| 香菇C91-3转录本Unigene 24277基因克隆表达及其生物学活性的研究 |
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| 引用本文： | 田丽,钟民涛,刘奔,张伟,王晓丽,李星云,曹婧,宁安红,黄敏.香菇C91-3转录本Unigene 24277基因克隆表达及其生物学活性的研究[J].微生物学杂志,2015(5):47-52. |
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| 作者姓名： | 田丽 钟民涛 刘奔 张伟 王晓丽 李星云 曹婧 宁安红 黄敏 |
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| 作者单位： | 大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室，辽宁 大连 116044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学青年基金项目（81301955） |
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| 摘 要： | 通过对香菇C91-3转录本Unigene 24277基因的生物信息学分析，克隆表达含RCC1结构域的Unigene 24277基因，并研究其抗肿瘤活性。从香菇C91-3菌丝体中提取总RNA，反转录合成cDNA，并利用Rapid Amplification of cDNA Ends（RACE）技术获得基因全长。NCBI数据库分析提示其含有RCC1结构域。PCR扩增RCC1结构域，将其克隆产物与pET-32a（+）载体连接，热转化至E.coil Rosetta-gami（DE3）中诱导表达，纯化、复性后，通过MTT法研究其抗肿瘤活性。结果显示原核表达载体构建成功，重组蛋白成功诱导表达，并初步证明了重组蛋白具有抑制肿瘤细胞增殖活性的功能，为后续抗肿瘤机制的探究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 香菇C91-3 克隆 生物信息学 RCC1 |
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