人纤溶酶原饼环区5(hPK5)基因的分泌型表达

中国生物工程杂志

2003, Vol. 23

Issue (9): 91-95

论文

人纤溶酶原饼环区5(hPK5)基因的分泌型表达

牛勃¹, 陈显久¹, 张东昌², 解军¹, 张悦红¹, 杨琦¹, 程牛亮¹

1. 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原 030001;
2. 山西省眼科医院眼底病科太原 030001

全文: PDF(225 KB) HTML

摘要：

构建人纤溶酶原饼环区5(hPK5)基因的原核可溶性表达载体并进行表达和纯化,获取大量高纯度、具有生物活性的hPK5蛋白。以纤溶酶原cDNA为模板,PCR扩增了hPK5基因,经过适当酶切后构建表达载体pET22b(+)hPK5,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达并经组氨酸亲和层析获得纯化。带有重组质粒pET22b(+)hPK5的大肠杆菌经IPTG诱导后以可溶性形式表达16kDa的蛋白,其表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化后目的蛋白纯度达95%以上,Western印迹表明重组蛋白具有Histag抗原活性。构建了pET22b(+)hPK5重组质粒并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达,为获得大量hPK5基因工程产品奠定了实验基础。

关键词： 人纤溶酶原饼环区5; 基因克隆; 原核表达

出版日期: 2003-09-25

基金资助:

山西省归国留学人员基金资助项目 (No .2 0 0 0 -41)

	服务
	把本文推荐给朋友
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章

引用本文:

牛勃, 陈显久, 张东昌, 解军, 张悦红, 杨琦, 程牛亮. 人纤溶酶原饼环区5(hPK5)基因的分泌型表达[J]. 中国生物工程杂志, 2003, 23(9): 91-95.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2003/V23/I9/91

[1]	乔圣泰,王曼琦,徐慧妮. 番茄SlTpx原核表达蛋白的体外功能分析^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(8): 25-32.
[2]	张磊,唐永凯,李红霞,李建林,徐逾鑫,李迎宾,俞菊华. 促进原核表达蛋白可溶性的研究进展 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(2/3): 138-149.
[3]	张潇航,李媛媛,贾敏晅,顾奇. 弹性蛋白样生物材料的制备及性质鉴定 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(8): 33-40.
[4]	吕一凡,李更东,薛楠,吕国梁,时邵辉,王春生. **LbCpf1基因的原核表达、纯化与体外切割检测 ^***[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(8): 41-48.
[5]	李彤彤,宋彩玲,杨凯越,王文静,陈慧宇,刘明. 抗犬细小病毒VP2蛋白单链抗体的制备与中和活性研究 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(4): 10-16.
[6]	陈秋利,杨丽超,李辉,温莎,李刚,何敏. 人Nek2蛋白原核表达纯化及其多克隆抗体制备 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(3): 31-37.
[7]	杨隆兵,国果,马慧玲,李妍,赵欣宇,苏佩佩,张勇. 家蝇抗菌肽AMPs17蛋白原核表达条件的优化及其抗真菌活性检测 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(4): 24-31.
[8]	李明英,王仁军,张帆,迟彦. β2糖蛋白Ⅰ第五结构域及其突变体、短肽片段的原核表达及活性分析 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(8): 1-9.
[9]	陈远侨,龙定沛,豆晓雪,祁润,赵爱春. ELP₃₀-tag蛋白纯化能力的原核表达研究[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(2): 54-60.
[10]	何亚南,孙钰椋,任雅坤,梁盛英,杨芬,刘彦礼,林俊堂. 金黄色葡萄球菌类肠毒素K与GFP融合蛋白工程菌的构建及其表达蛋白生物学活性分析 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(12): 14-20.
[11]	任建委,李军,李尚泽. 人源CT55蛋白原核表达及单克隆抗体的制备 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(11): 1-8.
[12]	柳双双,吴锁伟,饶力群,万向元. 玉米核雄性不育的分子机制研究与应用分析[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(1): 100-107.
[13]	张艳芳, 孙瑞芬, 郭树春, 侯建华. 向日葵V-ATPase a3亚基基因的克隆及表达分析[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(5): 19-27.
[14]	孙文佳, 姚宇峰, 杨旭, 黄惟巍, 刘存宝, 龙琼, 褚晓杰, 马雁冰. 乙肝核心抗原病毒样颗粒呈现HPV 16L1抗原表位及特异抗体诱导[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(3): 58-64.
[15]	项丽, 王申, 田海山, 钟美娟, 周汝滨, 曹定国, 梁朋, 张国平, 何滔, 庞实锋. 小鼠c-Myc基因的克隆表达及其纯化[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(2): 20-25.

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed