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用Far-Western印迹技术筛选人肝组织中与乙肝病毒表面抗原PreS1相互作用的蛋白
引用本文:苏婧,杨静,张松,丁晓然,王学军,胡伟,朱向前,张敏丽,王升启.用Far-Western印迹技术筛选人肝组织中与乙肝病毒表面抗原PreS1相互作用的蛋白[J].生物技术通讯,2010,21(3):355-358.
作者姓名:苏婧  杨静  张松  丁晓然  王学军  胡伟  朱向前  张敏丽  王升启
作者单位:1. 华南师范大学,生命科学学院,广东,广州,510631;军事医学科学院,放射与辐射医学研究所,北京,100850
2. 军事医学科学院,放射与辐射医学研究所,北京,100850
基金项目:国家自然科学基金重点项目,国家自然科学基金面上项目,国家自然科学基金杰出青年科学基金,国家重点基础研究发展规划(973计划),国家传染病防治科技重大专项项目 
摘    要:目的:利用Far-Western印迹技术从正常人肝组织中筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原PreS1结合蛋白,为阐明HBV的感染致病机理提供依据。方法:提取正常人肝组织细胞膜蛋白,双向电泳展示后转膜,对表达纯化获得的PreS1的重要片段与GST的融合蛋白PreS/1-48myr-GST进行Far-Western印迹实验,对筛选获得的蛋白点切胶,质谱鉴定。结果:对PreS/1-48myr-GST融合蛋白进行Far-Western-2D筛选,共获得22个蛋白点,经质谱鉴定获得15个候选相互作用蛋白,其中膜蛋白Ezrin可能在HBV感染致病过程中具有重要作用。结论:Ezrin蛋白能够与乙肝病毒表面抗原PreS1结合,其在HBV感染致病过程中的重要作用值得探索。

关 键 词:乙型肝炎病毒表面抗原  PreS1  结合蛋白  Ezrin  Far-Western印迹

Identification of Proteins Interacting with the Hepatitis B Virus Surface Antigen PreS1 in Human Liver by Far-Western Blot
SU Jing,YANG Jing,ZHANG Song,DING Xiao-Ran,WANG Xue-Jun,HU Wei,ZHU Xiang-Qian,ZHANG Min-Li,WANG Sheng-Qi.Identification of Proteins Interacting with the Hepatitis B Virus Surface Antigen PreS1 in Human Liver by Far-Western Blot[J].Letters in Biotechnology,2010,21(3):355-358.
Authors:SU Jing  YANG Jing  ZHANG Song  DING Xiao-Ran  WANG Xue-Jun  HU Wei  ZHU Xiang-Qian  ZHANG Min-Li  WANG Sheng-Qi
Institution:1.School of Life Sciences,South Normal University,Guangzhou 510631;2.Beijing Institute of Radiation Medicine,Beijing 100850;China
Abstract:Objective:To provide a basis for the hepatitis B virus(HBV) infection pathogenesis by screening HBV surface antigen(HBsAg) PreS1-interacting proteins in human liver.Methods:Membrane protein of normal human liver tissue was analyzed by two-dimensional gel electrophoresis and Far-Western blot using an N-terminally myristoylated peptide(HBV PreS / 1-48myr) and anti-GST monoclonal antibody.Several proteins were identified using mass spectrum.Results:Fifteen proteins as candidates were presented by mass spectrum,and we considered that PreS1 binds to membrane protein named Ezrin.Conclusion:It is possible that Ezrin plays an important role in the process of HBV infection.The physiological function of PreS1 binding to Ezrin needs to be further studied.
Keywords:PreS1  Ezrin
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