| 抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA的建立及在肝癌中的应用 |
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| 引用本文： | 谢姣贵,王毅超,郭欣,宋朝君,赵宁,陈勇.抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA的建立及在肝癌中的应用[J].现代生物医学进展,2016,16(11):2022-2026. |
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| 作者姓名： | 谢姣贵 王毅超 郭欣 宋朝君 赵宁 陈勇 |
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| 作者单位： | 第四军医大学西京医院肝胆胰脾外科；天津医科大学医学检验学院；第四军医大学基础部免疫学教研室；第四军医大学生物技术中心；解放军第十五医院泌尿外科 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究面上项目（81070363,81372607） |
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| 摘 要： | 目的:制备抗人Dysbindin-1特异性单克隆抗体,建立DAS-ELISA检测体系,并初步应用于肝癌血清的检测。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗Dysbindin-1单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和SDS-PAGE电泳法检测抗体的亚类、滴度;采用DAS-ELISA技术制备Dysbindin-1检测试剂盒,检测正常、肝硬化及肝癌患者各30例血清并比较其差异。结果:细胞融合后获得了4株稳定产生抗Dysbindin-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1C6A11、1E8H3、2D1C11、5B6D4),抗体亚类分别为IgG2b,IgG2b,IgG1和IgG2a,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106以上,通过抗体配对实验筛选确定2D1C11作为包被抗体,1E8H3作为酶标抗体。该ELISA方法线性范围为62.5-1000ng/mL,检测限为62.5ng/mL;应用该方法检测显示正常组与肝硬化组及肝癌组间差异显著(P0.001),Dysbindin-1诊断肝癌的敏感性和特异性分别为90%和93.3%。结论:Dysbindin-1可以成为新的候选的肝癌血清标志物,抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA体系可以初步应用于肝癌的早期诊断。
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| 关 键 词： | Dysbindin-1 单克隆抗体 DAS-ELISA 肝癌 |
Establishment and Application DAS-ELISA of Antibody against Dysbindin-1 Polypeptides in Hepatocellular Carcinoma |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dysbindin-1 Monoclonal Antibodies ELISA Hepatocellular carcinoma |
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