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| 长引物P CR法构建白念珠菌SCH9-MYC融合菌 | |
| 引用本文： | 徐秋荣,吕权真,隋雪,王晓娟,阎澜,姜远英.长引物P CR法构建白念珠菌SCH9-MYC融合菌[J].中国真菌学杂志,2015(3). |
| 作者姓名： | 徐秋荣 吕权真 隋雪 王晓娟 阎澜 姜远英 |
| 作者单位： | 1. 福建中医药大学药学院中药学教研室,福州,350108 2. 第二军医大学药学院新药研究中心,上海,200433 3. 第二军医大学药学院新药研究中心，上海200433; 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院，沈阳110016 4. 第二军医大学药学院新药研究中心，上海200433; 中国药科大学药学院，南京210009 5. 福建中医药大学药学院中药学教研室，福州 350108; 第二军医大学药学院新药研究中心，上海200433 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(81470158，81330083)；国家973基金 |
| 摘 要： | 目的：构建白念珠菌SCH9?MYC融合菌。方法运用长引物PCR扩增含有MYC标签和ARG4筛选标记的质粒序列，采用醋酸锂转染法将质粒序列同源重组到白念珠菌SN152的SCH9基因开放阅读框的C末端，在SC?Leu?选择性培养基上筛选阳性克隆，抽取阳性克隆基因组进行PCR验证，将验证为阳性的转染子进行生长曲线测定、spot assay、菌丝诱导实验，进一步筛选出表型正常的融合菌。结果通过PCR验证鉴定出3株融合菌构建正确，通过生长曲线测定、spot assay、菌丝诱导实验筛选出两株表型正常的融合菌菌株。结论运用长引物PCR扩增方法同源重组可以正确构建白念珠菌SCH9?MYC融合菌菌株。 |
| 关 键 词： | 白念珠菌 MYC SCH9 长引物 |
Construction of MYC-tagged Sch9p in Candida albicans by using of long primers PCR amplification |
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| XU Qiurong,LV Quanzhen,SUI Xue,WANG Xiaojuan,YAN Lan,JIANG Yuanying.Construction of MYC-tagged Sch9p in Candida albicans by using of long primers PCR amplification[J].Chinese JOurnal of Mycology,2015(3). | |
| Authors: | XU Qiurong LV Quanzhen SUI Xue WANG Xiaojuan YAN Lan JIANG Yuanying |
| Abstract: | |
| Keywords: | Candida albicans MYC SCH9 long primer |