| 玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因克隆、表达及功能鉴定 |
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| 引用本文： | 黄英,林芳,雷攀先,梁甲元,李雪,杜丽琴,黄日波,韦宇拓.玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因克隆、表达及功能鉴定[J].生物技术,2013,23(1):11-16. |
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| 作者姓名： | 黄英 林芳 雷攀先 梁甲元 李雪 杜丽琴 黄日波 韦宇拓 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530004;亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁530004
2. 广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530004;亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁530004;广西科学院,广西南宁530007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，广西科学与研究开发计划科技攻关与新产品试制项目，广西研究生教育创新计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因(Srt)使其在大肠杆菌XL10-Gold中高效表达,并对重组酶的酶学特性进行研究。方法:利用PCR技术从玫瑰链霉菌中克隆到一段长1 704bp的海藻糖合成酶基因(Srt),构建重组表达质粒pSE380-Srt-treS,将其转化大肠杆菌XL10-Gold中诱导表达,对重组纯酶进行SDS-PAGE分析及酶学特性测定。结果:SDS-PAGE显示在65kDa处有明显单一蛋白条带。该酶可催化麦芽糖和海藻糖之间的可逆反应,海藻糖得率达82%,且含有很低的副产物葡萄糖(5%左右)。最适反应温度和pH分别为30℃、7.5,Cu2+、Zn2+和Tris能明显抑制酶活力。该酶还可催化蔗糖生成一种无龋齿,适合糖尿病患者食用的糖类-海藻酮糖。结论:成功克隆表达了一个海藻糖合成酶基因,该酶转化率高,副产物较少,为工业酶法生产海藻糖奠定基础。
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| 关 键 词： | 玫瑰链霉菌 海藻糖合成酶 克隆表达 酶学性质 |
Cloning, Expression and Characterization of a Novel Gene Encoding Trehalose Synthase from Streptosporangium roseum |
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| HUANG Ying
,
LIN Fang
,
LEI Pan-xian
,
LIANG Jia-yuan
,
LI Xue
,
DU Li-qin
,
HUANG Ri-bo
,
WEI Yu-tuo.Cloning, Expression and Characterization of a Novel Gene Encoding Trehalose Synthase from Streptosporangium roseum[J].Biotechnology,2013,23(1):11-16. |
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| Authors: | HUANG Ying LIN Fang LEI Pan-xian LIANG Jia-yuan LI Xue DU Li-qin HUANG Ri-bo WEI Yu-tuo |
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| Institution: | 1,2(1.College of Life Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530004,China; 2.State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Nanning 530004,China; 3.Guangxi Academy of Sciences,Nanning 530007,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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