荷花花蕾cDNA文库构建及质量评价 |
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引用本文: | 吴璇,张大生,田代科,张微微,刘青青,刘凤栾,陈青,赵喜双,吴少华.荷花花蕾cDNA文库构建及质量评价[J].亚热带植物科学,2016(1):48-52. |
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作者姓名: | 吴璇 张大生 田代科 张微微 刘青青 刘凤栾 陈青 赵喜双 吴少华 |
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作者单位: | 1. 福建农林大学园艺学院,福建福州350002;中国科学院上海辰山植物科学研究中心,上海辰山植物园,上海 201602;上海市资源植物功能基因组学重点实验室,上海 201602;2. 中国科学院上海辰山植物科学研究中心,上海辰山植物园,上海 201602;上海市资源植物功能基因组学重点实验室,上海 201602;3. 上海农林职业技术学院园艺园林系,上海,201699;4. 福建农林大学园艺学院,福建福州,350002 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31572158),上海市绿化和市容管理局科技攻关项目(F112421;G152422),上海市科学技术委员会课题(14DZ2260400) |
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摘 要: | 为理解荷花Nelumbo nucifera花器官转录组表达情况,分别选取不同花型的代表品种‘洪湖红莲’Nelumbo nucifera‘Honghu Honglian’(单瓣)、‘唐招提寺莲’N.nucifera‘Tangzhaotisi Lian’(重瓣)和‘千瓣莲’N.nucifera‘Qianban Lian’(千瓣及全重瓣)的花蕾为材料分离mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA,经限制性内切酶Sfi I酶切后回收去掉接头和500 bp以下片段的c DNA。将c DNA与p UC19载体连接,构建荷花花蕾cDNA文库。经检测,该文库容量为1.12×106 pfu·m L-1,插入片段大小集中在500~2000 bp,重组率为95%。该文库的成功构建为荷花花蕾期转录组数据的开发及其花器官发育相关基因的功能研究奠定了分子基础。
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关 键 词: | 荷花 花蕾 cDNA文库 |
Construction and Identification of Flower Buds cDNA Library of Asian Lotus(Nelumbo nucifera) |
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Abstract: | |
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