBM220),GS115(pHBM220),SMD1168(pHBM220)分别诱导产酶,对重组酶进行相关的酶学性质分析表明,三的最适反应pH值约为5.5,最适反应温度约为60℃,在其最适反应条件下测得三粗酶液酶活分别为10.80IU/mL,11.63IU/mL,9.68IU/mL,重组毕赤酵母KM71(pHBM220)所产酶的热稳定性较好,而在pH稳定性方面三没有太大的差异。

关 键 词:短小芽孢杆菌  木聚糖酶基因  分泌表达  酶学性质  毕赤酵母
文章编号:1000-3061(2003)01-0050-06
修稿时间:2002年7月16日

Secreted Expression of Bacillus pumilus Xylanase Gene in Pichia pastoris and Study on Enzymatic Properties
JIANG Zheng Bing,SONG Hui Ting,MA Li Xin.Secreted Expression of Bacillus pumilus Xylanase Gene in Pichia pastoris and Study on Enzymatic Properties[J].Chinese Journal of Biotechnology,2003,19(1):50-55.
Authors:JIANG Zheng Bing  SONG Hui Ting  MA Li Xin
Institution:College of Life science, Hubei University, Wuhan 430062, China.
Abstract:The endo-1,4-xylanase gene from Bacillus pumilus HB030 was cloned into the Pichia pastoris expression vector, pPIC9k, the recombinant plasmid was named pHBM220. The digested recombinant plasmid pHBM220 was transformed into Pichia pastoris KM71, GS115, SMD1168, respectively. The recombinant Pichia pastoris KM71 (pHBM220), GS115 (pHBM220), SMD1168 (pHBM220) secreted functional endo-1,4-xylanase, and the enzymatic activities reached 10.80IU/mL, 11.63IU/mL, 9.68IU/mL, respectively. The temperature and pH optimum for the recombinant xylanase were 60 degrees C and pH5.5, respectively.
Keywords:Endo  1  4  xylanase gene      Pichia pastoris      expression      enzymatic properties
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