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卷枝毛霉中苹果酸酶同工酶V的酶学性质
引用本文:张映曈,陈海琴,宋元达,张灏,陈永泉,陈卫.卷枝毛霉中苹果酸酶同工酶V的酶学性质[J].微生物学报,2016,56(2):309-316.
作者姓名:张映曈  陈海琴  宋元达  张灏  陈永泉  陈卫
作者单位:江南大学食品学院, 江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 江苏 无锡 214122,江南大学食品学院, 江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 江苏 无锡 214122,江南大学食品学院, 江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 江苏 无锡 214122,江南大学食品学院, 江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 江苏 无锡 214122,江南大学食品学院, 江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 江苏 无锡 214122,江南大学食品学院, 江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 江苏 无锡 214122
基金项目:国家自然科学基金(21276108,31271812)
摘    要:【目的】探讨卷枝毛霉中苹果酸酶同工酶V的性质。【方法】克隆卷枝毛霉中编码苹果酸酶同工酶V的mel基因并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,利用His标签纯化获得了高纯度的重组酶BLME1,并进行酶学性质分析。【结果】该重组酶最适pH为8.0,最适温度为33℃,在此条件下酶活达到92.8 U/mg,对底物L-苹果酸和NADP~+的米氏常数K_m值为0.74960±0.06129 mmol/L和0.22070±0.01810 mmol/L,最大反应速度V_(max)分别为72.820±1.077 U/mg和86.110±1.665 U/mg。金属离子Mg~(2+)、Mn~(2+)、Co~(2+)、Ni~(2+)可以激活BLME1的活性,而Ca~(2+)、Cu~(2+)对BLME1活性则有抑制作用,中间代谢产物草酰乙酸和α-酮戊二酸也会抑制BLME1的活性,但琥珀酸却对BLME1有激活作用。【结论】本实验调查了卷枝毛霉苹果酸酶同工酶V的最适反应温度和pH、动力学参数,以及各种金属离子和中间代谢产物对酶活力的影响,这为以后深入研究该苹果酸酶的功能提供了理论依据和参考。

关 键 词:卷枝毛霉  苹果酸酶  酶学性质  金属离子  中间代谢产物
收稿时间:8/3/2015 12:00:00 AM
修稿时间:2015/9/29 0:00:00

Characterization of a malic enzyme isoform V from Mucor circinelloides
Yingtong Zhang,Haiqin Chen,Yuanda Song,Hao Zhang,Yongquan Chen and Wei Chen.Characterization of a malic enzyme isoform V from Mucor circinelloides[J].Acta Microbiologica Sinica,2016,56(2):309-316.
Authors:Yingtong Zhang  Haiqin Chen  Yuanda Song  Hao Zhang  Yongquan Chen and Wei Chen
Institution:State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China and State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China
Abstract:
Keywords:Mucor circinelloides  malic enzyme  enzymatic property  metal iron  metabolic intermediate
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