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假密环菌Armillariella tabescens EJLY2098 β-甘露聚糖酶的克隆、表达及性质分析
引用本文:王艳凤,王衡馨,黄小葵,刘大岭,姚冬生.假密环菌Armillariella tabescens EJLY2098 β-甘露聚糖酶的克隆、表达及性质分析[J].生物工程学报,2009,25(6).
作者姓名:王艳凤  王衡馨  黄小葵  刘大岭  姚冬生
作者单位:暨南大学微生物生物技术研究所,广州,510632
摘    要:本研究利用RT-PCR和RACE技术从Armillariella tabescens EJLY2098(一种食用真菌)中克隆出了β-甘露聚糖酶的全长cDNA,构建到pPICZaA载体上,并在毕赤酵母GSIl5中表达了含His标签的β-甘露聚糖酶(re-atMAN47).该酶的全长cDNA共1481 bp,编码445个氨基酸,序列分析表明该序列除含有β-甘露聚糖酶结构域外,还含有CBD和GHF5的结构域,因此可被归为糖苷水解酶家族5的一个新成员.诱导培养72 h时重组酶活可达到1.067 U/mL,蛋白含量为440 mg/L.重组酶的最适反应温度为60℃.在30℃~65℃比较稳定;酶促最适pH为5.5、4.5~7.0之间比较稳定.这是首次关于Armillariella.tabescens EJLY2098产β-甘露聚糖酶的报道,得到了一个有较好热稳定性、pH稳定性和生物安全性的糖苷水解酶,将在饲料,食品、药物生产等方面有广泛的应用.

关 键 词:β-1  4  甘露聚糖酶  Armillariella  tabescens  EJLY2098  酶学性质  GHF5

Cloning, expression and characterization of mannanase from Armillariella tabescens EJLY2098 in Pichia pastoris
Yanfeng Wang,AdaHangHeng Wong,Xiaokui Huang,Daling Liu,Dongsheng Yao.Cloning, expression and characterization of mannanase from Armillariella tabescens EJLY2098 in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Biotechnology,2009,25(6).
Authors:Yanfeng Wang  AdaHangHeng Wong  Xiaokui Huang  Daling Liu  Dongsheng Yao
Abstract:
Keywords:β-mannanase  Armillariella tabescens EJLY2098  characterization  GHF5
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