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针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞的抑制作用
引用本文:王端明,王敬晗,李林芳,陈静波,苏长青.针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞的抑制作用[J].生物工程学报,2012,28(5):623-631.
作者姓名:王端明  王敬晗  李林芳  陈静波  苏长青
作者单位:石河子大学医学院 新疆地方与民族高发病实验室,新疆 石河子 832000;第二军医大学东方肝胆外科医院 分子肿瘤研究室,上海 200438;第二军医大学东方肝胆外科医院 分子肿瘤研究室,上海 200438;新疆畜牧科学院,新疆 乌鲁木齐 830000;第二军医大学东方肝胆外科医院 分子肿瘤研究室,上海 200438
基金项目:国家科技重大计划新药创制项目 (No. 2009ZX09102-235),国家自然科学基金 (No. 81071866)资助。
摘    要:转录因子Oct-4和Survivin是细胞增殖的关键调控因子,构建针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体Ad5-Dual-shRNA,并研究其对肝癌细胞及移植瘤的生长抑制作用。合成Oct-4和Survivin基因的shRNA序列,插入腺病毒穿梭载体pDC312,含有shRNA的穿梭载体与腺病毒骨架载体pBHGloxdeltaE13Cre共转染HEK293细胞,经Cre/LoxP位点特异性重组获得重组腺病毒Ad5-Dual-shRNA;腺病毒Ad5-Dual-shRNA感染肝癌细胞系EHBH-H1,经Western blotting检测Oct-4和Survivin基因的表达情况,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐染色法(MTT实验)和裸鼠荷瘤实验检测对肿瘤细胞生长的影响。研究结果显示,双靶向重组腺病毒Ad5-Dual-shRNA感染肝癌细胞系EHBH-H1能够有效沉默Oct-4与Survivin基因的表达,并且在MTT实验和裸鼠荷瘤试验中都显示出较单一靶向的shRNA腺病毒载体Ad5-Surv-shRNA、Ad5-Oct4-shRNA具有更为明显的肿瘤细胞生长抑制作用。实验结果表明,特异性双靶向shRNA腺病毒载体Ad5-Dual-shRNA是一种更为高效的靶向肿瘤基因治疗载体。

关 键 词:Oct-4  Survivin  shRNA  肝癌  腺病毒
收稿时间:2011/10/25 0:00:00

Construction of adenovirus carrying dual-target shRNA for Oct-4 and Survivin and its inhibitory effect on human hepatocellular carcinoma cells
Duanming Wang,Jinghan Wang,Linfang Li,Jingbo Chen and Changqing Su.Construction of adenovirus carrying dual-target shRNA for Oct-4 and Survivin and its inhibitory effect on human hepatocellular carcinoma cells[J].Chinese Journal of Biotechnology,2012,28(5):623-631.
Authors:Duanming Wang  Jinghan Wang  Linfang Li  Jingbo Chen and Changqing Su
Institution:Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, School of Medicine, Shihezi University, Shihezi 832000, Xinjiang, China;Department of Molecular Oncology, Eastern Hepatobiliary Surgical Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200438, China;Department of Molecular Oncology, Eastern Hepatobiliary Surgical Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200438, China;Animal Science Academy of Xinjiang Uygur Autonomous Region, Urumqi 830000, Xinjiang, China;Department of Molecular Oncology, Eastern Hepatobiliary Surgical Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200438, China
Abstract:
Keywords:Oct-4  Survivin  shRNA  liver cancer  adenovirus
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