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人纤溶酶原饼环区5(hPK5)基因的分泌型表达
引用本文:牛勃,陈显久,张东昌,解军,张悦红,杨琦,程牛亮.人纤溶酶原饼环区5(hPK5)基因的分泌型表达[J].中国生物工程杂志,2003,23(9):91-95.
作者姓名:牛勃  陈显久  张东昌  解军  张悦红  杨琦  程牛亮
作者单位:1. 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室 太原 030001; 2. 山西省眼科医院眼底病科 太原 030001
基金项目:山西省归国留学人员基金资助项目 (No .2 0 0 0 -41)
摘    要:构建人纤溶酶原饼环区5(hPK5)基因的原核可溶性表达载体并进行表达和纯化,获取大量高纯度、具有生物活性的hPK5蛋白。以纤溶酶原cDNA为模板,PCR扩增了hPK5基因,经过适当酶切后构建表达载体pET22b(+)hPK5,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达并经组氨酸亲和层析获得纯化。带有重组质粒pET22b(+)hPK5的大肠杆菌经IPTG诱导后以可溶性形式表达16kDa的蛋白,其表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化后目的蛋白纯度达95%以上,Western印迹表明重组蛋白具有Histag抗原活性。构建了pET22b(+)hPK5重组质粒并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达,为获得大量hPK5基因工程产品奠定了实验基础。

关 键 词:人纤溶酶原饼环区5  基因克隆  原核表达  
修稿时间:2002年12月24

Expression of Human Plasminogen Kringle 5 (hPK-5) Gene in Soluble Form in E.coli
Niu BoChen Xianjiu Zhang Dongchang,Xie Jun Zhang YuehongYang Qi Cheng Niuliang.Expression of Human Plasminogen Kringle 5 (hPK-5) Gene in Soluble Form in E.coli[J].China Biotechnology,2003,23(9):91-95.
Authors:Niu BoChen Xianjiu Zhang Dongchang  Xie Jun Zhang YuehongYang Qi Cheng Niuliang
Institution:Niu Bo1Chen Xianjiu 1Zhang Dongchang 2 Xie Jun1 Zhang Yuehong1Yang Qi1 Cheng Niuliang1(1 Department of Biochemistry & Molecular Biology of Shanxi Medical UniversityTaiyuan030001)(2 Shanxi Ophthalmic HospitalTaiyuan030001)
Abstract:
Keywords:hPK-5/human plasminogen kringle 5  Gene cloningProkaryotic expression
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