猪体细胞核移植重构胚的体外发育

以卵丘细胞为核供体细胞组成重构胚，卵裂率达到56．7％，发育至桑椹胚率达到11．7％，囊胚率为6．7％，显著高于成纤维细胞重构胚（P＜0．05）。本文还研究了卵母细胞的采集方法、激活程序和卵龄对卵丘细胞核移植重构胚体外发育的影响。以血清饥饿法将卵丘细胞诱导G0/G1期，抽吸法／解剖法采集卵母细胞，体外培养33－44h，将卵丘细胞放至去核卵母细胞的卵周隙中，重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6－DMAP激活处理，体外培养6d。研究表明，卵母细胞采集方法、激活液中细胞松驰素（CB）、激活程度并不影响重构胚的发育（以卵龄44h的卵母细胞为受体）；而以电脉冲结合6－DMAP激活处理能提高重构胚发育能力（以卵龄33h的卵母细胞为受体）（P＜0．05）。本研究显示，以电脉冲结合6－DMAP激活卵丘细胞重构胚，体外能发育至囊胚。