|
|||||
|
|
| 紫云英ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化 | |
| 引用本文： | 孙清信,陈 坚,张 辉,祁建民,林忠平,胡鸢雷,林新坚.紫云英ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化[J].植物遗传资源学报,2012,13(5):870-878. |
| 作者姓名： | 孙清信 陈 坚 张 辉 祁建民 林忠平 胡鸢雷 林新坚 |
| 作者单位： | 1. 福建省农业科学院,福州350003;福建农林大学生命科学院,福州350002;北京大学生命科学院,北京100871 2. 福建省农业科学院,福州,350003 3. 福建农林大学生命科学院,福州,350002 4. 北京大学生命科学院,北京,100871 |
| 基金项目： | 本研究由国家公益性行业(农业)专项(201103005);福建省省长基金项目(Sbxd0903)；福建省财政专项“福建省农业科学科技创新团队建设基金”(STIF_Y01)专项经费资助。 |
| 摘 要： | 以紫云英为研究材料,用哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物和11种株系紫云英品种的DNA为模板进行PCR扩增,筛选出33条扩增条带较好的ISSR引物,对其中的ISSR引物进行梯度PCR,筛选出最佳的退火温度。再采用正交试验和单因素试验相结合的方法对紫云英ISSR-PCR反应体系的5种因素(模板、Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化浓度。确立了适合紫云英的ISSR分析的反应体系。在25μl反应体系中,其反应浓度为:DNA模版50.00ng,Mg2+2.00mol/L,Taq聚合酶1.0 U,dNTP 0.25mmol/L,引物0.20μmol/L,2.5μl 10×buffer。本试验为以后利用ISSR技术进行紫云英遗传多样性分析和物种保护奠定了技术基础。 |
| 关 键 词： | 紫云英 退火温度 ISSR引物 正交试验 体系优化 |
| 收稿时间： | 2011/10/5 0:00:00 |
| 修稿时间： | 6/1/2012 5:10:07 PM |
Optimization of ISSR's Primer and PCR Reaction System for Astragalus sinicus L. |
|
| SUN Qing-xin , Chen Jian , ZHANG Hui , QI Jian-min , LIN Zhong-ping , HU Yuan-lei , LIN Xin-jian.Optimization of ISSR's Primer and PCR Reaction System for Astragalus sinicus L.[J].Journal of Plant Genetic Resources,2012,13(5):870-878. | |
| Authors: | SUN Qing-xin Chen Jian ZHANG Hui QI Jian-min LIN Zhong-ping HU Yuan-lei LIN Xin-jian |
| Institution: | 1(1Fujian Academy of Agricultural Sciences,Fuzhou 350003,2College of Life Sciences,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002,3College of Life Sciences,Peking University,Beijing 100871) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Astragalus sinicus AnneaLing temperature primers of ISSR Orthogonal design system optimization |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |
| 点击此处可从《植物遗传资源学报》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《植物遗传资源学报》下载免费的PDF全文 | |