利用CRISPR/Cas9技术构建基因编辑大鼠模型 |
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引用本文: | 刘梅珍,王立人,李咏梅,马雪云,韩红辉,李大力.利用CRISPR/Cas9技术构建基因编辑大鼠模型[J].遗传,2023(1):78-87. |
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作者姓名: | 刘梅珍 王立人 李咏梅 马雪云 韩红辉 李大力 |
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作者单位: | 华东师范大学生命科学学院 |
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摘 要: | RNA介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统由单链引导RNA(sgRNA)与核酸酶Cas9构成。在细胞内,sgRNA能够按照碱基互补配对的原则引导Cas9与靶点结合,由Cas9切割目标DNA,造成双链DNA断裂(double stranded break, DSB)。在随后的DNA修复过程中,细胞主要进行非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)或在有修复模板存在的情况下进行重组修复(homology directed repair, HDR)。如果将CRISPR/Cas9系统以及修复模板通过显微注射的方式导入大鼠的胚胎内,就能借助细胞的修复机制实现大鼠胚胎的基因编辑,由此构建各种基因修饰大鼠模型。本文详细介绍了利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建大鼠模型的具体操作步骤,以期为相关领域的科研人员提供一种大鼠基因修饰模型的构建方法。
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关 键 词: | 大鼠 CRISPR/Cas9 基因编辑 基因敲除 |
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