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| MGB(Minor Groove Binder)复合探针二重实时定量PCR检测大肠杆菌O157 | |
| 引用本文： | 朱向玲,严亚贤,陆承平,刘佩红,王建,沈莉萍.MGB(Minor Groove Binder)复合探针二重实时定量PCR检测大肠杆菌O157[J].微生物学通报,2007,34(5):0897-0900. |
| 作者姓名： | 朱向玲 严亚贤 陆承平 刘佩红 王建 沈莉萍 |
| 作者单位： | 1. 上海交通大学农业与生物学院,上海,20110;南京农业大学动物医学院,南京,210095 2. 上海交通大学农业与生物学院,上海,20110 3. 上海市畜牧兽医站,上海,201103 |
| 基金项目： | 上海市科技兴农科技攻关项目;上海市科委资助项目 |
| 摘 要： | 以大肠杆菌O157rfbE和stx2为待检靶基因,设计两对引物和两条MGB探针,rfbE和stx2探针5′端分别用FAM和VIC基团标记,3′端均用Taqman-MGB标记。建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法,可检测的最低DNA浓度是10拷贝/μL;实验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性,而非O157菌株检测结果均为阴性;重复性实验中,批间差异小于80%,批内差异小于70%。实验结果显示此二重荧光定量PCR方法可对分离的可疑大肠杆菌O157菌株进行快速鉴定,同时得知菌株是否携带stx2毒力基因,有利于菌株毒力强弱的判定。 |
| 关 键 词： | 大肠杆菌O157 荧光定量PCR MGB探针 |
| 文章编号： | 0253-2654（2007）05-0897-04 |
| 修稿时间： | 2006-12-11 |
Application of Duplex Real-time PCR for Detection of Escherichia coli O157 by Using MGB Fluorescence Probe |
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| ZHU Xiang-Ling,YAN Ya-Xian,LU Cheng-Ping,LIU Pei-Hong,WANG Jian and SHEN Li-Ping.Application of Duplex Real-time PCR for Detection of Escherichia coli O157 by Using MGB Fluorescence Probe[J].Microbiology,2007,34(5):0897-0900. | |
| Authors: | ZHU Xiang-Ling YAN Ya-Xian LU Cheng-Ping LIU Pei-Hong WANG Jian and SHEN Li-Ping |
| Institution: | 1 Agricultural and Biological College of Shanghai Jiaotong University, Shanghai 201101;2 Veterinary College of Nanjing Agricultural University, Nanfing 210095;3 Shanghai Animal Husbandry and Veterinary Station, Shanghai 201103 |
| Abstract: | |
| Keywords: | rfbEE stx2 |
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