| 需钠弧菌WPAGA4菌株3条琼胶酶基因克隆、表达与酶学性质分析 |
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| 引用本文： | 童秀芳,王宁,张孟源,王雯欣,张牟莹珂,邓帅,王健鑫,曾润颖,曲武.需钠弧菌WPAGA4菌株3条琼胶酶基因克隆、表达与酶学性质分析[J].微生物学报,2023,63(9):3667-3678. |
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| 作者姓名： | 童秀芳 王宁 张孟源 王雯欣 张牟莹珂 邓帅 王健鑫 曾润颖 曲武 |
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| 作者单位： | 浙江海洋大学海洋科学与技术学院, 浙江 舟山 316000;自然资源部海洋生物资源开发利用工程技术创新中心, 福建 厦门 361000 |
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| 基金项目： | 浙江省“尖兵” “领雁”研发攻关计划(2022C02040)；浙江省教育厅一般科研项目(Y202147737)；舟山市科技局项目(2021C21009)；大学生创新创业训练项目(202110340051) |
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| 摘 要： | 【目的】本文拟从西太平洋深海沉积物中分离得到的需钠弧菌(Vibrio natriegens) WPAGA4菌株中克隆并表达3条β-琼胶酶基因agaW3418、agaW3419和agaW3472，并对其酶学性质进行研究。【方法】通过克隆表达技术将得到的3条琼胶酶基因在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中进行表达，通过二硝基水杨酸(DNS)法测定重组琼胶酶的酶活，并对其中活性最优的一种琼胶酶进行热稳定性和产酶条件优化。【结果】三种琼脂酶均为属于GH50家族。AgaW3418、AgaW3419和AgaW3472在温度分别为50、60和30℃以及pH值分别为6.0、7.0和7.0条件下，发挥作用的能力最强。其中琼胶酶AgaW3472表现出最优的酶活性质，在20℃下保持良好的稳定性，且在SOB (super optimal broth)培养基条件下以1%(质量体积分数)的乳糖作为碳源，同时添加20 mmol/L MgCl2，并将诱导温度和异丙基-1硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-1 thio-β-D-galactoside, IPTG)浓度分别设置为37℃和0.1 mmol/L时能够获得...
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| 关 键 词： | 琼胶酶 琼胶寡糖 深海弧菌 冷适应性 |
| 收稿时间： | 2023/2/5 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2023/6/1 0:00:00 |
Cloning, expression, and characterization of three agarases in Vibrio natriegens WPAGA4 |
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| TONG Xiufang,WANG Ning,ZHANG Mengyuan,WANG Wenxin,ZHANG Mouyingke,DENG Shuai,WANG Jianxin,ZENG Runying,QU Wu.Cloning, expression, and characterization of three agarases in Vibrio natriegens WPAGA4[J].Acta Microbiologica Sinica,2023,63(9):3667-3678. |
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| Authors: | TONG Xiufang WANG Ning ZHANG Mengyuan WANG Wenxin ZHANG Mouyingke DENG Shuai WANG Jianxin ZENG Runying QU Wu |
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| Institution: | Marine Science and Technology College, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316000, Zhejiang, China;Technology Innovation Center for Exploitation of Marine Biological Resources, Ministry of Natural Resources, Xiamen 361000, Fujian, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | agarose agarose oligosaccharides Vibrio cold adaptation |
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